糖原检测试剂盒 (荧光法)

货号: G1373331
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级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 适用于分析 ? 适用于分析 —— 纯度满足一般分析程序。作为常规方法中可靠的分析试剂使用。 比色法 ? 比色级 —— 适用于显色定量检测的纯度。当试剂纯度影响显色强度和准确度时使用。 标曲法 ?
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100T
G1373331-100T
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为什么选择此级别

BioReagent,标曲法,比色法,适用于分析 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

产品介绍

糖原(Glycogen)在淀粉糖苷酶的作用下产生葡萄糖,葡萄糖经葡萄糖氧化酶催化生成过氧化氢。在辣根过氧化物酶存在的情况下,Amplex Red能与过氧化氢反应,产生强烈的红色荧光物质试卤灵。试卤灵的荧光强度与样品中糖原的含量成正比,可通过试卤灵的荧光强度计算样品中糖原的含量。

产品组分

G1373331

组分名称

物理外观

100 T

储存

单次测试使用量

G1373331A

检测缓冲液

液体

20 mL

-20℃.

按需

G1373331B

淀粉葡萄糖苷酶

液体

200 μL

-20℃.避光

2 μL

G1373331C

葡萄糖氧化酶

液体

200 μL

-20℃.避光

2 μL

G1373331D

辣根过氧化物酶

液体

200 μL

-20℃.避光

2 μL

G1373331E

Amplex Red

液体

200 μL

-20℃.避光

2 μL

G1373331F

糖原标准品(2 mg/mL)

液体

600 μL

-20℃.避光

6 μL

使用方法

1. 样本处理

(1) 组织样本:按照组织样本质量 (g):双蒸水体积 (mL)为1:9的比例 (如0.1 g组织样本,加入0.9 mL双蒸水),4°С,机械匀浆。立即将所得匀浆液沸水浴10 min,流水冷却至室温。4°С,12000×g离心10 min,取上清液放于冰上待测。

(2) 细胞样本:收集1×10⁶个细胞样本,加入200 μL双蒸水,4°C,机械匀浆。立即将所得匀浆液沸水浴10 min,流水冷却至室温。4°C,12000×g离心10 min,取上清液放于冰上待测。

(3) 血清 (浆)样品:直接测定。

2. 标准曲线设置

取8支EP管,第一支EP管中加入6 µL糖原标准品(2 mg/mL)和294 µL的检测缓冲液,将糖原标准品稀释为40 μg/mL。其他每管中加入150 μL检测缓冲液。从第一只EP管中吸取150 μL到第2支EP管,按此步骤往后依次稀释,最后一支EP管为150 μL检测缓冲液。此时,各个EP管中糖原的浓度依次为40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0 μg/mL。

3. 标准品和样品测定

(1) 取50 μL梯度稀释的标准品和50 μL样本加入到黑色96孔板中。

(2) 根据标准孔和样品孔数量配制反应工作液。每孔需要50 μL的反应工作液,包含2 μL淀粉葡萄糖苷酶、2 μL葡萄糖氧化酶和46 μL检测缓冲液。配制完成后,每孔加入50 μL,37℃反应30 min。

(3) 根据标准孔和样品孔数量配制显色工作液。每孔需要50 μL的显色工作液,包含2 μL辣根过氧化物酶、2 μL Amplex Red和46 μL检测缓冲液。配制完成后,每孔加入50 μL,37℃反应30 min。

(4) 设置激发波长为535 nm,发射波长为587 nm进行荧光强度检测。

注: H₂O₂ 的存在会对糖原的检测产生干扰。如果样品含有 H₂O₂ ,须同时设置背景对照孔,加入不含葡萄糖氧化酶的反应工作液,即配制反应工作液时2 µL葡萄糖氧化酶用检测缓冲液替代。

4. 结果计算

空白孔的荧光强度为 F空白 、标准孔的荧光强度为 F标准 、样品孔的荧光强度为 F样品 。则ΔF 标准 =F标准 -F空白 、ΔF 样品 = F样品 - F空白 。如果样品的背景对照信号比较高,样品的信号值应减去样品背景对照的信号值。 

以糖原标准品的浓度为横坐标,荧光信号强度Δ F标准 为纵坐标建立标准曲线。带入Δ F样品计算样品中糖原的浓度。

5. 结果展示

注意事项

1. 酶工作液冰上解冻,使用前后避免室温放置。

2. 正式检测前,建议选择2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

3. Amplex Red在空气中不太稳定,开启后应尽快使用,且在使用过程中需注意适当避光。

4. 荧光检测时建议使用96孔黑板。

5. 生化检测试剂普遍具有刺激性、生物毒性等,为了您的安全和健康,请在实验全程做好生物安全防护。


规格

规格或纯度
BioReagent, 比色法, 适用于分析, 标曲法
英文名称
Glycogen Assay Kit (Fluorometric Method)
应用
细胞代谢
检测范围
0.625-40 μg/mL
检测方法
荧光法; 微量法
定量&半定量
定量
检测仪器
酶标仪
检测波长
激发光波长535 nm,发射光波长587 nm
敏感性
Light-sensitive
检测时长
60 min
样本体积
50 μL
储存与运输
储存条件
-20°C储存
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
各组分在相应的储存条件下保质期1年。
组分与储存

G1373331

组分名称

物理外观

100 T

储存

单次测试使用量

G1373331A

检测缓冲液

液体

20 mL

-20°C.

按需

G1373331B

淀粉葡萄糖苷酶

液体

200 μL

-20℃.避光

2 μL

G1373331C

葡萄糖氧化酶

液体

200 μL

-20℃.避光

2 μL

G1373331D

辣根过氧化物酶

液体

200 μL

-20℃.避光

2 μL

G1373331E

Amplex Red

液体

200 μL

-20℃.避光

2 μL

G1373331F

糖原标准品(2 mg/mL)

液体

600 μL

-20℃.避光

6 μL

图片
Glycogen Assay Kit (Fluorometric Method) (G1373331) - Standard curve assay 
Glycogen is converted to glucose by amyloglucosidase, and the glucose is then oxidized by glucose oxidase to generate hydrogen peroxide. In the presence of horseradish peroxidase, Amplex Red reacts with hydrogen peroxide to produce the strongly red‑fluorescent compound resorufin. The fluorescence intensity of resorufin is directly proportional to the glycogen content in the sample, and the glycogen concentration can be calculated from the fluorescence intensity of resorufin. This kit can detect glycogen concentrations as low as 0.625 μg/mL in samples, and exhibits a good linear relationship within the range of 0.625 - 40 μg/mL.

技术文档

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F0838767 分析证书 G1373331
技术文档和文章
溶液计算器

常见问题

什么是「适用于分析」?
「适用于分析」是一个明确定义的分析纯度级别,适用于定量分析方法。它规定了最低含量百分比、对常见杂质(水分、重金属、灼烧残渣)的受控限值,以及批间一致性。「适用于分析」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
什么是「BioReagent」?
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。需冷冻保存以维持规定的有效期。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA?
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