重组人GNG12蛋白:常见问题与技术指南
重组人GNG12蛋白:常见问题与技术指南
Recombinant Human GNG12 Protein是一种重要的研究试剂,可帮助科学家研究异三聚体G蛋白γ-12亚基在细胞内信号转导通路中的作用。
- 产品名称
- 重组人GNG12蛋白
- 货号
- rp372906
- 蛋白家族
- 异三聚体G蛋白γ亚基家族
- 物种
- 人(智人)
- 主要应用
- G蛋白信号通路研究、生化检测、蛋白相互作用研究
- 推荐储存条件
- -80°C长期储存;避免反复冻融
GNG12是什么?为何重要?
GNG12(G蛋白亚基γ12)编码异三聚体GTP结合蛋白(G蛋白)的γ-12亚基。异三聚体G蛋白由α(Gα)、β(Gβ)和γ(Gγ)亚基组成,是细胞内信号转导中的关键分子开关。G蛋白偶联受体(GPCR)激活后,Gβγ二聚体(GNG12是其组成部分)与Gα解离,并调节下游效应物,包括离子通道、腺苷酸环化酶和磷脂酶C。
GNG12与细胞迁移、增殖及神经元信号传导等多种生物过程有关。对GNG12的研究有助于加深对GPCR生物学的理解,这对药物发现具有重要意义,因为GPCR是最大的治疗靶点类别之一。
重组人GNG12蛋白:产品概述
Aladdin Scientific的重组人GNG12蛋白(货号:rp372906)专为生化和细胞生物学研究应用而生产。作为重组蛋白,其采用特定表达系统制备,为研究人员提供一致、可重复的人源GNG12蛋白,用于体外研究。
典型研究应用包括:
- 研究Gβγ二聚体的组装与功能
- 生化结合与相互作用检测(如共免疫沉淀、pull-down检测)
- 结构与生物物理表征
- 与GPCR系统的功能重建实验
使用前,研究人员应查阅产品说明书,获取特定批次的纯度、浓度、配方及内毒素水平等信息。
操作、储存与稳定性指南
正确操作和储存重组蛋白对于维持其活性和完整性至关重要。以下通用最佳实践适用于重组人GNG12蛋白:
- 储存温度:长期储存请置于-80°C。短期储存可在-20°C保存,但不建议超过两周。
- 冻融循环:尽量减少冻融次数。首次融化后应进行分装,避免反复冻融。
- 复溶:若为冻干粉,请按说明书指导使用推荐缓冲液复溶。复溶前可短暂将蛋白置于室温平衡。
- 工作浓度:应针对每种检测类型进行经验性确定,建议先进行预实验优化条件。
- 载体蛋白:加入载体蛋白(如0.1% BSA)有助于稳定稀释后的蛋白溶液。
请务必查阅特定产品说明书以获取配方详情,因不同批次条件可能有所差异。
推荐应用与实验技巧
重组人GNG12蛋白适用于多种研究场景。以下为常见应用领域的指导说明:
蛋白-蛋白相互作用研究:GNG12天然与Gβ亚基形成复合物。可使用带标签的Gβ配体进行pull-down或共免疫沉淀实验,以验证相互作用特异性并定位结合界面。
生化检测:该蛋白可作为参考标准品或结合配体,用于基于ELISA或SPR(表面等离子体共振)的检测,以评估其与Gβ亚基或下游效应物的相互作用动力学。
结构研究:纯化的重组GNG12蛋白可用于冷冻电镜或X射线晶体学工作流程,通常与其Gβ结合配体形成复合物,以获取Gβγ二聚体结构的深入见解。
功能重建:GNG12可整合到重建的GPCR信号系统中,用于研究特定Gγ亚型对受体偶联及下游信号选择性的贡献。
注意:在关键实验中使用前,请使用适当的功能检测验证蛋白活性。应通过SDS-PAGE或Western blot确认批次间的一致性。
质量、纯度与法规注意事项
用于研究的重组蛋白须经质量控制措施以确保适用于预期应用。对于重组人GNG12蛋白(rp372906),研究人员应查阅随每批产品提供的分析证书(CoA),其中通常包含:
- 纯度评估(如SDS-PAGE或HPLC)
- 身份确认(如Western blot或质谱)
- 内毒素水平检测(与细胞实验相关)
- 浓度及配方详情
本产品仅供科学研究使用(RUO),不适用于诊断、治疗或临床应用。在机构生物安全指南下开展工作的研究人员,在操作重组蛋白时应确保遵循适当的防护规程。
如有关于批次特定数据、定制批量订购或法规文件的问题,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
常见问题
GNG12在人体细胞中的功能是什么?
GNG12编码异三聚体G蛋白的γ-12亚基,该亚基是G蛋白偶联受体(GPCR)下游细胞内信号转导的核心介质。由GNG12与Gβ亚基形成的Gβγ二聚体可调节离子通道、腺苷酸环化酶和磷脂酶C等效应物,影响细胞迁移、增殖和神经元信号传导等过程。
重组人GNG12蛋白(rp372906)采用何种表达系统生产?
rp372906所采用的特定表达系统已记录在Aladdin Scientific提供的产品说明书和分析证书中。重组γ亚基生产的常用系统包括大肠杆菌、昆虫细胞(杆状病毒)和哺乳动物表达平台。请参阅最新产品说明书或联系技术支持获取批次特定详情。
应如何储存重组人GNG12蛋白以保持其稳定性?
长期储存请将蛋白保存在-80°C。首次融化后,将蛋白分装为单次使用量,以减少反复冻融对活性的损害。若为检测稀释使用,可考虑加入载体蛋白(如0.1% BSA)以稳定溶液。请务必遵循产品说明书上的具体储存说明。
重组人GNG12蛋白(rp372906)适用于细胞实验吗?
该产品可能适用于某些细胞实验,但使用前应验证内毒素水平和配方。请查阅分析证书中的内毒素数据,并确认配方缓冲液与您的细胞培养体系兼容。对于GNG12等胞内靶点,可能需要采用转染或显微注射等递送策略。
该蛋白可用于结构生物学应用吗?
重组人GNG12蛋白可用于冷冻电镜或X射线晶体学等结构研究,通常与Gβ配体形成稳定的Gβγ二聚体。纯度和均一性对结构研究至关重要;请通过产品说明书核实相关参数,并根据具体应用需求考虑进行额外纯化步骤。
rp372906进行了哪些质量控制检测?
重组人GNG12蛋白(rp372906)的质量控制通常包括SDS-PAGE纯度评估、Western blot或质谱身份确认以及内毒素检测。每批次的具体质量控制数据可在分析证书(CoA)中查阅。请联系Aladdin Scientific技术支持,索取您所购批次的CoA。
参考文献
- Wettschureck N, Offermanns S. Mammalian G proteins and their cell type specific functions. Physiological Reviews. 2005;85(4):1159-1204. doi:10.1152/physrev.00003.2005
- Hurowitz EH, et al. Genomic characterization of the human heterotrimeric G protein alpha, beta, and gamma subunit genes. DNA Research. 2000;7(2):111-120. doi:10.1093/dnares/7.2.111
- Oldham WM, Hamm HE. Heterotrimeric G protein activation by G-protein-coupled receptors. Nature Reviews Molecular Cell Biology. 2008;9(1):60-71. doi:10.1038/nrm2299
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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