TXK 小鼠单克隆抗体:特异性、应用及操作指南
TXK 小鼠单克隆抗体:特异性、应用及操作指南
TXK Mouse mAb是一种在小鼠中制备的单克隆抗体,特异性靶向TXK——一种参与T细胞信号传导和免疫调节的TEC家族非受体酪氨酸激酶。
- 产品编号
- Ab351111
- 克隆宿主物种
- 小鼠
- 抗体类型
- 单克隆抗体(mAb)
- 制剂
- 仅PBS(不含载体蛋白,不含叠氮化物)
- 靶蛋白
- TXK(非受体酪氨酸激酶,TEC家族成员)
- 参考目录
- absea #KC-654
TXK的生物学意义与研究价值
TXK(又称RLK)是一种非受体蛋白酪氨酸激酶,属于TEC家族,该家族还包括BTK、ITK、TEC和BMX等成员。TXK主要在T淋巴细胞中表达,尤其在Th1 CD4+ T细胞中高表达,在T细胞受体(TCR)下游信号传导中发挥关键作用。TCR激活后,TXK参与磷脂酶C-γ1(PLCγ1)的激活,促进钙离子动员、NFAT激活及后续干扰素-γ(IFN-γ)等细胞因子的产生。
与其他TEC家族成员不同,TXK缺乏普列克底物蛋白同源(PH)结构域,代之以富含半胱氨酸的区域介导膜结合,使其调控机制有别于BTK或ITK。对TXK的研究对于理解T细胞介导的免疫、自身免疫病机制以及炎症相关治疗靶点具有重要意义。
抗体规格与制剂
TXK小鼠单克隆抗体(货号:Ab351111)是一种靶向人TXK蛋白的小鼠源性单克隆抗体。产品以纯磷酸盐缓冲液(PBS)为制剂,不添加BSA等载体蛋白或叠氮化钠等防腐剂,最大限度保证与下游偶联化学反应、直接标记流程及功能性实验的兼容性,避免载体蛋白或防腐剂的干扰。
纯PBS制剂还便于在对外源蛋白敏感的实验中直接使用,如共免疫沉淀(Co-IP)或邻近连接实验(PLA)。研究人员应对抗体进行分装并妥善储存,避免反复冻融导致抗体活性下降。
参考目录编号:absea #KC-654。
推荐应用及使用指南
针对TXK的小鼠单克隆抗体广泛适用于免疫学检测与表征实验。此类抗体的常见应用包括:
- 蛋白质印迹(WB):检测T细胞系或原代T淋巴细胞裂解物中TXK蛋白的表达。
- 免疫沉淀(IP):分离TXK蛋白复合物,研究T细胞信号通路中的相互作用伙伴。
- 免疫荧光(IF):在固定和透化处理的T细胞中可视化TXK的亚细胞定位。
- 流式细胞术(FC):胞内染色,用于T细胞亚群中TXK表达谱的分析。
- ELISA:在适当的夹心或捕获格式下进行定量或半定量检测。
最佳抗体稀释比例、孵育时间及封闭条件应根据具体应用和样品类型经验性确定。如需针对特定应用的建议,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
储存、操作与质量注意事项
与所有以纯PBS制剂提供的单克隆抗体试剂一样,妥善储存对于维持产品完整性至关重要。一般最佳操作建议包括:
- 短期使用(最长4周)可在4°C储存。
- 长期储存时,应进行分装并在−20°C或−80°C冷冻,以防止反复冻融。
- 避免直接光照,尽量在不透明或铝箔包裹的容器中储存。
- 若计划进行下游功能性或细胞实验,不应添加叠氮化钠作为防腐剂,因为叠氮化物具有细胞毒性,并可能抑制辣根过氧化物酶(HRP)检测体系。
由于制剂中不含载体蛋白,在抗体浓度极低时,超滤浓缩或塑料表面吸附损失可能更为明显。研究人员在操作高度稀释分装样品时,应使用低吸附离心管和移液器吸头。
常见问题
TXK是什么?为什么它是重要的研究靶点?
TXK是一种TEC家族非受体酪氨酸激酶,主要在Th1 T淋巴细胞中表达,介导TCR下游信号传导、细胞因子产生和免疫激活。由于其在自身免疫病和T细胞介导的炎症反应中的作用,TXK已成为免疫学和药物发现研究的重要靶点。
TXK小鼠单克隆抗体为何仅以PBS制剂提供,不含BSA或叠氮化钠?
纯PBS制剂确保抗体与更广泛的下游应用兼容,包括直接荧光或酶促偶联、共免疫沉淀以及细胞实验,避免外源蛋白或叠氮化钠等细胞毒性防腐剂造成干扰或毒性。需要长期储存的研究人员应对抗体进行分装冷冻,而非依赖叠氮化钠防腐。
推荐使用哪些细胞系或组织类型来验证TXK小鼠单克隆抗体?
TXK主要在T淋巴细胞中表达,因此Jurkat细胞(人T细胞白血病细胞系)以及经Th1定向分化刺激的原代人外周血单个核细胞(PBMC)是常用的阳性对照来源。富含T细胞的组织(如脾脏或淋巴结裂解物)也可作为合适的阳性对照。阴性对照应选用已知不表达TXK的细胞系。
如何确定TXK小鼠单克隆抗体的最佳工作浓度?
最佳工作浓度必须根据每种应用、检测系统和样品类型经验性确定。建议使用阳性对照裂解液或样品进行梯度稀释测试(例如,蛋白质印迹可从1:500、1:1000、1:2000开始),选取特异性信号最强、背景最低的稀释比例。如需针对您具体实验设置的指导,请联系Aladdin Scientific技术支持。
参考文献
- Mano H. et al. Cloning and characterization of RLK, a novel protein tyrosine kinase expressed predominantly in T-cells. Oncogene. 1993.
- Schaeffer EM, Schwartzberg PL. Tec family kinases in lymphocyte signaling and function. Current Opinion in Immunology. 2000.
- Brodie EJ, Infantino S, Low MSY, Tarlinton DM. Lyn, Lupus, and (B) Lymphocytes, a Lesson on the Critical Balance of Kinase Signaling in Immunity. Frontiers in Immunology. 2018.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)