重组人GRAMD1C蛋白:生物学特性与研究应用
重组人GRAMD1C蛋白:生物学特性与研究应用
Recombinant Human GRAMD1C Protein是属于GRAMD1家族的脂质感知与胆固醇转运蛋白,具有GRAM结构域和类StART脂质转运结构域,是研究细胞内胆固醇稳态及膜接触位点生物学的重要工具。
- 蛋白名称
- 重组人GRAMD1C蛋白
- 产品编号
- rp369104
- 蛋白家族
- GRAMD1家族(含GRAM结构域蛋白)
- 关键结构域
- GRAM结构域、类StART脂质转运结构域、跨膜区
- 主要功能
- 膜接触位点处的细胞内胆固醇感知与非囊泡脂质转运
- 物种来源
- 人(智人)
- 推荐应用
- 体外结合实验、脂质转运实验、蛋白质印迹、酶联免疫吸附测定、蛋白相互作用研究
GRAMD1C简介:基因、蛋白家族与结构域组成
GRAMD1C(含GRAM结构域蛋白1C),又称ASTER-C,是GRAMD1蛋白家族成员之一,该家族还包括GRAMD1A(ASTER-A)和GRAMD1B(ASTER-B)。该家族的特征在于具有保守的GRAM结构域(葡萄糖基转移酶、Rab样GTPase激活蛋白和肌管蛋白相关结构域)、负责结合和转运胆固醇的中央类StART(类固醇生成急性调节蛋白相关脂质转运)结构域,以及将蛋白锚定于内质网(ER)膜的一个或多个C末端跨膜螺旋。
人类GRAMD1C基因位于9号染色体,编码的蛋白在多种组织中广泛表达。在内质网与质膜之间的膜接触位点处,GRAMD1C感知可利用的胆固醇,并介导其从质膜向内质网的非囊泡转运,从而参与细胞胆固醇稳态调节和脂质重分布。
生物学功能:胆固醇感知、脂质转运与代谢意义
GRAMD1C在维持细胞内胆固醇平衡中发挥核心作用。类StART结构域直接与胆固醇结合,使该蛋白能够从质膜内叶提取多余的可利用胆固醇,并将其输送至内质网。进入内质网后,胆固醇可被ACAT酶酯化储存,或分配至其他细胞器。
GRAM结构域作为阴离子脂质传感器,识别富集于质膜内叶的磷脂酰丝氨酸和磷脂酰肌醇磷酸酯(PIPs)。这种脂质感知能力以胆固醇依赖性方式将GRAMD1C募集至内质网–质膜接触位点,从而将胆固醇可利用性与转运活性相偶联。
GRAMD1C介导的胆固醇转运失调已与脂质代谢异常相关疾病有所关联,包括动脉粥样硬化研究模型,以及某些甾醇通量改变支持肿瘤细胞增殖的癌症类型。这些关联使GRAMD1C在代谢疾病和肿瘤学研究中受到日益广泛的关注。
重组人GRAMD1C蛋白的研究应用
重组人GRAMD1C蛋白(产品编号:rp369104)适用于多种生化和细胞生物学研究应用:
- 体外脂质转运实验:重组蛋白可用于在确定的脂质体体系中重建胆固醇转运活性,实现甾醇提取和输送动力学的定量测量。
- 蛋白相互作用研究:共免疫沉淀(co-IP)、pull-down实验和表面等离子体共振(SPR)实验可探究GRAMD1C与内质网膜蛋白、其他GRAMD1家族成员或调控因子的相互作用。
- 结构生物学:重组GRAMD1C蛋白可作为抗体制备的抗原,或作为蛋白质印迹和基于ELISA检测实验的参考标准。
- 药物靶点验证:在代谢疾病和癌症研究背景下,GRAMD1C可作为靶点,用于筛选调控细胞内胆固醇通量的小分子化合物。
- ELISA及免疫检测开发:高纯度重组蛋白适合用作免疫原或免疫检测开发中的校准标准品。
操作、储存与质量注意事项
为维持重组人GRAMD1C蛋白的活性和完整性,研究人员应遵循以下最佳操作规范:
- 储存:收到产品后,短暂离心小瓶,于–80 °C长期保存。避免反复冻融,以防蛋白聚集和活性丧失。冻存前将蛋白分装为单次用量。
- 复溶:若以冻干形式提供,请按照产品说明书使用推荐缓冲液(通常为磷酸盐缓冲盐水,pH 7.4,补充0.1% BSA等载体蛋白)进行复溶。使用前使溶液在室温下平衡。
- 操作条件:实验准备过程中将复溶蛋白置于冰上,以减少降解。使用低吸附管以降低吸附损失。
