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高斯萤光素酶报告基因检测试剂盒（辉光高亮型）
有货
为什么选择此级别
BioReagent,用于化学发光 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
避光,-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
高斯萤光素酶报告基因检测试剂盒（辉光高亮型）提供一种高灵敏度及信号稳定的检测系统，具有更高灵敏度和发光信号稳定的特点，发光强度最高可达30万以上，半衰期最长可达5小时以上，符合高通量检测的需求。同时高斯荧光素酶（Gaussia Luciferase，185 AA，19.9 kDa）是一种分泌型萤光素酶，Gaussia Luciferase 质粒转染细胞后，大部分 Gaussia Luciferase 可以分泌到细胞外，所以本试剂盒既可以用于细胞培养上清样品的检测，也可以用于细胞裂解样品或纯化的酶的检测，特别适用于酶活性的实时研究。
Gaussia Luciferase 产生的生物发光信号原理是腔肠素（Coelenterazine）的氧化反应， 该反应不需要ATP或其他辅助因子。
反应原理如下：
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使用说明：
一、自备材料
PBS；多道排枪；白色或黑色不透光培养板；化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪。
二、检测前准备
1、预先将 Gaussia Glow-Bright Assay Buffer 放置于室温融化。
2、取出 Gaussia Glow-Bright Assay Substrate (100×) ，每次开盖前需进行短暂涡旋、低速离心。
3、Working Solution 的配制：按照检测每个样品需要50μL Working Solution的量，根据实际使用量，以100:1的比例将适量的GaussiaGlow-Bright Assay Buffer 与 Gaussia Glow-Bright Assay Substrate (100×) 混匀，平衡至室温，避光备用。例如：如果需要5mL Working Solution，则需要在5mL Gaussia Glow-Bright Assay Buffer 中加入50μL Gaussia Glow-Bright Assay Substrate。
注：
① 建议现配现用，剩余Working Solution在当次实验结束后直接舍弃，不要留存。
② 得到最佳检测结果，Working Solution配制后在1小时内进行检测。
三、检测方法
1、细胞上清样品的检测
(1) 细胞上清样品的准备：根据具体情况，收集转染含Gaussia质粒的细胞上清，平衡至室温。将样品加入到不透光培养板中用于检测，如果不能立即检测，可以将收集好的细胞上清放于-20℃保存，至少可保存一个月。
(2) 取恢复至室温的5~20μL细胞上清样品加入96孔白板或黑板。
注：
① 对于同一批样品检测，检测样品体积需统一，这样的检测数据具有更好的可比性，因为样品体积对于最终的化学发光值会产生影响。 ② 优先推荐使用5μL样品，样品体积小时化学发光更稳定。
③ 使用白色或黑色不透光的细胞培养板，减少孔间的信号干扰。
(3) 使用多道排枪向每个细胞孔中加入 50μL Working Solution。
(4) 室温（约25℃）孵育10min，使发光信号趋于稳定。
(5) 混匀后于化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪中检测 Gaussia Luciferase活性。
2、细胞裂解样品的检测
(1) 细胞裂解样品的准备：
① 1×Cell Lysis Buffer 配制：每次使用前以 1: 4 比例将 Cell Lysis Buffer(5×) 与 ddH2O 充分混合，置于冰上备用。配制体积根据实验需求，建议现配现用。
② 去除细胞培养液，加入PBS清洗细胞，去除PBS后按照下表推荐加入适量的 1× Cell Lysis Buffer，室温下静置或振动摇晃裂解15min，吹打并收集全部细胞裂解产物用于后续检测。在光学显微镜下检查细胞是否完全溶解，如果溶解不完全，继续裂解15分钟。如果不能立即检测，可以将裂解液样品放于-20℃保存，至少可保存一个月。
| Cell Culture Plate | 6-well | 12-well | 24-well | 48-well | 96-well |
| 1×Cell Lysis Buffer | 500μL | 200μL | 100μL | 50μL | 20μL |
(2) 取恢复至室温的5~20μL细胞裂解样品加入96孔白板或黑板。
注：
① 对于同一批样品检测，检测样品体积需统一，这样的检测数据具有更好的可比性，因为样品体积对于最终的化学发光值会产生影响。 ② 优先推荐使用5μL样品，样品体积小时化学发光更稳定。
③ 使用白色或黑色不透光的细胞培养板，减少孔间的信号干扰。
(3) 使用多道排枪向每个细胞孔中加入 50μL Working Solution。
(4) 室温（约25℃）孵育10min，使发光信号趋于稳定。
(5) 混匀后于化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪中检测 Gaussia Luciferase活性。
3、总高斯萤光素酶活性的快速检测
(1) 将含有转染Gaussia Luciferase质粒的细胞的不透光孔板平衡至室温。
(2) 向孔板内加入与培养基等体积的Working Solution。
(3) 室温（约25℃）孵育10min，使发光信号趋于稳定。
(4) 混匀后于化学发光仪或带发光检测功能的酶标仪中检测Gaussia Luciferase活性。
注意事项：
1、检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品，不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。
2、由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本检测条件一致。
3、酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将Working Solution以及细胞培养板平衡至室温。
4、如需同时检测多个细胞培养板，请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致，再进行数据读取，以此获得最佳的检测结果。 5、高斯萤光素酶报告基因检测试剂盒（辉光高亮型）具有高发光信号及发光稳定性，发光强度最大可达30万以上。信号半衰期最长可达5小时以上。当酶表达量过低时，发光信号会降低，但信号稳定性会增强；当酶表达量过高时，信号半衰期会减少，但发光信号会增强。建议根据实际情况优化实验设计方案（如增加/减少质粒转染量），避免萤光素酶表达量过高/低。
6、Gaussia Glow-Bright Assay Substrate (100×) 配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况，此时用无水乙醇把体积补足至包装规格，并混匀后即可使用。
是否无菌：否
规格
别名
高斯萤光素酶报告基因检测试剂盒 (辉光高亮型) | 荧光素酶报告基因
英文别名
Gaussia Luciferase Assay Kit | Gaussia Luciferase Glow-Bright Assay Kit
规格或纯度
BioReagent, 用于化学发光
英文名称
Gaussia Luciferase Reporter Gene Assay Kit (Glow Bright)
应用
报告基因检测, 生物发光
敏感性
Light sensitive
储存与运输
储存条件
避光,-20°C储存
运输条件
超低温运输
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ25F1028435 |
分析证书 | G1375752 |
技术文档和文章
溶液计算器
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