计算溶液所需的质量、体积或浓度。
Rock DNA 聚合酶
有货
为什么选择此级别
EnzymoPure™,分子生物学级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
Rock DNA Polymerase 是一款热稳定性保真聚合酶,相对于一般的保真酶，其具有显著的耐高温的特性，该聚合酶可在 100℃ 的环境中持续 6h 而活性无明显下降。Rock DNA Polymerase 不具有 3´→5´ 核酸外切酶活性，但较普通的 Taq 酶具有一定的保 真性(保真性约为普通 Taq 酶的 5倍)，同时其还有链置换活性，基于这种特性，其可应用于基于 DOP-PCR 技术的 WGS建库方向。
产品特点
1.特异性好，更有利于目的条带的扩增，不易产生非特异性产物；
2.灵敏度及扩增效率高，能够对低输入量的模板进行快速有效的扩增；
3.均一性好，对不同 GC 含量以及不同片段范围的模板均能有效扩增，不改变产物的碱基和片段分布；
4.可选购 10×GC Enhancer，以对复杂模板达到较好的扩增效果，如高 GC 模板或具有发卡结构的模板；
5.具有链置换活性，可用于转座酶切建库的扩增流程或者基于 DOP 原理的 WGS 建库方向；
6.对 Mg²⁺比较耐受，可根据实验需要灵活调节 Mg²⁺浓度以获得最佳扩增效果。
| FP1509151 | Component | 100U | 500U | Storage |
| FP1509151A | Rock DNA Polymerase (2.5 U/μL) | 40μl | 200μl | -20℃. Avoid freeze/thaw cycle. |
| FP1509151B | 5×Rock buffer (Mg²⁺ free) | 400μl | 2ml | -20℃. Avoid freeze/thaw cycle |
| FP1509151C | 200mM MgCl₂ | 20μl | 100μl | -20℃. Avoid freeze/thaw cycle |
PCR 扩增操作流程
实验前请将 5×Rock buffer（Mg²⁺ free）提前取出置于室温融化，振荡混匀并短暂离心，再与 Rock DNA Polymerase 一起置于冰上备用。当扩增高 GC 模板时，还应提前将 10×GC Enhancer 取出溶解并置于室温备用。
1.配制 PCR 体系（冰上操作）
| 组分 | 体积（25μl 体系） | 体积（50μl 体系） |
|---|---|---|
| 5×Rock buffer（Mg²⁺ free） | 5μl | 10μl |
| 10×GC Enhancer（高 GC 模板时使用） | 2.5μl | 5μl |
| 10mM dNTP | 0.5μl | 1μl |
| 200mM MgCl₂ | 0.25μl | 0.5μl |
| Primer（each 5μM） | 1-2.5μl | 2-5μl |
| Templates | — | — |
| Rock DNA Polymerase | 0.5μl | 1μl |
| ddH₂O | — | — |
| Total | 25μl | 50μl |
2. 设置 PCR 仪反应程序（开启热盖，温度设置于 105℃）
注意事项
1.通常各引物使用的终浓度为 0.2μM，引物的 Tm 值一般设定在 55℃以上，可借助相关软件进行分析，使用理想的引物浓度和退火温度可获得理想的反应效果；
2.如果模板的 GC 含量较高（GC>55%），建议向体系中补加 10×GC Enhancer 进行反应，一般可对 GC 含量高达 78% 的模板进行有效扩增；
3.如果使用人基因组作为模板，通常 2ng~5ng 就能够满足扩增需求，若添加更高量的模板进行扩增，建议降低循环数；
4.若使用两步法程序进行扩增，建议退火 / 延伸范围为 68℃-75℃，延伸时间按 30-60sec/kb 计算。
Rock DNA Polymerase is a thermostable high-fidelity polymerase. Compared with ordinary high-fidelity enzymes, it exhibits remarkable thermostability, maintaining no significant loss of activity after continuous incubation at 100℃ for 6 hours. This polymerase lacks 3'→5' exonuclease activity but offers higher fidelity than conventional Taq polymerase (approximately 5 times the fidelity of ordinary Taq polymerase). Additionally, it possesses strand displacement activity, enabling its application in WGS library construction based on DOP-PCR technology.
