计算溶液所需的质量、体积或浓度。
为什么选择此级别
，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
2-8°C储存。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
UltraBio™ sf9 表达系统（Plus）可利用Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统进行杆状病毒及重组蛋白的大规模表达与生产。
1. 专门针对 细胞设计的无血清培养基，适用于 sf9 细胞的长期、稳定、高密度悬浮培养；
2. 亦可用于High Five 细胞培养及蛋白表达；
3. 本产品含有 L-Glutamine，一般无需额外添加；
4. 本产品适用于基于细胞培养的大规模生物药生产及科学研究，但不可直接用于人体或作为药物使用。
细胞复苏
1. 在37 ℃水浴中快速融化冻存的细胞至仅剩米粒大小的冰晶；
2. 将冻存管中的细胞液全部转移到含有25ml SF Vir-exp CDM（预热至27 ℃） 的125ml摇瓶中；
细胞在复苏时可适当减少培养基体积至 15-20ml，提高细胞增长速度。
3. 放入27 ℃，转速 90-110 rpm（振幅 50mm）的摇床中进行培养；
4. 细胞需经过 次以上传代方可完全复苏至正常状态。正常状态的细胞应当达到 天从0.5-1×10⁶ cells/ml 生长至 4×10⁶ cells/ml 的生长状态。复苏过程的前 2-3代出现细胞活率（Viia）＜70％的情况，或细胞增长缓慢（4-6 天代传）均为正常现象。
细胞传代
1. 取细胞密度达到 (3-4) ×10⁶ cells/ml，细胞活率 ≥85％，处于对数生长期的种子液进行传代；
2. 无菌转移所需量的种子液接种至盛有 27 ℃ SF Vir-exp CDM 的摇瓶中；推荐接种密度为 0.5-1×10⁶ cells/ml；
3. 将摇瓶放入27 ℃， 转速 90-110 rpm（振幅 50mm）的摇床中进行培养。
[按上述步骤每2-3天进行传代培养。]
细胞冻存
1. 准备处于对数生长期，活率＞90％的细胞；
2. 按照冻存密度、冻存前种子密度及冻存体积，计算确定所需种子液的量，冻存密度建议在 (1.5-2) ×10⁷ cells/ml;
3. 准备细胞冻存液：将CryoStasis™ 组织/细胞冻存液置于2-8℃预冷备用；
若自行配制冻存液，可使用 90.0％ SF Vir-exp CDM＋10.0％DMSO, 使用前无菌过滤。
4. 无菌移取所需体积的种子液于离心管中，200×g 离心分钟；
5. 加入预冷的冻存液重悬细胞，快速分装细胞至冻存管中，每管1.0-1.5ml；
6. 将冻存管放入程序降温盒（异丙醇降温盒），置于-80℃冰箱中保存。若需长期储存，可在-80℃冰箱存放12-24h后转移到液氮中保存。
病毒包装与蛋白表达
1. 种毒制备： 病毒
1.1 制备细胞培养液：
准备细胞培养专用 孔板，每孔取8×10⁵个处于对数生长期，活率大于95％的sf9细胞，用 2ml SF Vir-exp CDM 混匀后加入板孔中；
将细胞培养专用孔板放入27 ℃培养箱静置 ，促进细胞进入半贴壁状态；
使用其他细胞培养平皿时按皿底面积等比例放大或缩小。
1.2 配置体积为培养体积 5％的病毒包装质粒稀释液：
每 8×10⁵ 个细胞建议转入2-3μg质粒。对于2ml的培养物，可用100μl SF Vir-exp CDM 稀释 2.5μg 质粒，轻轻混匀后加入 5μl EelTrans 增强剂，用移液器轻轻混匀，制成质粒稀释液；
1.3 配置体积为培养体积5％的 EelTrans 转染试剂稀释液：
每μg质粒建议使用1-5μl EelTrans 转染试剂。对于2ml 培养物，可用 100μl SF Vir-exp 稀释 7.5μl EelTrans 转染试剂，涡旋混匀；
1.4 配置质粒转染试剂 复合物：
将以上配置的质粒稀释液加入转染试剂稀释液中，轻轻混匀，室温下孵育10分钟；
1.5 细胞转染：
将 质粒 转染试剂 复合物缓慢加入待转染的细胞培养液中，轻轻混匀，在 或直到发现病毒感染的迹象。病毒包装后，细胞涨大或部分裂活率（Via）一般为20-40％;
1.6 病毒收集：
收集含有病毒的培养物，500×g离心 分钟去除细胞和大碎片。收集上清，用0.22μm滤膜过滤后，将含有病毒的滤液转移到新的离心管中，测定病毒滴度，2-8℃ 避光保存；
2. 病毒扩增：P1 病毒
2.1 制备10-200ml 密度为(1-2)×10⁶ cells/ml，处于对数生长期，活率大于90％的sf9 细胞悬浮培养液；
2.2 以 P0 病毒加入细胞培养液，27℃下孵育48-72小时，细胞活率为20-40％时按 P0 病毒制备方法收集病毒。病毒接种的MOI建议为0.05-0.1；
2.3 按以上方法可进一步扩增病毒，制备 代病毒。蛋白表达时建议使用病毒滴度为 或以上的病毒种液感染细胞。病毒扩增代次限制在 代以内以降低突变几率；
MOI定义为每个细胞感染病毒的活性单位数，用以下公式计算病毒接种量
3. 蛋白表达
3.1 制备密度为 (1.5-2.5)×10⁶ cells/ml，处于对数生长期，活率大于90％的细胞悬浮培养液；
3.2 以 MOI＝5-10加入病毒种液感染细胞，置于27 ℃，转速90-110rpm（振幅 50mm）的摇床培养。细胞活率为20-40％时即可收获蛋白。
注意事项
为了保护您的安全与健康，实验中请全程穿戴好实验服和一次性手套，并注意通风橱操作。
规格
英文名称
UltraBio™ sf9 Expression System (Plus)
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
小分子
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:
溶液计算器
常见问题
本产品应如何储存？
请于2–8 °C条件下保存。需冷藏保存以维持规定的有效期。
本产品如何运输？
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA？
每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。
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