计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,for DNA and RNA applications,PCR试剂,分子生物学级,无DNA酶和RNA酶 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
StableMax RT-qPCR Master Mix (with UDG) 是一款一管式探针法RT-qPCR专用预混液,适用于 RNA 单/多重项目的荧光定量 PCR检测。经优化,本产品的缓冲体系具有同时适合 Taq 酶与逆转录酶扩增的优势,体系的项目普适性强。此外,体系具有高度稳定性,在本产品中添加引物探针后配制成的预混工作液能在低温下长期保存且不影响体系的扩增性能,使用时在预混工作液中直接添加待测样品即可上机检测,简单便捷,即需即用。
此外,预混液中引入了 dUTP/UDG 防污染系统,在上机扩增前可消除遗留扩增产物的污染,从而保证结果的准确性。除常规程序,本产品也兼容快速程序,可大大缩短检测时间。
适用范围:适用于RNA一步法扩增或热启动DNA扩增。
组分表
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产品优势:
1、全新研发的Buffer缓冲系统,同时对Taq酶与逆转录酶友好;
2、加入引探即可制成成品预混液,检测时加入样本即可;
3、引入dUTP/UDG防污染系统,可有效防止气溶胶污染;
4、可适配快速和多重靶标扩增,普适性强。
使用说明:
1、反应体系配制:
1.1 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液,瞬时离心后,放置室温待用,探针建议避光处理。建议将PCR液体分装使用,避免反复冻融。
1.2 参照下表配制PCR反应体系:
| 组分 | 加入体积/25μL | 加入体积/50μL | 终浓度 |
| StableMax RT-qPCR Master Mix | 10 μL | 20 μL | 1× |
| Primer-probe Mix | 1 μL | 2μL | / |
| Templates | 5 μL | 10 μL | / |
| ddH₂O | Up to 25 μL | Up to 50 μL | / |
| Total | 25 μL | 50 μL | / |
注1:引物以及模板的用量可自行调整;
注2:使用快速反应程序时,建议将反应体系总体积设置为 25 μL。
1.3 用移液器轻轻吹打混匀或轻微 Vortex 混匀,室温离心数秒,使液体聚于管底。
1.4 将各 PCR 反应管置于设置好的 PCR 仪上,开始 PCR 反应。
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 1 | 50℃ | 15min | 1 |
| 2 | 95℃ | 2min 30s | 1 |
| 3 | 94℃ | 10s | 45 |
| 4 | 55℃ | 40s(收集荧光) | 45 |
a. 对于第一步 50℃逆转录反应,可根据项目调整时间,时间建议在 5-15 min 之间。
b. 对于第二步 95℃预变性反应,建议在 1.5-2.5 min 之间。
c. 对于大多数实验,45 个循环数是足够的,若您的样本本身靶标含量较高,可适当减少循环数如 40 个循环,缩短检测时间;
d. 通常各引物使用的终浓度为 0.2 μM,引物的 Tm 值一般设定在 55℃以上,可借助相关软件进行分析,使用理想的引物浓度和退火温度可以得到理想的反应效果。
StableMax RT-qPCR Master Mix (with UDG) is a ready-to-use, all-in-one probe-based master mix for single/multiplex RT-qPCR detection of RNA targets. Optimized buffer simultaneously supports Taq DNA polymerase and reverse transcriptase activity, ensuring broad target compatibility. Pre-mixed working solutions containing primers/probes remain stable at low temperatures without compromising performance. Incorporates dUTP/UDG contamination control to eliminate carryover amplicon contamination. Compatible with standard and fast cycling protocols.
Component
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Applications:
One-step RT-qPCR (RNA targets)
Hot-start DNA amplification
Key Advantages
Unified Buffer System: Optimized for both Taq polymerase and reverse transcriptase.
Ready-to-Detect: Add primers/probes to master mix → store as working solution → add sample for direct use.
Contamination Control: dUTP/UDG system cleaves uracil-containing contaminants.
Broad Compatibility: Adapts to fast cycling (≤40 min) and multiplex assays.
Protocol
1. Reaction Setup
| Component | Volume/25 μL | Volume/50 μL | Final Conc. |
| StableMax RT-qPCR Master Mix | 10 μL | 20 μL | 1× |
| Primer-probe Mix | 1 μL | 2μL | / |
| Templates | 5 μL | 10 μL | / |
| ddH₂O | Up to 25 μL | Up to 50 μL | / |
| Total | 25 μL | 50 μL | / |
Notes:
Primer/template volumes are adjustable.
For fast cycling, use 25 μL total volume.
Protect probes from light; avoid freeze-thaw cycles.
2. Mixing & Centrifugation
Gently pipette-mix or vortex lightly.
Centrifuge briefly to collect liquid.
3. Cycling Conditions
| Step | Temperature | 时间 | 循环数 |
| 1 | 50℃ | 15min | 1 |
| 2 | 95℃ | 2min 30s | 1 |
| 3 | 94℃ | 10s | 45 |
| 4 | 55℃ | 40s(collect fluorescence) | 45 |
Notes
1. Reverse transcription (adjust: 5–15 min)
2. Initial denaturation (adjust: 1.5–2.5 min)
3. Reduce to 40 cycles for high-copy targets.
4. Primer Design:
Final concentration: 0.2 μM
Tm ≥55°C (design with tools like OligoAnalyzer™).
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | FP1508908 | |
| 分析证书 | FP1508908 |
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