重组人HPDL蛋白:研究指南与应用
重组人HPDL蛋白:研究指南与应用
Recombinant Human HPDL Protein是人类4-羟基苯丙酮酸双加氧酶样(HPDL)酶的重组形式,因其在线粒体功能中的关键作用及与早发性神经系统疾病的关联而受到广泛关注。
- 产品名称
- 重组人HPDL蛋白
- 货号
- rp367770
- 基因名称
- HPDL(4-羟基苯丙酮酸双加氧酶样)
- 物种
- 人(智人)
- 蛋白类别
- 重组酶/线粒体蛋白
- 主要研究领域
- 线粒体生物学、神经系统疾病、酶功能研究
HPDL的生物学背景
HPDL(4-羟基苯丙酮酸双加氧酶样蛋白)是一种核编码基因产物,定位于线粒体。它属于铁离子和2-氧戊二酸依赖性双加氧酶大家族,与参与酪氨酸分解代谢及辅酶Q生物合成途径的4-羟基苯丙酮酸双加氧酶(HPD)具有结构同源性。
新兴研究表明,HPDL是一种线粒体靶向蛋白,其确切的酶学底物和催化机制仍是活跃的研究课题。HPDL基因的功能缺失变异已被证实与一系列早发性常染色体隐性神经系统疾病相关,包括儿童患者的痉挛性截瘫和髓鞘发育不良性脑白质营养不良。这些临床观察表明,HPDL在维持神经元和线粒体完整性方面发挥着不可替代的关键作用。
重组人HPDL蛋白为研究人员提供了一种纯化、定义明确的工具,可在受控的体外条件下研究该蛋白的生化特性、底物特异性及相互作用伴侣。
蛋白特性与质量考量
重组人HPDL蛋白(rp367770)采用重组表达系统生产,以确保批次间一致性和高纯度,适用于严格的生化检测。在评估重组蛋白用于研究时,应考虑以下质量属性:
- 纯度:高纯度制备(通常SDS-PAGE检测≥90%)可最大程度减少污染蛋白对实验结果的干扰。研究人员应索取分析证书(CoA)以核实批次特定的纯度数据。
- 生物活性:通过功能性检测确认活性(如适用),可确保重组蛋白保留类天然的酶学或结合特性。
- 配方与稳定性:缓冲液组成、稳定剂(如甘油、BSA)的存在以及推荐储存温度(长期储存通常为-80°C)直接影响蛋白稳定性和实验重现性。
- 内毒素水平:对于细胞实验和体内应用,低内毒素含量对于防止非特异性炎症反应至关重要。
建议研究人员查阅rp367770的产品数据表和CoA以获取批次特定规格。如需更多表征数据,请联系阿拉丁科学技术支持团队。
推荐操作与储存规程
正确操作和储存重组人HPDL蛋白对于保持其完整性和活性至关重要。以下通用指南适用于此类重组蛋白:
- 收货时:立即检查货物状态。重组蛋白通常在干冰条件下运输。如产品在运输过程中未能保持冷冻状态,请在使用前联系阿拉丁科学客户服务。
- 复溶:若产品为冻干形式,按数据表说明使用推荐缓冲液复溶。将小瓶在室温下平衡数分钟,然后轻轻吹打溶解。避免涡旋振荡,以防蛋白变性。
- 分装:为减少反复冻融,复溶后立即制备单次使用的分装液。反复冻融(通常超过2-3次)会显著降低蛋白活性和完整性。
- 储存:分装液于-80°C长期储存。工作分装液可根据配方于-20°C短期保存。具体储存建议请参阅产品数据表。
- 工作浓度:针对每种检测格式以实验方式优化蛋白浓度。建议在开展大规模检测前先进行浓度范围的预实验。
注意:请务必遵循rp367770产品数据表中提供的具体说明,因配方特定条件可能与上述通用指南有所不同。
研究应用
重组人HPDL蛋白(rp367770)是一种多功能研究试剂,适用于多种实验场景:
- 酶学表征研究:在体外研究HPDL的底物特异性、辅因子需求(如铁离子、2-氧戊二酸)及动力学参数。此类研究对于明确该酶的精确生化功能至关重要。
- 蛋白质相互作用研究:将纯化的HPDL蛋白用于pull-down实验、共免疫沉淀阳性对照或表面等离子体共振(SPR)实验,以鉴定和验证线粒体蛋白质组内的相互作用伴侣。
- 抗体验证:重组HPDL蛋白可作为阳性对照抗原,用于验证抗HPDL抗体在蛋白质印迹(Western blot)、ELISA和免疫沉淀应用中的特异性。
