技术文章

牛肾上腺髓质十二肽:性质与研究应用

牛肾上腺髓质十二肽是一种天然存在的十二氨基酸阿片神经肽,由牛肾上腺髓质嗜铬细胞中前脑啡肽A经蛋白水解加工产生,是最终生成甲硫氨酸脑啡肽生物合成途径中的关键中间体。

常用缩写
BAM-12P(牛肾上腺髓质12P)
肽链长度
12个氨基酸
生物来源
牛肾上腺髓质嗜铬细胞
前体蛋白
前脑啡肽A(PENK)
N端序列
N端含有甲硫氨酸脑啡肽序列(Tyr-Gly-Gly-Phe-Met)
受体活性
阿片受体激动剂(主要作用于μ和δ阿片受体)
研究应用
疼痛调节、神经内分泌信号传导、阿片类生物学

什么是牛肾上腺髓质十二肽?

牛肾上腺髓质十二肽,通常称为BAM-12P,是一种最初从牛肾上腺髓质组织中分离得到的十二氨基酸肽。它由前脑啡肽A(PENK)经逐步蛋白水解加工产生。前脑啡肽A是一种大型前体多蛋白,编码多个甲硫氨酸脑啡肽和亮氨酸脑啡肽拷贝,两侧由前激素转化酶识别的碱性氨基酸对序列所侧翼。

BAM-12P在其N端保留了完整的甲硫氨酸脑啡肽五肽序列(Tyr-Gly-Gly-Phe-Met),后接七个额外的C端残基。这一结构特征使其能够与阿片受体相互作用,同时相较于较短的脑啡肽片段具有独特的药理学特性。由于BAM-12P是直接的生物合成中间体,它在阿片肽成熟和嗜铬细胞分泌研究中占据核心地位。

该肽与儿茶酚胺共同储存于肾上腺髓质嗜铬细胞的大致密核心囊泡中,并在交感神经刺激时协同释放,凸显了其在应激和自主神经反应中的生理相关性。

生物化学结构与稳定性

BAM-12P是一种线性肽,其氨基酸序列为Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Gly-Leu-Ser-Trp-Leu-Gln,但研究人员应参阅阿拉丁科学提供的特定批次产品数据表以确认所供应的具体序列。第5位甲硫氨酸的存在使该肽易受氧化影响;因此,储备液应尽可能在惰性气氛条件下制备,并分装后储存于−20°C或更低温度,以减少反复冻融引起的降解。

该肽通常以冻干白色粉末形式供应,具有明确的纯度(通常通过HPLC检测≥95%),并经质谱法确认。复溶通常在无菌水或稀乙酸(0.1% v/v)中进行,随后在适当的生理缓冲液中进一步稀释。应避免反复冻融,因为这会促进聚集和甲硫氨酸氧化,两者均会降低生物活性。

分子量和确切纯度规格因批次而异;在定量实验中使用前,请务必参阅阿拉丁科学随每批次提供的分析证书(CoA)以确认这些参数。

生物活性与作用机制

BAM-12P通过激活阿片受体(尤其是μ阿片受体(MOR)和δ阿片受体(DOR)亚型)发挥其主要生物效应。通过与这些G蛋白偶联受体(GPCR)结合,该肽触发腺苷酸环化酶抑制、细胞内cAMP水平降低、电压门控钙通道调节以及内向整流钾通道激活——这一系列协同信号事件共同抑制神经元兴奋性和神经递质释放。

与游离甲硫氨酸脑啡肽相比,BAM-12P对脑啡肽酶(中性内肽酶、氨基肽酶N)的酶解具有更强的抵抗力,这归因于C端延伸对这些肽酶接近剪切位点产生的空间位阻效应。这使BAM-12P在体外实验中具有相对较长的受体结合持续时间,使其成为研究阿片受体动力学和脱敏的有用工具。

除经典阿片受体通路外,BAM-12P还被研究其与肥大细胞和感觉神经元上的Mas相关G蛋白偶联受体X2(MRGPRX2)的潜在相互作用,使其进入瘙痒和伤害性感受研究这一快速发展的领域。这些非阿片相互作用是一个活跃的研究领域,在更广泛的重复验证出现之前,研究人员应以适当的审慎态度对待该领域已发表的数据。

研究应用

阿片受体药理学:BAM-12P作为参考激动剂用于放射性配体结合置换实验和功能性cAMP抑制实验,以表征阿片受体亲和力、选择性和信号传导效能。其介于脑啡肽与较大前脑啡肽衍生肽之间的中等长度,使其在旨在确定受体亚型选择性最小序列要求的构效关系(SAR)研究中具有重要价值。

神经肽加工研究:由于BAM-12P是前脑啡肽A的明确加工中间体,它被用作体外前激素转化酶(PC1/3、PC2)和羧肽酶E(CPE)活性实验中的底物或产物标准品。这些实验有助于阐明调控分泌细胞中阿片肽成熟的有序蛋白水解级联过程。

疼痛与伤害感受模型:在啮齿动物模型中,合成BAM-12P通过鞘内或脑室内给药,用于评估镇痛效能,并探究各个前脑啡肽衍生片段对脊髓疼痛调节的贡献。此类数据为新型镇痛肽的合理设计提供依据。

