实验方案(Protocols)
用活性染料染色死细胞
用活性染料染色死细胞
Viability Dyes 可用于在流式细胞仪检测中排除非活细胞。 它们不可逆地与细胞表面和细胞内胺结合。 该染料可以与质膜完整性丧失的细胞中较高浓度的胺共价结合,例如细胞凋亡晚期或死亡细胞中的胺,并产生明显更强烈的荧光信号。 用活性染料染色的死细胞在洗涤、固定、透化或额外的细胞内染色后将保持其染色强度。
协议
1、让活性染料小瓶平衡至室温,并在使用前快速旋转。
2、在不含齐特、血清或蛋白质的PBS溶液中清洗细胞两次。
3、将细胞重新悬浮在浓度为1-10x106/mL的叠氮化物、血清和无蛋白PBS中。
4、每1ml细胞加入1μL可固定活性染料,立即旋涡。
5、将细胞在2-8°C下避光培养30分钟。
6、用流动染色缓冲液或等效物清洗细胞。
7、细胞可以根据需要染色、固定和渗透。
危险品化学品经营许可证(带存储)