- 结构生物学:高纯度重组蛋白制备物适用于晶体学、冷冻电镜(cryo-EM)及其他结构表征方法,以阐明HPDL的三维结构。
- 疾病机制研究:鉴于HPDL功能缺失与儿童神经系统疾病的关联,重组HPDL蛋白可用于研究致病机制、筛选小分子调节剂或开发诊断工具。
- 辅酶Q生物合成研究:鉴于HPDL与HPD的同源性及其线粒体定位,该蛋白可能是研究CoQ生物合成途径及相关代谢过程的重要工具。
订购与技术支持
重组人HPDL蛋白可通过阿拉丁科学以货号rp367770订购。如需下单或申请报价,请访问阿拉丁科学官方网站或联系您所在地区的销售代表。
如有关于实验设计、推荐检测条件或本产品实验结果解读的技术咨询,请联系阿拉丁科学技术支持团队。我们的科学家可协助进行方案优化和故障排除。
如需定制数量、大批量订单或特殊配方,可按需申请。请联系阿拉丁科学客户服务以了解定制生产方案的详细信息。
内部产品标识符参考:absea#PP-18234(rp367770)
常见问题
HPDL蛋白是什么,为什么它对研究很重要?
HPDL(4-羟基苯丙酮酸双加氧酶样蛋白)是一种线粒体靶向酶,与参与酪氨酸分解代谢和辅酶Q生物合成的HPD具有同源性。其研究重要性源于发现HPDL基因的功能缺失突变与早发性常染色体隐性神经系统疾病(包括痉挛性截瘫和脑白质营养不良)相关,使其成为理解线粒体和神经元生物学的关键研究靶点。
如何储存和操作重组人HPDL蛋白(rp367770)以保持其活性?
收货后,将重组人HPDL蛋白于-80°C长期储存。复溶后(如为冻干形式),制备单次使用的分装液以避免反复冻融,反复冻融会降低蛋白完整性和活性。避免涡旋振荡,应轻轻吹打混匀。请务必参阅rp367770的具体产品数据表,以获取批次特定的储存和操作说明。
重组人HPDL蛋白在实验室中的主要应用有哪些?
重组人HPDL蛋白(rp367770)支持广泛的研究应用,包括体外酶学表征、蛋白质相互作用研究(如pull-down和SPR实验)、Western blot和ELISA中的抗体验证、结构生物学研究(晶体学、冷冻电镜)以及HPDL相关神经系统疾病致病机制的研究。该蛋白还可用于辅酶Q生物合成和线粒体代谢的相关研究。
如何确定HPDL蛋白在我的实验中的最佳工作浓度?
重组人HPDL蛋白的最佳工作浓度必须针对每种特定的检测格式和实验系统以实验方式确定。建议在开展大规模实验前,先使用一系列蛋白浓度进行预实验。请查阅产品数据表,并联系阿拉丁科学技术支持以获取针对您应用的具体指导。
重组人HPDL蛋白能否用于体内研究?
重组人HPDL蛋白主要用于体外研究应用,其用于体内研究的适用性取决于配方、内毒素水平和具体实验要求。考虑体内应用的研究人员应从分析证书中核实内毒素含量,并咨询阿拉丁科学技术支持,以评估产品规格是否满足其预期体内研究的要求。
参考文献
- Aladdin Scientific Product Datasheet: Recombinant Human HPDL Protein, SKU rp367770 (absea#PP-18234).
- Wiessner M, et al. Bi-allelic variants in HPDL cause pure and complicated hereditary spastic paraplegia. Brain. 2021.
- Husain RA, et al. HPDL mutations cause a neurodegenerative condition with leukodystrophy. Brain. 2020.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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