重组人GPRASP2蛋白:研究指南与实验方案
重组人GPRASP2蛋白:研究指南与实验方案
Recombinant Human GPRASP2 Protein 是一种纯化的研究级试剂,专为支持人细胞系统中G蛋白偶联受体转运、溶酶体分选及下游信号调控研究而设计。
- 产品名称
- 重组人GPRASP2蛋白
- 货号
- rp375068
- 蛋白全称
- G蛋白偶联受体相关分选蛋白2(GPRASP2)
- 来源
- 重组来源,人源;表达系统请向制造商确认
- 主要应用
- 生化检测、结合实验、GPCR转运研究
- 储存建议
- 收到后于-80°C储存;避免反复冻融(具体条件请参阅质检证书)
- 纯度
- 请参阅质检证书确认;此类重组蛋白通常SDS-PAGE纯度≥90%
蛋白背景:GPRASP2的生物学意义
GPRASP2(G蛋白偶联受体相关分选蛋白2),又称GASP-2,是GASP蛋白家族成员。该家族蛋白的特征在于能够与G蛋白偶联受体(GPCR)的C末端尾部相互作用,在调控受体内吞后分选中发挥关键作用。通过将内化受体引导至溶酶体降解或再循环通路,GPRASP2影响受体的下调及再敏感化过程,进而调节GPCR介导信号的强度与持续时间。
GPRASP2在中枢神经系统及外周组织中均有表达,可调控阿片受体等A类GPCR。对GPRASP2的研究对于理解成瘾、痛觉信号传导及精神疾病具有重要意义。重组人GPRASP2蛋白使研究人员能够在体外开展机制研究,无需依赖内源性表达水平或细胞系统。
复溶与操作方案
以下为重组人GPRASP2蛋白操作的通用方案。请务必参阅随批次提供的产品专属质检证书(CoA)和数据表,因具体条件可能因批次而异。
- 收到后:开瓶前先将小瓶短暂离心(如低速5–10秒),使冻干粉末或冷冻液体沉至管底。
- 复溶(如为冻干粉):用无菌超纯水或适当缓冲液(如含0.1% BSA的PBS,pH 7.4)复溶至工作储备浓度。推荐复溶体积应在CoA上注明。轻柔吹打混匀,切勿涡旋振荡。
- 分装:复溶后立即进行单次使用分装,以减少反复冻融导致的蛋白降解。
- 储存:工作分装液于-80°C保存;短期储存(不超过1周)可在-20°C进行,具体请参阅CoA。不可长期4°C保存。
- 操作:实验准备过程中将蛋白置于冰上。使用低蛋白吸附离心管以减少吸附损失。除非实验方案需要,避免引入去污剂。
注:所有具体缓冲液组成、浓度及储存时限均须以Aladdin Scientific提供的批次专属CoA为准。
推荐应用与实验注意事项
重组人GPRASP2蛋白适用于多种体外生化及无细胞应用。以下为此类蛋白的代表性用途,具体适用性请参阅产品数据表:
- 蛋白-蛋白相互作用研究:用于免疫共沉淀(co-IP)、pull-down实验或表面等离子共振(SPR),表征GPRASP2结合伴侣,尤其是GPCR的C末端结构域。
- 结合实验:作为GST pull-down或His标签亲和捕获实验中的诱饵或猎物蛋白,用于绘制相互作用界面图谱。
- 结构生物学:可作为抗体验证抗原或Western blot分析的参考标准品。
- 酶联免疫吸附实验(ELISA)标准品:可用作针对GPRASP2的夹心ELISA格式中的阳性对照或定量标准品。
- 功能重建研究:在重建囊泡或脂质体系统中探索受体分选机制。
研究人员应针对具体实验进行优化,包括蛋白浓度滴定、缓冲液相容性测试,并在每次实验中设置适当对照。
质量控制与规格参数
Aladdin Scientific对重组蛋白实施严格的质量控制程序。重组人GPRASP2蛋白(rp375068)的以下质控参数为该类产品的典型指标,经验证的具体数值载于批次专属质检证书中:
- 纯度评估:在还原条件下进行SDS-PAGE以确认蛋白纯度。研究级重组蛋白的目标纯度通常≥90%,但应以批次数据为准。
- 蛋白鉴定:通过质谱或经验证的抗GPRASP2抗体Western blot确认蛋白质身份。
- 内毒素水平:采用LAL(鲎变形细胞溶解物)法检测内毒素含量。细胞实验可接受的阈值通常为<1.0 EU/μg,具体请参阅CoA。
- 生物活性:功能活性数据(如适用)可包括受体结合实验或相互作用实验;批次专属活性数据请参阅数据表。
- 制剂组成:蛋白制剂(缓冲液、稳定剂、甘油含量)在CoA中注明,可能影响下游实验的相容性。
在启动实验前,请务必索取并审阅CoA,以确认该批次满足您的应用需求。
常见问题
GPRASP2是什么?它与GPCR研究有何关联?
GPRASP2(G蛋白偶联受体相关分选蛋白2)是GASP蛋白家族成员,能与GPCR胞内C末端尾部结合,将内化受体引导至溶酶体降解,从而调控受体下调与信号终止。该蛋白的研究在阿片受体转运、成瘾生物学及GPCR靶向药物开发领域具有重要价值。
如何复溶重组人GPRASP2蛋白以用于实验?
对于冻干制剂,开瓶前先短暂离心,然后用无菌超纯水或合适缓冲液(如含0.1% BSA的PBS,pH 7.4)轻柔复溶。轻轻吹打混匀,避免涡旋振荡。请务必参阅批次专属CoA获取确切复溶体积和缓冲液建议,复溶后立即分装并于-80°C单次使用储存。
重组人GPRASP2蛋白(rp375068)经验证适用于哪些应用?
该蛋白专为生化及无细胞应用设计,包括蛋白-蛋白相互作用研究(co-IP、pull-down、SPR)、ELISA标准曲线制备、Western blot参考标准及功能重建实验。具体应用适用性和经验证条件请参阅Aladdin Scientific提供的产品专属数据表和CoA。
如何储存重组人GPRASP2蛋白以保持活性?
收到后立即于-80°C储存。制备单次使用分装液,避免反复冻融导致蛋白聚集和活性丧失。短期储存(不超过一周)可在-20°C进行,但所有储存条件须以批次专属CoA为准。
重组人GPRASP2蛋白经过哪些质量控制检测?
该重组蛋白的质量控制通常包括SDS-PAGE纯度评估、质谱或Western blot蛋白鉴定,以及LAL法内毒素检测。同时可能提供功能活性数据。所有质控结果记录于批次专属质检证书(CoA)中,使用前请务必索取并审阅。
参考文献
- Simonin F, et al. GASP proteins: a new family of proteins interacting with GPCRs (review). General concept and potential future therapeutic implications. (General textbook-level reference; specific citation details require verification)
- Aladdin Scientific. Recombinant Human GPRASP2 Protein, SKU rp375068 — Product Datasheet and Certificate of Analysis. Aladdin Scientific.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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