重组人INO80D蛋白:研究指南与应用
重组人INO80D蛋白:研究指南与应用
Recombinant Human INO80D Protein是INO80染色质重塑复合物的重要辅助亚基,以重组方式生产,适用于ATP依赖性染色质调控的生化、结构及功能研究。
- 产品名称
- 重组人INO80D蛋白
- 货号
- rp366675
- 蛋白家族
- INO80染色质重塑复合物亚基
- 物种来源
- 人(智人)
- 应用
- 生化检测、蛋白质相互作用研究、染色质重塑研究
- 储存建议
- 于−80°C储存,避免反复冻融
- 形式
- 重组蛋白(通常为冻干或液态形式;请参阅质检报告确认)
INO80D的生物学背景
INO80D(亦称为TFPT或INO80染色质重塑复合物的特定亚基)是进化上保守的INO80复合物的组成部分。INO80复合物是属于SNF2家族的ATP依赖性染色质重塑因子,在DNA修复、DNA复制、转录调控及通过核小体重定位维护基因组稳定性方面发挥关键作用。
INO80D参与维持INO80全复合物的结构完整性和调控特异性。研究表明,INO80复合物的各亚基(包括INO80D)能够调节催化性ATPase亚基的酶活性并决定底物特异性。阐明INO80D的精确功能是染色质生物学的活跃研究方向,与肿瘤生物学、DNA损伤应答及基因表达调控密切相关。
产品规格与质量
阿拉丁科学(Aladdin Scientific)的重组人INO80D蛋白(货号:rp366675)采用重组表达系统生产,以确保批次间质量的一致性。研究人员应参阅每批次随附的质量检测报告(CoA),获取以下精确信息:
- 纯度:通过SDS-PAGE和/或HPLC评估;此类重组蛋白纯度通常≥85%(请以CoA为准)。
- 生物活性:功能活性数据(如适用)载于CoA中。
- 制剂:缓冲液组成、蛋白浓度及形式(冻干或液态)因批次而异,请参阅CoA。
- 内毒素水平:每批次均经过检测并报告,以确保适用于敏感检测体系。
所有规格参数均应以发货时提供的官方CoA为准进行核实。
操作、储存与复溶规程
妥善操作重组人INO80D蛋白对于保持其完整性和活性至关重要。请遵循以下通用指南:
- 接收:收到产品后,短暂离心小瓶以收集内容物,检查是否有损坏或污染迹象。
- 储存:长期储存于−80°C。短期使用(最长1周)可储存于−20°C。避免反复冻融,以防蛋白聚集和活性丧失。
- 复溶(冻干形式):按CoA指定,用无菌超纯水或推荐复溶缓冲液复溶冻干蛋白。开瓶前使小瓶恢复至室温,沿瓶壁缓慢加入复溶缓冲液,轻轻旋转或吸打混匀,切勿涡旋振荡。
- 分装:复溶后制备单次使用的分装,以尽量减少冻融次数。
- 工作浓度:针对每种检测方案通过实验确定最佳工作浓度。可参考已发表文献获取INO80复合物亚基检测条件的参考信息。
注意:请务必参阅产品专属CoA和数据表,批次特定说明优先于本通用指南。
实验应用
重组人INO80D蛋白适用于染色质生物学及相关领域的多种研究应用:
- 蛋白质相互作用研究:用于免疫共沉淀(Co-IP)、pull-down检测或表面等离子体共振(SPR),以绘制INO80复合物内部或与外部结合配体的相互作用图谱。
- 生化重建:将INO80D整合到体外重建的INO80复合物组装体中,研究亚基对ATPase或核小体重塑活性的贡献。
- 结构研究:适用于冷冻电镜(cryo-EM)或X射线晶体学研究,作为解析INO80复合物结构的组件。
- 抗体验证:在Western印迹或ELISA中作为阳性对照抗原,用于验证抗INO80D抗体。
- 药物发现:以重组INO80D作为工具试剂,筛选靶向INO80复合物的小分子抑制剂或调节剂。
建议针对每种应用优化检测条件,并参阅相关原始文献获取实验参考。
常见问题排查
使用重组人INO80D蛋白的研究人员可能遇到以下问题,以下指南针对常见挑战提供建议:
| 问题 | 可能原因 | 建议措施 |
|---|---|---|
| 蛋白聚集 | 反复冻融或储存不当 | 制备单次使用分装;于−80°C储存 |
| 功能检测中活性偏低 | 蛋白降解或缓冲液条件不佳 | 核实储存条件;优化缓冲液pH、盐浓度及辅因子(如ATP、Mg²⁺) |
| Western印迹无信号 | 抗体不匹配、变性条件不当或上样量不足 | 使用经验证的抗INO80D抗体;用考马斯亮蓝或总蛋白染色确认上样量 |
| 批次间结果不一致 | 批次间差异 | 始终参阅批次专属CoA;设置内部阳性对照 |
如遇无法解决的技术问题,请携带批次号和CoA详情联系阿拉丁科学技术支持团队。
常见问题
INO80D在INO80复合物中的功能是什么?
INO80D是INO80 ATP依赖性染色质重塑复合物的辅助亚基,被认为参与复合物的结构组装和调控特异性,调节催化亚基的ATPase活性并影响核小体重塑结果。其精确的分子功能仍是当前活跃的研究领域。
应如何储存重组人INO80D蛋白以维持其活性?
重组人INO80D蛋白应于−80°C长期储存以保持稳定性。复溶后应制备单次使用分装,避免反复冻融。请务必参阅质量检测报告(CoA)获取批次特定的储存和制剂说明。
重组人INO80D蛋白适用于哪些应用?
本蛋白适用于蛋白质相互作用研究(Co-IP、pull-down、SPR)、INO80复合物的体外生化重建、结构生物学研究(冷冻电镜、晶体学)、抗体验证(作为阳性对照抗原)以及靶向INO80复合物的药物发现小分子筛选。
如何复溶冻干的重组人INO80D蛋白?
开瓶前使小瓶恢复至室温,将推荐的复溶缓冲液(无菌超纯水或CoA指定缓冲液)沿瓶壁缓慢加入,通过旋转或轻柔吸打混匀,切勿涡旋振荡。制备单次使用分装后于−80°C储存。
在哪里可以找到我所购批次rp366675的纯度和活性数据?
纯度、活性、制剂及内毒素数据均载于每批次专属的质量检测报告(CoA)中。CoA随货提供,也可携带批次号联系阿拉丁科学客户服务团队获取。
参考文献
- Gerhold, C.B. & Gasser, S.M. INO80 and SWR complexes: relating structure to function in chromatin remodeling. Trends in Cell Biology, 2014.
- Watanabe, S. & Peterson, C.L. The INO80 family of chromatin-remodeling enzymes: regulators of histone variant dynamics. Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology, 2010.
- Aladdin Scientific. Recombinant Human INO80D Protein (rp366675) Certificate of Analysis. Aladdin Scientific, Shanghai.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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