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重组人GRAMD1B蛋白:研究指南

Recombinant Human GRAMD1B Protein是一种研究级重组蛋白,可帮助科学家探究含GRAM结构域蛋白1B在细胞内胆固醇感应及膜接触位点脂质转运中的功能。

产品名称
重组人GRAMD1B蛋白
货号
rp366660
蛋白家族
GRAMD1家族;含GRAM结构域及StART样脂质转运结构域
主要研究领域
胆固醇稳态、脂质转运、膜接触位点生物学
推荐储存条件
-80°C长期储存;避免反复冻融
物种
人(智人)

GRAMD1B是什么?为何重要?

GRAMD1B(含GRAM结构域蛋白1B)是GRAMD1蛋白家族的成员,定位于内质网(ER)膜。它含有N端GRAM结构域——一种感应质膜上可访问胆固醇的脂质结合模块——以及负责非囊泡胆固醇转运的C端StART样(类固醇生成急性调节蛋白相关脂质转运)结构域。

GRAMD1B在ER–质膜(ER–PM)接触位点发挥功能,与GRAMD1家族其他成员(GRAMD1A和GRAMD1C)协作,将质膜内叶多余的胆固醇提取并重新分配至内质网。该过程对胆固醇稳态至关重要,GRAMD1蛋白的失调与心血管疾病、神经系统疾病及肿瘤生物学中细胞脂质平衡的改变有关。

在受控实验室条件下生产的重组人GRAMD1B蛋白,为研究人员提供了一种可靠工具,适用于体外生化实验、结构研究、蛋白-脂质相互作用分析及抗体验证。

复溶与储存指南

复溶:使用前,短暂离心小瓶,使冻干材料集中于管底。用无菌超纯水或适当的生理缓冲液(如PBS,pH 7.4)将蛋白复溶至0.1–1.0 mg/mL的储存浓度。轻轻吸打混匀;勿涡旋,因剪切力可导致蛋白变性。使用前在室温下平衡10–15分钟。

储存条件:收到后将冻干蛋白储存于-20°C或-80°C。复溶后,分装为单次使用量,避免反复冻融导致活性降低。复溶蛋白在4°C下可稳定保存至多1周;加入载体蛋白(如0.1% BSA)作为稳定剂后,可在-80°C下长期保存。

注意:货号rp366660的实际储存条件和稳定性数据应以随货提供的质量检测报告(CoA)为准。

实验应用

重组人GRAMD1B蛋白适用于多种体外研究应用:

  • 脂质转运实验:用于研究供体与受体膜囊泡之间的非囊泡胆固醇转运,可采用荧光或放射性标记实验格式。
  • 蛋白-蛋白相互作用研究:用于共免疫沉淀、pull-down或表面等离子共振(SPR)实验,以图谱化与其他GRAMD1家族成员、OSBP相关蛋白或VAPA/VAPB锚定蛋白的相互作用。
  • 结构生物学:可作为抗体生产的抗原,或作为聚焦于GRAM或StART样结构域的X射线晶体学和冷冻电镜研究的底物。
  • ELISA及蛋白质印迹标准品:用作检测内源性GRAMD1B免疫实验的阳性对照或定量标准品。
  • 脂质探针结合实验:使用荧光标记脂质探针,在板式或脂质体结合格式中表征胆固醇或磷酸肌醇结合亲和力。

研究人员应针对每种应用,通过实验优化蛋白浓度和缓冲液条件。

质量、纯度与验证

Aladdin Scientific的重组人GRAMD1B蛋白(rp366660)在严格的质量控制流程下生产。研究人员应查阅每批次的质量检测报告(CoA),其中记录了纯度(通常通过SDS-PAGE和/或HPLC评估)、身份确认(如质谱或蛋白质印迹)、内毒素水平(LAL法)以及适用时的生物活性。

需从CoA确认的关键质量参数:

  • 纯度(%):通常通过还原性SDS-PAGE评估,≥90%
  • 内毒素水平:通常<1.0 EU/µg(对细胞实验尤为重要)
  • 宿主表达系统(如大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞或HEK293哺乳动物细胞)
  • 标签信息(如His标签、GST标签)及标签位置(N端或C端)

注意:本文件未确认rp366660的具体纯度数值、内毒素水平、表达系统和标签详情,必须通过官方CoA或联系Aladdin Scientific技术支持进行核实。

订购信息与技术支持

重组人GRAMD1B蛋白可通过Aladdin Scientific以货号rp366660订购。如需下单,请联系您当地的Aladdin Scientific代表,使用在线订购平台,或直接引用货号提交采购订单。

如有关于复溶方案、实验优化或与特定实验系统兼容性的技术问题,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。如需定制配方或大批量采购,可按需申请。

在发表文章和内部报告中,请务必注明CoA上的批次号,以确保实验数据的完整可追溯性和可重复性。

常见问题

重组人GRAMD1B蛋白推荐使用哪种复溶缓冲液?

我们建议使用无菌超纯水或PBS(pH 7.4)将蛋白复溶至0.1–1.0 mg/mL。轻轻吸打混匀,使用前在室温下平衡10–15分钟。请以批次特定的CoA确认推荐缓冲液,因最佳条件可能因配方而异。

如何储存复溶后的GRAMD1B蛋白以保持其活性?

复溶后立即将蛋白分装为单次使用量,并储存于-80°C。添加载体蛋白(如0.1% BSA)可提高稳定性。避免反复冻融,因多次冻融会显著降低蛋白活性和完整性。

重组人GRAMD1B蛋白适用于细胞实验吗?

该蛋白可能适用于某些细胞实验;但在用于细胞培养实验前,必须从CoA核实内毒素水平和配方详情。低内毒素水平(通常<1.0 EU/µg)对于避免敏感细胞实验中产生干扰性炎症反应至关重要。

rp366660使用何种表达系统生产?

rp366660的具体表达系统(如大肠杆菌、昆虫细胞或哺乳动物HEK293细胞)在公开产品说明中未予确认。请参阅质量检测报告或联系Aladdin Scientific技术支持,以获取已确认的表达系统和标签详情。

GRAMD1B蛋白能否用作ELISA中定量内源性GRAMD1B的标准品?

是的,重组GRAMD1B蛋白可作为ELISA格式中的定量标准品或阳性对照,前提是检测抗体能识别重组形式。研究人员在建立标准曲线前,应验证重组蛋白与抗体之间的交叉反应性。

参考文献

  1. Naito T, et al. Movement of accessible plasma membrane cholesterol by the GRAMD1 lipid transfer protein complex. eLife. 2019.
  2. Besprozvannaya M, et al. GRAM domain proteins specialize functionally distinct ER-PM contact sites in human cells. eLife. 2018.
  3. Laraia L, et al. The cholesterol transfer protein GRAMD1A regulates accessible cholesterol levels in the plasma membrane. Nature Chemical Biology. 2019.

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

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Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《重组人GRAMD1B蛋白:研究指南》. 阿拉丁知识库,更新于 2026年10月30日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/recombinant-human-gramd1b-protein-research-guide.html
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