SCR7 DNA-PK 抑制剂：用途、作用机制及常见问题
SCR7 DNA-PK 抑制剂：用途、作用机制及常见问题
SCR7 is a small-molecule inhibitor of DNA ligase IV that blocks non-homologous end joining (NHEJ) and is widely used to enhance homology-directed repair (HDR) efficiency in CRISPR-based genome editing experiments.
- 作用靶点
- DNA连接酶IV（NHEJ通路）
- 主要应用
- 增强CRISPR/Cas9介导的同源定向修复（HDR）
- Aladdin货号
- S649471
- 交叉参考编号
- MCE HY-12742
- 作用机制
- 通过抑制DNA连接酶IV，阻止NHEJ途径对双链断裂末端的连接，从而将修复方式转向HDR
- 相关生物通路
- DNA损伤应答；非同源末端连接（NHEJ）
SCR7是什么？其作用机制如何？
SCR7是一种经合理设计的小分子抑制剂，靶向DNA连接酶IV——该酶负责非同源末端连接（NHEJ）DNA修复通路中的最终连接步骤。当基因组DNA发生双链断裂（DSB）时，细胞可通过两种主要途径进行修复：NHEJ（易错且在大多数细胞周期阶段占主导）或同源定向修复（HDR，精确但频率较低）。
通过阻断DNA连接酶IV的活性，SCR7抑制NHEJ通路，将DSB修复的天平向HDR倾斜。这一特性使SCR7在CRISPR/Cas9基因组编辑工作流程中具有重要价值，尤其适用于需要精确模板驱动插入或纠正的实验场景。研究人员将SCR7加入编辑方案中，以提高HDR结果相对于NHEJ诱导的插入缺失事件的比例。
主要科研应用
SCR7主要用作药理学工具，在多种细胞类型和模式生物中提升CRISPR/Cas9基因组编辑的HDR频率。具体应用包括：
- 精确基因敲入：提高供体模板在Cas9诱导的DSB位点的整合效率。
- 点突变纠正：利用短单链寡脱氧核苷酸（ssODN）供体促进单核苷酸编辑。
- 细胞系工程：构建携带特定遗传修饰的同基因细胞系，用于功能研究。
- 体内基因组编辑：在部分动物模型研究中用于提高基于HDR纠正的效率，但递送方式和体内药代动力学需要仔细优化。
SCR7通常添加至细胞培养基中，或与CRISPR组件共同递送。由于效果因细胞类型和编辑背景而异，最佳浓度和处理时间窗口需针对每个实验体系进行实验确定。
操作、储存与溶解性
正确操作和储存SCR7对于维持化合物完整性和实验重现性至关重要。通用最佳实践指南如下：
- 储存：按供货状态在-20°C避光防潮保存。制备单次使用分装液，避免反复冻融。
- 溶解性：SCR7通常可溶于DMSO。在DMSO中配制高浓度储备液，使用前立即稀释至水性缓冲液或培养基中。实验中DMSO终浓度应控制在≤0.1%以降低细胞毒性，但需针对每种细胞类型进行验证。
- 储备液配制：开瓶前涡旋并短暂离心。使用前确认完全溶解。
- 工作浓度：产品说明中未提供具体工作浓度；请参阅同行评审文献并通过实验优化确定。
请务必参阅产品随附的安全数据表（SDS），获取完整的危害信息和废弃处置说明。
质量、纯度与法规注意事项
Aladdin Scientific以研究级试剂形式提供SCR7（货号：S649471）。主要质量注意事项包括：
- 纯度：具体纯度级别和分析数据（如HPLC、NMR）可在产品页面或分析质量证书（CoA）中获取。研究人员应索取批次特定CoA，以确认其适用性。
- 仅供研究使用：SCR7严格供体外及体内科学研究使用，不得用于人体治疗、临床诊断或兽医用途。
- 法规状态：作为研究化学品，SCR7不受药品GMP要求约束；但用户应遵守所有适用的机构生物安全、化学品卫生及废弃物处置法规。
常见问题
SCR7的作用机制是什么？
SCR7通过抑制DNA连接酶IV发挥作用，该酶是非同源末端连接（NHEJ）DNA修复通路中的关键酶。通过阻断连接酶IV的活性，SCR7阻止NHEJ对双链断裂末端的连接，从而促进可实现精确基因组编辑结果的替代通路——同源定向修复（HDR）。
SCR7如何提高CRISPR/Cas9的HDR效率？
当CRISPR/Cas9在基因组DNA中产生双链断裂时，细胞主要通过易错的NHEJ进行修复，导致插入或缺失（indels）。SCR7通过抑制DNA连接酶IV、抑制NHEJ通路，将修复倾向转向HDR，从而在提供供体模板时提高精确模板定向修复事件的频率，最终增加正确编辑等位基因的比例。
溶解SCR7应使用什么溶剂？
SCR7通常溶于DMSO以配制高浓度储备液。在稀释至含水细胞培养基或缓冲液之前，请确保完全溶解。实验孔中DMSO终浓度通常应维持在≤0.1%以降低潜在的细胞毒性，并应始终设置相应的溶剂对照组。
在CRISPR实验中SCR7应使用什么浓度？
SCR7的最佳工作浓度因细胞类型、转染方法和特定基因组位点而异。产品信息中未提供通用工作浓度；研究人员应参阅原始文献，并通过剂量-效应实验确定在其特定细胞体系中能最大化HDR同时不引起显著细胞毒性的浓度。
SCR7适用于体内基因组编辑研究吗？
SCR7已在部分体内基因组编辑研究中得到探索；然而，与细胞培养应用相比，其在活体生物中的递送、生物利用度和药代动力学需要仔细优化，并非直接可行。SCR7仅作为研究用试剂供应，不得用于临床或治疗用途。计划开展体内研究的研究人员应查阅相关文献，并遵守所有适用的机构及法规指南。
参考文献
- Maruyama T, et al. Increasing the efficiency of precise genome editing with CRISPR-Cas9 by inhibition of nonhomologous end joining. Nature Biotechnology, 2015.
- Chu VT, et al. Increasing the efficiency of homology-directed repair for CRISPR-Cas9-induced precise gene editing in mammalian cells. Nature Biotechnology, 2015.
产品仅供科研与开发使用，不用于人体、动物、诊断或治疗。
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