NG,NG'-二甲基-L-精氨酸(SDMA)操作与应用实验方案
NG,NG'-二甲基-L-精氨酸(SDMA)操作与应用实验方案
NG,NG'-二甲基-L-精氨酸(SDMA)是一种对称性内源性甲基化精氨酸衍生物,可作为肾功能的临床相关生物标志物,同时也是生化研究中研究一氧化氮合酶调控的工具化合物。
- 化学名称
- NG,NG'-二甲基-L-精氨酸(对称性二甲基精氨酸,SDMA)
- Aladdin货号
- S413343
- Selleck参考编号
- S5838
- 主要研究应用
- 一氧化氮合酶(NOS)抑制研究及肾功能生物标志物检测
- 化合物类别
- 内源性甲基化精氨酸衍生物
- 推荐储存条件
- -20°C避光防潮保存(请以产品CoA为准)
背景与作用机制
NG,NG'-二甲基-L-精氨酸(SDMA)是L-精氨酸的内源性对称二甲基化衍生物,由蛋白质中精氨酸残基经II型蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMTs)催化发生翻译后甲基化修饰,随后经蛋白水解释放至循环系统中产生。
与其非对称同类物ADMA(非对称性二甲基精氨酸)不同,SDMA在生理浓度下不直接抑制一氧化氮合酶(NOS)。然而,SDMA可通过阳离子氨基酸转运体(CATs)与L-精氨酸竞争细胞摄取,从而潜在地影响细胞内L-精氨酸的可用性,间接影响NO的生成。SDMA主要通过肾脏排泄清除,使其血浆浓度成为反映肾小球滤过率(GFR)和肾脏整体功能的灵敏指标。
在研究应用中,SDMA(Aladdin货号:S413343)被用作质谱定量检测的参考标准品、精氨酸转运竞争研究的工具化合物,以及慢性肾病(CKD)和心血管疾病模型中的生物标志物分析物。
溶液配制与复溶
推荐溶剂:SDMA是一种极性强、水溶性好的两性离子氨基酸衍生物,可轻易溶于水和水性缓冲液(如PBS、生理盐水)。通常不需要也不建议将DMSO或有机溶剂作为主要溶剂。
分步复溶操作步骤:
- 开瓶前将瓶子恢复至室温,以防止固体化合物上出现冷凝水。
- 加入适量无菌超纯水或水性缓冲液(如pH 7.4的PBS),配制所需浓度的储备液。在水中配制10–100 mM的储备液通常较为适宜。
- 轻柔涡旋直至化合物完全溶解,溶液应澄清无色。
- 若溶液用于细胞实验,须通过0.22 µm膜过滤器进行过滤灭菌。
- 分装为单次使用的等份,以减少反复冻融次数。
注意:溶解度及推荐浓度范围请以随产品批次提供的检验证书(CoA)为准。
实验应用与工作浓度
SDMA(S413343)适用于多种实验场景,以下列出代表性应用及参考浓度范围,研究人员应针对具体生物体系进行实验优化。
- LC-MS/MS定量参考标准品:SDMA广泛用作真实标准品,用于建立和验证基于质谱的检测方法,以测量血浆、血清或尿液中内源性SDMA水平。标准曲线通常在相关生物基质或替代基质中以0.01–10 µM范围制备。
- 精氨酸转运竞争实验:可在10 µM至1 mM浓度范围内使用SDMA,研究其对细胞模型中L-精氨酸经CAT转运体摄取的竞争性抑制作用。以NOS活性或NO生成量(如Griess法、DAF荧光法)作为功能性读出指标。
- 动物模型生物标志物研究:在啮齿动物CKD模型中,外源性SDMA给药已被用于补充或验证内源性生物标志物水平,给药剂量和途径应根据相关模型的同行评审文献确定。
- ELISA检测方法验证:SDMA可用作商业或自建二甲基精氨酸ELISA免疫检测方法的定标标准品。
所有工作浓度均为参考值,请查阅一次文献并在您的实验体系中加以验证。
储存、稳定性与质量控制
储存条件:将SDMA(S413343)储存于-20°C密封容器中,避光防潮。长期储存建议使用干燥剂。请务必以随您所购批次提供的检验证书(CoA)为准核实储存条件。
稳定性:作为稳定的氨基酸衍生物,SDMA在推荐条件下储存时化学性质通常稳定。水性储备液可在-20°C短期至中期使用;建议分装为单次用量以避免反复冻融。出现变色、沉淀或浑浊的溶液应予丢弃。
质量控制:
- 使用批次特定的CoA确认化合物的身份和纯度,典型表征方法包括HPLC、NMR和MS。
- 用于定量分析应用时,应将认证参考物质或同位素标记内标(如d6-SDMA)与S413343同时使用,以确保检测准确性。
- 在分析运行前进行系统适用性测试,以确认仪器性能和标准品完整性。
