TEN 缓冲液(1×,pH 7.2):成分、用途及常见问题解答
TEN 缓冲液(1×,pH 7.2):成分、用途及常见问题解答
TEN缓冲液(1×,pH 7.2)是一种即用型水性缓冲液,由Tris、EDTA和NaCl按生理离子强度配制而成,广泛用于核酸分离、细胞裂解及分子生物学实验流程。
- 产品名称
- TEN缓冲液(1×,pH 7.2)
- 货号
- T1529779
- pH值
- 7.2(经调节并验证)
- 主要成分
- Tris(缓冲剂)、EDTA(螯合剂)、NaCl(离子强度调节剂)
- 产品形式
- 1×即用型水溶液
- 主要应用
- 核酸分离、细胞裂解、分子生物学检测
什么是TEN缓冲液?其成分是什么?
TEN缓冲液是一种经典的分子生物学缓冲液,其名称源自三种核心成分:Tris(通常为10 mM)、EDTA(通常为1 mM)和NaCl(通常为100 mM),但具体浓度可能因批次或供应商配方而有所不同。Aladdin Scientific(货号:T1529779)以预制1×溶液的形式供应该缓冲液,已调节至pH 7.2,无需用户自行配制或调节pH。
每种成分均发挥特定作用:Tris在生理pH范围内提供稳定的缓冲能力;EDTA螯合Mg²⁺和Ca²⁺等二价阳离子,从而抑制需要金属离子辅因子的核酸酶;NaCl提供生理离子强度,以在提取或裂解步骤中维持蛋白质和核酸的构象。
TEN缓冲液在实验室中的主要应用
pH 7.2的TEN缓冲液广泛应用于多种分子生物学和生物化学实验方案:
- 核酸分离:TEN缓冲液常用作DNA和RNA提取过程中的重悬或洗涤缓冲液,有助于稳定核酸并抑制核酸酶降解。
- 细胞裂解:兼容去污剂的缓冲能力、离子强度控制以及EDTA介导的核酸酶抑制相结合,使TEN缓冲液成为适合哺乳动物细胞和细菌细胞裂解的基础缓冲液。
- 蛋白质和核酸储存:EDTA的螯合作用与Tris提供的稳定pH使该缓冲液适合短期储存纯化的核酸或蛋白质制品。
- 检测平衡化:在结合检测、凝胶过滤及其他需要生理离子条件的下游分析步骤中,TEN缓冲液可用作平衡或稀释缓冲液。
研究人员应验证与特定下游酶促步骤的兼容性,因为EDTA可能抑制依赖镁离子的酶,如限制性内切核酸酶或聚合酶。
操作、储存及质量注意事项
作为预制1×即用型溶液,TEN缓冲液(T1529779)应按照产品标签上提供的条件储存。水性缓冲溶液的一般最佳操作规范包括:
- 按产品标签规定在2–8 °C或室温下储存;除非产品明确标注可反复冻融,否则应避免反复冻融。
- 保持容器密封,防止蒸发和微生物污染。
- 使用前目视检查是否有浑浊或颗粒物;如疑有污染,应弃用。
- 处理RNA时使用无菌过滤的分装液,以降低RNase污染风险。
仅供研究使用(RUO)。本产品不适用于诊断、治疗或食品级应用。请务必查阅质量检验报告(CoA)以获取特定批次的pH验证和浓度数据。
常见问题
TEN缓冲液中TEN代表什么?
TEN代表Tris、EDTA和NaCl——缓冲液的三种主要成分。Tris提供pH缓冲,EDTA螯合二价金属离子以抑制核酸酶,NaCl将离子强度调节至接近生理水平。
为什么TEN缓冲液的pH设定为7.2?
pH 7.2接近生理pH,处于Tris的有效缓冲范围(约pH 7.0–9.0)内。该pH有助于在裂解和提取步骤中维持核酸和蛋白质的稳定性和溶解度,同时最大限度地减少酸或碱引起的降解。
TEN缓冲液可以直接用于限制性酶切或PCR吗?
通常不建议将TEN缓冲液直接用于限制性酶切或PCR反应,因为EDTA会螯合这些酶所必需的Mg²⁺辅因子。如果在上游步骤中使用了TEN缓冲液,则应在进行酶促反应之前,通过沉淀或柱纯化去除核酸中的EDTA。
如何储存TEN缓冲液(T1529779)以维持其稳定性?
请参阅产品标签和质量检验报告,以获取特定批次的储存说明。一般而言,水性Tris基缓冲液应在密封容器中于2–8 °C或室温下避光储存,防止微生物污染。除非产品标签明确允许,否则应避免反复冻融。
TEN缓冲液与TNE缓冲液相同吗?
是的,TEN缓冲液和TNE缓冲液指的是相同的配方——Tris、EDTA和NaCl——缩写字母顺序因作者或实验方案习惯而异。请务必查阅具体实验方案或产品数据表中各组分的浓度,以确认确切组成。
参考文献
- Sambrook J, Russell DW. Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory Press; 2001. (General reference for Tris-based buffer formulations including TEN/TNE buffers.)
- Aladdin Scientific. Product datasheet and Certificate of Analysis for TEN Buffer (1×, pH 7.2), SKU T1529779.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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