- 质量保证:Aladdin Scientific通过SDS-PAGE和/或蛋白质印迹分析确认分子量和纯度,并通过LAL法检测内毒素水平。批次特异性分析证书(CoA)可按需提供。
请参阅产品专属说明书,以获取具体缓冲液组成、浓度、纯度等级及推荐工作浓度信息,因批次不同可能有所差异。
订购信息与技术支持
重组人GRAMD1C蛋白可通过Aladdin Scientific以产品编号rp369104订购。本产品仅供科学研究使用,不适用于诊断、治疗或兽医应用。
如需定制规格、批量报价或特定配方要求,请联系我们的技术销售团队。我们的科学支持专家可协助进行应用优化、方案推荐和实验设计。
为确保产品真实性和批次可追溯性,请始终通过Aladdin Scientific官方渠道或授权经销商订购。分析证书(CoA)和安全数据表(SDS)可按需提供,或从产品页面下载。
常见问题
GRAMD1C在胆固醇代谢中的生物学作用是什么?
GRAMD1C在内质网–质膜接触位点发挥胆固醇感知和非囊泡转运功能。其类StART结构域结合胆固醇,介导其从质膜内叶提取并输送至内质网,在那里胆固醇可被酯化或重新分配,从而维持细胞内甾醇平衡。
重组人GRAMD1C蛋白(rp369104)采用何种表达体系生产?
rp369104所用具体表达体系请参阅产品说明书或联系Aladdin Scientific技术支持确认,因为表达体系(如大肠杆菌、杆状病毒/昆虫细胞、哺乳动物HEK293细胞)可能因批次和配方而有所不同。每批次提供的分析证书(CoA)将注明表达宿主和标签信息。
如何储存重组人GRAMD1C蛋白以维持其稳定性?
收到蛋白后立即在–80 °C条件下储存。冻存前将蛋白分装为单次用量,以避免反复冻融。实验过程中将蛋白置于冰上,并使用低吸附微量离心管。请参阅批次专属说明书,了解不同储存条件下的有效期和稳定性数据。
重组人GRAMD1C蛋白是否适用于脂质转运实验?
是的,重组人GRAMD1C蛋白非常适用于体外脂质转运实验。类StART结构域保留胆固醇结合活性,可实现供体与受体脂质体或膜组分之间胆固醇转运的重建。研究人员应根据其具体实验格式,通过实验摸索优化蛋白浓度和缓冲液条件。
该重组蛋白是否可作为抗原用于抗体制备?
是的,高纯度重组人GRAMD1C蛋白可作为免疫原,用于动物免疫实验中制备GRAMD1C特异性抗体,也可作为ELISA抗体筛选中的包被抗原。在用于免疫方案之前,请从分析证书(CoA)核实纯度和内毒素水平。
参考文献
- Sandhu J, Li S, Fairall L, et al. Aster proteins facilitate nonvesicular plasma membrane to ER cholesterol transport in mammalian cells. Cell. 2018;175(2):514-529.e20. doi:10.1016/j.cell.2018.08.033
- Ferrari A, He C, Bhatt DL, et al. Aster-dependent nonvesicular transport facilitates dietary cholesterol absorption. Science. 2020;370(6513):eabc7255. doi:10.1126/science.abc7255
- Naito T, Ercan B, Kralt A, et al. Movement of accessible plasma membrane cholesterol by the GRAMD1 lipid transfer protein complex. eLife. 2019;8:e51401. doi:10.7554/eLife.51401
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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