Product Features
1.Excellent specificity: Facilitates the amplification of target bands and minimizes non-specific products.
2.High sensitivity and amplification efficiency: Enables rapid and effective amplification of low-input templates.
3.Good uniformity: Efficiently amplifies templates with different GC contents and fragment ranges without altering the base composition or fragment distribution of products.
4.Optional 10×GC Enhancer available: Ensures optimal amplification of complex templates, such as high-GC templates or those with hairpin structures.
5.Strand displacement activity: Suitable for amplification processes in transposase-based library construction or WGS library construction based on DOP principles.
6.Tolerant to Mg²⁺: Allows flexible adjustment of Mg²⁺ concentration according to experimental needs for optimal amplification results.
| FP1509151 | Component | 100U | 500U | Storage |
| FP1509151A | Rock DNA Polymerase (2.5 U/μL) | 40μl | 200μl | -20℃. Avoid freeze/thaw cycle. |
| FP1509151B | 5×Rock buffer (Mg²⁺ free) | 400μl | 2ml | -20℃. Avoid freeze/thaw cycle |
| FP1509151C | 200mM MgCl₂ | 20μl | 100μl | -20℃. Avoid freeze/thaw cycle |
PCR Amplification Procedure
Before the experiment, remove the 5×Rock buffer (Mg²⁺ free) from storage and allow it to thaw at room temperature. Vortex thoroughly, centrifuge briefly, and place it on ice along with Rock DNA Polymerase for later use. For amplifying high-GC templates, also thaw the 10×GC Enhancer at room temperature in advance.
1. PCR Reaction System Preparation (Perform on ice)
| Component | Volume (25μl System) | Volume (50μl System) |
|---|---|---|
| 5×Rock buffer（Mg²⁺ free） | 5μl | 10μl |
| 10×GC Enhancer（for high-GC templates） | 2.5μl | 5μl |
| 10mM dNTP | 0.5μl | 1μl |
| 200mM MgCl₂ | 0.25μl | 0.5μl |
| Primer（each 5μM） | 1-2.5μl | 2-5μl |
| Templates | — | — |
| Rock DNA Polymerase | 0.5μl | 1μl |
| ddH₂O | — | — |
| Total | 25μl | 50μl |
2. PCR Thermal Cycler Program Settings (Activate the heated lid and set to 105℃)
.png)
Notes
1.The final concentration of each primer is typically 0.2μM. The Tm value of primers is generally set above 55℃, which can be analyzed using relevant software. Optimal primer concentration and annealing temperature will yield ideal reaction results.
2.For templates with high GC content (GC > 55%), it is recommended to add 10×GC Enhancer to the reaction system. This allows effective amplification of templates with GC content up to 78%.
3.When using human genomic DNA as the template, 2ng~5ng is usually sufficient for amplification. For higher template inputs, reduce the number of PCR cycles.
4.If a two-step PCR program is used, the recommended annealing/extension temperature range is 68℃-75℃, with the extension time calculated as 30-60sec/kb.
规格
产品名称
Rock DNA 聚合酶
规格或纯度
EnzymoPure™,分子生物学级,2.5 U/μL
生物活性
2.5 U/μL
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
液体
浓度
2.5 U/μL
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
Store at -20℃ long term. Upon receipt, it is recommended to aliquot. Avoid freeze/thaw cycle.
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA，每批产品都进行了严格的验证，您可放心使用！
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ26F0131351 |
分析证书 | FP1509151 |
| ZJ26F0131352 |
分析证书 | FP1509151 |
技术文档和文章
溶液计算器
需要帮助选择级别？
我们的级别选择指南涵盖了目录中所有的变体的纯度、稳定剂状态和应用适用性。
查看 Suitable for molecular biology 级别指南 → 查看 EnzymoPure™ 级别指南 →产品仅提供给经过验证的企业、机构和合格的专业人员用于研发。不适用于人类、动物、诊断或治疗。
Copyright © 2023至今 上海阿拉丁生化科技股份有限公司 保留所有权利。
危险品化学品经营许可证（带存储）