神经内分泌与应激生物学:研究肾上腺应激反应的科学家将BAM-12P用作嗜铬细胞分泌的生物标志物,在离体肾上腺灌流制备中测量其与儿茶酚胺协同响应烟碱刺激或生理应激因素的释放情况。

操作、储存与质量注意事项

复溶:冻干BAM-12P应在无菌、无核酸酶的水或0.1%乙酸中复溶,以制备浓缩储备液(通常为1 mg/mL)。开瓶前应将瓶子平衡至室温,以防止水分在肽粉末上冷凝。开瓶前短暂离心小瓶,使冻干物集中于底部。

储存条件:冻干肽应在−20°C避光防潮保存。复溶后,制备单次使用分装,储存于−80°C。避免反复冻融。在推荐储存条件下,该肽从收货之日起通常稳定保存12个月,但研究人员应通过CoA核实货架寿命。

操作注意事项:尽管BAM-12P在大多数司法管辖区不被归类为受控物质,但它是一种具有生物活性的阿片受体激动剂。应遵守标准实验室安全操作规程:佩戴适当的个人防护装备(手套、实验服、护目镜),在通风良好处操作,并避免在复溶过程中吸入冻干粉末。使用前请参阅阿拉丁科学提供的安全数据表(SDS)。

质量保证:阿拉丁科学的BAM-12P(SKU:B118770)通过HPLC检测纯度,并通过质谱法确认分子特征。每批次均附有CoA,包含纯度、分子量确认及外观数据。需要额外表征数据(如氨基酸分析、内毒素检测)的研究人员,请联系阿拉丁科学技术支持团队。

常见问题

牛肾上腺髓质十二肽(BAM-12P)的序列是什么?

BAM-12P通常报道的序列为Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Arg-Gly-Leu-Ser-Trp-Leu-Gln,N端包含甲硫氨酸脑啡肽(Tyr-Gly-Gly-Phe-Met)序列。请务必从阿拉丁科学提供的特定批次分析证书中确认确切序列,因为文献中曾出现细微序列变体。

如何复溶和储存BAM-12P以维持其活性?

将冻干BAM-12P在无菌水或0.1%乙酸中复溶以制备储备液,然后分装储存于−80°C,避免反复冻融。第5位甲硫氨酸残基易受氧化,因此操作过程中应尽量减少氧气暴露;如果下游实验允许,可谨慎使用DTT等抗氧化剂。

BAM-12P激活哪些阿片受体亚型?

BAM-12P主要作为μ阿片受体(MOR)和δ阿片受体(DOR)的激动剂发挥作用,这与其和甲硫氨酸脑啡肽的结构关系一致。由于C端延伸,其相对亲和力和选择性特征与游离甲硫氨酸脑啡肽不同;各已发表研究中报道的精确Ki值可能有所差异,请参阅原始文献获取与您实验体系相关的定量结合数据。

BAM-12P是受控物质吗?

BAM-12P在大多数主要监管框架下(如美国DEA分类)不被列为受管制物质,因为它是用于研究目的的天然中间肽。然而,研究人员应核实其所在国家或机构的现行法规,因为关于具有阿片活性研究试剂的政策可能有所不同,并可能受到机构生物安全或伦理委员会的监督。

BAM-12P体外阿片受体结合实验的典型使用浓度是多少?

竞争性放射性配体结合实验中使用的浓度通常从亚纳摩尔到微摩尔范围(例如0.1 nM至10 µM),以构建完整的置换曲线。精确范围取决于受体亚型、所用细胞或膜制备物以及所用放射性配体。建议进行预实验剂量-效应实验,以确定每种特定实验格式的最佳浓度范围。

参考文献

  1. Hughes J, Smith TW, Kosterlitz HW, Fothergill LA, Morgan BA, Morris HR. Identification of two related pentapeptides from the brain with potent opiate agonist activity. Nature. 1975;258(5536):577-580. doi:10.1038/258577a0
  2. Stern AS, Lewis RV, Kimura S, Rossier J, Stein S, Udenfriend S. Opioid hexapeptides and heptapeptides in adrenal medulla and brain: possible implications on the biosynthesis of enkephalins. Proc Natl Acad Sci USA. 1980;77(9):5301-5305. PMID:6254070
  3. Noda M, Teranishi Y, Takahashi H, et al. Isolation and structural organization of the human preproenkephalin gene. Nature. 1982;297(5865):431-434. doi:10.1038/297431a0
  4. Fricker LD, Snyder SH. Enkephalin convertase: purification and characterization of a specific enkephalin-synthesizing carboxypeptidase localized to adrenal chromaffin granules. Proc Natl Acad Sci USA. 1982;79(12):3886-3890. doi:10.1073/pnas.79.12.3886

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

目录: 技术文章

Da — 若无特别说明,分子量单位默认为道尔顿。   Mw — 重均分子量。   Mn — 数均分子量。

产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。

引用本文

阿拉丁科学.《牛肾上腺髓质十二肽:性质与研究应用》. 阿拉丁知识库,更新于 2026年10月28日。 https://www.aladdin-e.com/zh_cn/faqs/bovine-adrenal-medulla-dodecapeptide-properties-research-uses.html
这篇文章对您有帮助吗? Yes No 有 3 人觉得有帮助