计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,for DNA and RNA applications,PCR试剂,分子生物学级,无DNA酶和RNA酶 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
StableMax RT-qPCR Master Mix (Dye, UDG, One Tube) 的缓冲体系具有同时适合 Taq 酶与逆转录酶扩增的优势,是一款一管式探针法 RT-qPCR专用预混液,适用于 RNA 单/多重项目的荧光定量 PCR 检测。此外,试剂含黄色染料,不影响活性的同时可清晰指示配制体系时是否加入产品,减少漏加情况。预混液中引入了 dUTP/UDG 防污染系统,在上机扩增前可消除遗留扩增产物的污染,从而保证结果的准确性。
适用于RNA一步法扩增或热启动DNA扩增。
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使用说明
1、反应体系配制:
1.1 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液,瞬时离心后,放置室温待用,探针建议避光处理。建议将PCR液体分装使用,避免反复冻融。
1.2 参照下表配制PCR反应体系:
| 组分 | 加入体积/25μL | 加入体积/50μL | 终浓度 |
| StableMax RT-PCR Master Mix (Dye, UDG, One Tube ) | 10 μL | 20 μL | 1× |
| Primer-probe Mix | 1 μL | 2μL | / |
| Templates | 5 μL | 10 μL | / |
| ddH₂O | Up to 25 μL | Up to 50 μL | / |
| Total | 25 μL | 50 μL | / |
注1:引物以及模板的用量可自行调整
1.3 用移液器轻轻吹打混匀或轻微 Vortex 混匀,室温离心数秒,使液体聚于管底。
1.4 将各 PCR 反应管置于设置好的 PCR 仪上,开始 PCR 反应。
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 1 | 50℃ | 15min | 1 |
| 2 | 95℃ | 2min 30s | 1 |
| 3 | 94℃ | 10s | 45 |
| 4 | 55℃ | 40s(收集荧光) | 45 |
a. 对于第一步 50℃逆转录反应,可根据项目调整时间,时间建议在 5-15 min 之间。
b. 对于大多数实验,45 个循环数是足够的,若您的样本本身靶标含量较高,可适当减少循环数如 40 个循环,缩短检测时间;
c. 通常各引物使用的终浓度为 0.2 μM,引物的 Tm 值一般设定在 55℃以上,可借助相关软件进行分析,使用理想的引物浓度和退火温度可以得到理想的反应效果。
The StableMax RT-qPCR Master Mix (with Dye, UDG) is a one-tube, probe-based RT-qPCR premix optimized for both single and multiplex RNA detection. Its unique buffer system is compatible with Taq DNA polymerase and reverse transcriptase, enabling seamless reverse transcription and amplification in a single reaction.
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Key Features:
✔ Visual tracking: Yellow dye (non-inhibitory) confirms reagent addition, preventing omissions
✔ Contamination control: dUTP/UDG system eliminates carryover amplicon contamination
✔ Broad applications: Suitable for one-step RT-qPCR (RNA targets) and hot-start DNA amplification
✔ Optimized performance: High sensitivity and reproducibility for low-abundance targets
Reagent Preparation
Thaw all components at room temperature or 4°C.
Mix gently and centrifuge briefly before use.
Recommendations:
Protect probes from light.
Aliquot master mix to avoid freeze-thaw cycles.
Prepare Reaction Mix
| Component | Volume per 25 μL | Volume per 50 μL | Final Concentration |
| StableMax RT-PCR Master Mix (Dye, UDG, One Tube) | 10 μL | 20 μL | 1× |
| Primer-probe Mix | 1 μL | 2μL | / |
| Templates | 5 μL | 10 μL | / |
| ddH₂O | Up to 25 μL | Up to 50 μL | / |
| Total | 25 μL | 50 μL | / |
*Note:
Primer/template volumes can be adjusted.
For multiplex assays, optimize primer concentrations empirically.
Mixing:
Gently pipette mix or vortex briefly.
Centrifuge at room temperature to collect liquid.
PCR Amplification:
Load tubes onto a thermal cycler with heated lid (105°C recommended).
| Step | Temperature | Time | Cycles |
| 1 | 50℃ | 15min | 1 |
| 2 | 95℃ | 2min 30s | 1 |
| 3 | 94℃ | 10s | 45 |
| 4 | 55℃ | 40s(Fluorescence read) | 45 |
Optimization Guidelines:
a. Reverse Transcription: 5–15 min (adjust based on target abundance).
b. Cycle Number: Reduce to 40 cycles for high-copy targets.
c. Primer Design:
Final concentration: 0.2 μM (typical).
Tm ≥55°C (use software for accurate calculation).
Adjust annealing temperature (±3°C) if amplification is suboptimal.
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | FP1508907 | |
| 分析证书 | FP1508907 |
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