重组人HSP90AA2P蛋白:研究指南
重组人HSP90AA2P蛋白:研究指南
Recombinant Human HSP90AA2P Protein是Aladdin Scientific提供的人源HSP90AA2P基因产物的重组形式(货号:rp370177),用于支持热休克蛋白生物学、分子伴侣通路及细胞应激反应机制的研究。
- 产品名称
- 重组人HSP90AA2P蛋白
- 货号
- rp370177
- 蛋白家族
- HSP90热休克蛋白家族
- 物种来源
- 人(智人)
- 应用
- 仅限科研使用;分子伴侣与应激反应研究
- 储存建议
- 储存于-80°C;避免反复冻融(具体条件以CoA为准)
HSP90AA2P的生物学背景
HSP90AA2P是人类基因组中属于HSP90(热休克蛋白90)超家族的一个基因位点。热休克蛋白是一类保守的分子伴侣家族,在正常生理条件及细胞应激状态下,对蛋白质的折叠、组装、稳定和降解均发挥重要作用。HSP90家族尤其对于维持蛋白质稳态以及支持参与信号转导、细胞周期调控和凋亡的众多客户蛋白的成熟至关重要。
HSP90AA2P已被注释为假基因相关位点;然而,源自此类位点的重组蛋白是研究基因表达细节、潜在蛋白产物及其在更广泛HSP90网络中相互作用的重要工具,有助于更全面地认识人类细胞中热休克蛋白的多样性。
产品规格与质量
Aladdin Scientific的重组人HSP90AA2P蛋白(货号:rp370177)采用重组表达系统生产,以确保批次间一致性,满足严格的科研应用需求。需在产品质量证书(CoA)上确认的关键质量属性包括:
- 纯度:通过SDS-PAGE和/或HPLC评估;此类重组蛋白的典型目标纯度≥85%(具体规格以CoA为准)。
- 制剂:通常以经过优化的缓冲液形式提供,以保证蛋白稳定性;确切的缓冲液组成和浓度详见产品说明书。
- 内毒素水平:通过LAL法检测;低内毒素对细胞实验至关重要(限量以CoA为准)。
- 生物活性:功能验证方法详见产品说明书。
所有规格参数均应以随批次提供的最新质量证书(CoA)为准。
操作、复溶与储存规程
正确操作重组人HSP90AA2P蛋白对于在实验全程保持其完整性和活性至关重要。请遵循以下指南:
- 收货:收货后立即检查包装完整性,并将蛋白转移至推荐储存温度。切勿在室温下长时间放置。
- 复溶:若以冻干粉形式提供,开瓶前轻轻离心小瓶。按说明书规定,用适量无菌超纯水或推荐缓冲液复溶。静置数分钟后,用移液枪轻柔混匀;切勿涡旋振荡。
- 分装:复溶后立即制备单次使用的分装,以减少冻融次数,避免蛋白活性降低。
- 储存:长期保存时,将分装置于-80°C。短期使用(不超过1周)时,可根据制剂情况在-20°C储存(请以说明书为准)。
- 冻融:冻融次数限制在2–3次以内。每增加一次冻融均可能导致蛋白聚集和活性损失。
具体操作指南请始终以产品专属说明书和CoA为准。
研究应用
重组人HSP90AA2P蛋白仅供科研使用,可应用于与热休克蛋白生物学相关的多种实验场景:
- 蛋白质相互作用研究:用作pull-down实验或共免疫沉淀实验中的诱饵蛋白或猎物蛋白,以鉴定HSP90相互作用组中的结合伴侣。
- 抗体开发与验证:作为阳性对照抗原,用于验证抗HSP90AA2P抗体在Western blot、ELISA及免疫荧光中的特异性。
- 结构与生化表征:支持圆二色(CD)光谱或热稳定性(thermal shift)实验等生物物理研究,用于评估蛋白折叠与稳定性。
- 功能实验:在体外重建系统中研究潜在的分子伴侣活性或客户蛋白相互作用。
- 药物发现:在与HSP90抑制剂研究相关的小分子结合实验中用作靶蛋白。
本产品不适用于诊断、治疗或体内用途。
常见问题排查
研究人员在使用重组人HSP90AA2P蛋白时可能遇到以下问题。以下提供通用最佳实践解决方案:
| 问题 | 可能原因 | 建议措施 |
|---|---|---|
| 蛋白沉淀或聚集 | 复溶不当、冻融次数过多或缓冲液不兼容 | 按说明书复溶;减少冻融次数;使用前以10,000×g离心5分钟去除聚集体 |
| 活性低或无法检测 | 储存不当或批次过期导致蛋白降解 | 核实储存条件和批次有效期;使用新鲜解冻的分装;加入阳性对照 |
| ELISA或Western blot背景高 | 非特异性抗体结合或蛋白上样量过多 | 优化抗体稀释比例和封闭条件;滴定蛋白浓度 |
| SDS-PAGE条带大小异常 | 翻译后修饰、标签或降解片段 | 参考CoA确认预期分子量;核实还原/非还原条件 |
常见问题
HSP90AA2P是什么?与研究有何关联?
HSP90AA2P是人类基因组中属于HSP90热休克蛋白超家族的一个基因位点。源自该位点的重组蛋白用于研究分子伴侣网络、HSP90相互作用组中的蛋白-蛋白相互作用以及应激反应通路,也可作为抗体验证的抗原。
重组人HSP90AA2P蛋白应如何储存以保持稳定性?
长期储存时,将蛋白以单次使用的分装形式保存于-80°C,以避免反复冻融。根据制剂情况,短期储存可于-20°C保存。具体储存条件和有效期请以产品专属说明书和CoA为准。
该重组蛋白有哪些推荐应用?
重组人HSP90AA2P蛋白(rp370177)适用于蛋白-蛋白相互作用研究、抗体开发与验证(Western blot、ELISA、免疫荧光)、结构表征、体外功能实验以及药物发现中的小分子结合研究,仅供科研使用。
如何在复溶过程中减少蛋白聚集?
开瓶前轻轻离心小瓶,然后按说明书规定使用推荐缓冲液复溶。通过轻柔移液混匀,切勿涡旋振荡。立即制备单次使用的分装并储存于-80°C。使用前,将解冻蛋白以10,000×g离心5分钟以去除聚集体。
重组人HSP90AA2P蛋白是否适用于体内或临床用途?
不适用。本产品严格仅供科研使用,未经批准,不得用于人体或动物的诊断、治疗或任何体内应用。研究人员在操作重组蛋白时须遵守所有适用的机构及法规要求。
参考文献
- Taipale M, Jarosz DF, Lindquist S. HSP90 at the hub of protein homeostasis: emerging mechanistic insights. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2010;11(7):515–528. doi:10.1038/nrm2918
- Röhl A, Rohrberg J, Buchner J. The chaperone Hsp90: changing partners for demanding clients. Trends in Biochemical Sciences. 2013;38(5):253–262. doi:10.1016/j.tibs.2013.02.003
- Aladdin Scientific. Recombinant Human HSP90AA2P Protein, SKU rp370177. Product Datasheet. Aladdin Scientific.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)