在关键实验使用前,请查阅CoA获取批次特定的纯度数据。
安全注意事项与法规说明
SDMA是哺乳动物的内源性代谢物,但在处理任何研究试剂时均须遵守标准实验室安全规程。
- 佩戴适当的个人防护装备(PPE):丁腈手套、实验服和护目镜。
- 处理固体形态时避免吸入粉尘或气溶胶。
- 使用前请查阅Aladdin Scientific提供的安全数据表(SDS),了解产品特定的危害信息、操作指引和废弃物处置要求。
- 本产品(S413343)仅供研究使用(RUO),不得用于人用或兽用诊断或治疗目的。
- 按照适用的地方、国家及机构法规处置废弃物。
请始终参阅Aladdin Scientific提供的最新批次SDS,获取最新安全信息。
常见问题
SDMA与ADMA有何区别,这对我的实验有何影响?
SDMA(对称性二甲基精氨酸)和ADMA(非对称性二甲基精氨酸)均为内源性L-精氨酸二甲基化衍生物,但两者在胍基氮原子上甲基的位置不同。ADMA是三种一氧化氮合酶(NOS)亚型的直接竞争性抑制剂,而SDMA在生理浓度下不直接抑制NOS,但可通过CAT转运体与L-精氨酸竞争细胞转运。NOS抑制研究应选用ADMA;肾功能生物标志物研究或精氨酸转运研究则应选用SDMA作为参考或工具化合物。
SDMA(S413343)可溶于哪些溶剂?
SDMA是一种水溶性极强的两性离子化合物,可轻易溶于水及水性缓冲液(如pH 7.4的PBS或生理盐水)。通常无需溶于DMSO或有机溶剂。请始终在水性介质中配制储备液,并以批次特定的CoA核实溶解度。
SDMA能否用作LC-MS/MS定量检测内源性SDMA的内标?
未标记的SDMA(S413343)适合用作真实定标标准品,但不适合用作LC-MS/MS内标,因为它与内源性分析物具有相同的色谱保留时间和质量数。为实现准确定量,应使用同位素标记类似物(如氘标记的d6-SDMA)作为内标,以校正基质效应和分析变异性。
如何处理SDMA以确保储备液的长期稳定性?
在10–100 mM浓度范围内配制水性储备液,分装为单次使用份额,于-20°C避光防潮保存。避免反复冻融,因为反复冻融会加速降解。丢弃任何出现变色或沉淀的等份样品,并通过批次CoA确认稳定性参数。
参考文献
- Vallance P, Leone A, Calver A, Collier J, Moncada S. Accumulation of an endogenous inhibitor of nitric oxide synthesis in chronic renal failure. Lancet. 1992;339(8793):572-575. doi:10.1016/0140-6736(92)90865-Z
- Kielstein JT, Veldink H, Martens-Lobenhoffer J, et al. SDMA is an early marker of change in GFR after living related kidney donation. Nephrology Dialysis Transplantation. 2011;26(1):324-328.
- Teerlink T. HPLC analysis of ADMA and other methylated L-arginine analogs in biological fluids. Journal of Chromatography B. 2007;851(1-2):21-29.
- Achan V, Broadhead M, Malaki M, et al. Asymmetric dimethylarginine causes hypertension and cardiac dysfunction in humans and is actively metabolized by dimethylarginine dimethylaminohydrolase. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2003;23(8):1455-1459.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)