重组人FRRS1L蛋白:常见问题与使用指南
重组人FRRS1L蛋白:常见问题与使用指南
Recombinant Human FRRS1L Protein(重组人FRRS1L蛋白)是代表人类亚铁螯合物还原酶1样(FRRS1L)基因产物的纯化研究级蛋白,是AMPA型谷氨酸受体复合物的辅助亚基,在突触传递和受体转运中发挥关键作用。
- 产品名称
- 重组人FRRS1L蛋白
- 货号
- rp367838
- 基因/蛋白
- FRRS1L(亚铁螯合物还原酶1样蛋白)
- 生物学功能
- AMPA受体复合物的辅助亚基;参与突触受体转运与调控
- 物种
- 人(智人)
- 应用
- 体外生化实验、蛋白相互作用研究、抗体验证、结构研究
- 储存建议
- 储存于-80°C;避免反复冻融
FRRS1L是什么?其科学意义何在?
FRRS1L(亚铁螯合物还原酶1样蛋白),又称CPTP或C9orf4,是由人类FRRS1L基因编码的跨膜蛋白。尽管其序列与亚铁螯合物还原酶具有同源性,但FRRS1L在神经元中已被证实的主要功能是作为AMPA型离子型谷氨酸受体(AMPAR)的辅助亚基。
AMPA受体是中枢神经系统中快速兴奋性神经传递的主要介质。FRRS1L与AMPAR复合物相关联——与其他辅助亚基(如TARP蛋白和CNIH蛋白)共同——调节受体转运、门控动力学及突触定位。FRRS1L的功能缺失突变与严重的神经发育障碍(包括癫痫性脑病)相关,凸显其重要的生理学意义。
重组人FRRS1L蛋白(rp367838)使研究人员能够在不受天然细胞环境复杂性干扰的情况下,研究FRRS1L蛋白相互作用、验证抗体并开展生化研究。
产品规格与质量属性
Aladdin Scientific的重组人FRRS1L蛋白(rp367838)采用重组表达系统生产,以确保批次间稳定一致的质量。与实验方案设计相关的主要规格信息包括:
- 来源:重组表达;具体宿主系统应以当前数据表或联系技术支持确认,因为表达宿主(如大肠杆菌、HEK293细胞、杆状病毒/昆虫细胞)会影响翻译后修饰和蛋白折叠。
- 纯度:研究级;确切纯度百分比应以每批次随附的当前质量检验报告(CoA)为准。
- 剂型:以适宜缓冲液中纯化蛋白的形式供应;缓冲液成分和蛋白浓度请参阅产品数据表。
- 分子量:与FRRS1L的预测分子量一致;由于标签和加工可能改变SDS-PAGE上的表观分子量,请以CoA中的精确数值为准。
使用前请务必参阅批次特定的CoA,核实纯度、浓度及SDS-PAGE数据。
复溶、操作处理与储存指南
妥善操作重组人FRRS1L蛋白对于在整个实验过程中维持其活性和完整性至关重要。
复溶
若产品为冻干形式,请按产品数据表推荐的体积使用无菌超纯水或缓冲液复溶。开封前先将小瓶平衡至室温,并短暂离心以收集瓶盖或瓶壁上的残余物。轻柔吸打混匀;切勿涡旋振荡,以防蛋白变性。
储存
- 长期保存请储存于-80°C。
- 短期使用(数天内),分装后可储存于-20°C。
- 避免反复冻融,以防蛋白聚集并丧失活性。首次解冻时应分装为单次用量。
- 勿存放于温度循环的无霜冰箱中。
工作条件
实验准备过程中将蛋白置于冰上。使用低吸附微量离心管,以减少低浓度时的吸附损失。若实验方案允许使用载体蛋白(如0.1% BSA),可有助于稳定稀释溶液。
实验应用与检测方法兼容性
重组人FRRS1L蛋白(rp367838)适用于多种体外研究应用:
- 蛋白-蛋白相互作用研究:FRRS1L作为AMPAR辅助亚基的功能,使其成为pull-down实验、共免疫沉淀对照以及表面等离子体共振(SPR)或生物膜干涉(BLI)结合实验的重要靶点,用于表征其与AMPAR亚基(GluA1-4)或其他复合物配体的相互作用。
- 抗体验证:用作Western blot、ELISA或dot blot实验中的阳性对照抗原,以验证抗FRRS1L抗体。
- 生化表征:酶活性测定(注意其在生理条件下的还原酶活性尚未充分确认)、圆二色(CD)光谱用于二级结构确认,以及热漂移实验用于稳定性分析。
- 结构研究:为与AMPAR复合物组分联合进行的晶体学或冷冻电镜样品制备提供材料。
- 药物发现:作为生化工具,用于筛选可能调控AMPAR复合物组装或FRRS1L相互作用的小分子。
如需确认各特定检测方案的适用性,请查阅产品数据表或联系Aladdin Scientific技术支持团队。
常见问题排查
以下指导针对使用重组人FRRS1L蛋白时常见的问题:
- Western blot信号弱或无信号:确认抗FRRS1L抗体已针对蛋白的变性(SDS-PAGE)形式进行验证。检查上样量是否正确以及转膜效率是否足够。核实分子量是否与CoA中的预期值一致。
- 蛋白聚集:聚集通常由反复冻融或储存不当引起。使用前将解冻的蛋白高速离心(如4°C下14,000×g离心10分钟)以沉淀聚集体。确保工作溶液置于冰上保存。
- 活性丧失:核查储存温度、冻融次数及缓冲液成分。某些蛋白需要特定辅因子或还原剂(如DTT或β-巯基乙醇)以维持活性;请查阅数据表了解相关要求。
- SDS-PAGE条带大小异常:含亲和标签或经信号肽加工的重组蛋白迁移位置可能与规范序列的预测值不同。请参阅CoA,了解在所提供条件下的预期表观分子量。
- 结合实验结果不一致:确保两种相互作用配体处于兼容缓冲液中,且pH和盐浓度适宜。可能需要BSA或其他封闭剂以减少非特异性结合。
若问题持续存在,请携带批次号和实验详情联系Aladdin Scientific技术支持团队。
常见问题
FRRS1L是什么?其在人类生物学中的功能是什么?
FRRS1L(亚铁螯合物还原酶1样蛋白)是一种跨膜蛋白,在中枢神经系统中作为AMPA型谷氨酸受体复合物的辅助亚基发挥功能。它在调控受体转运、门控动力学及突触定位中发挥作用。FRRS1L基因突变与严重的癫痫性脑病相关。
如何储存重组人FRRS1L蛋白(rp367838)以保持其完整性?
长期保存请将蛋白储存于-80°C,并避免反复冻融,因为这会导致蛋白聚集和功能完整性丧失。首次解冻时,请分装为单次用量。若需短期使用(数天内),分装品可保存于-20°C。实验过程中工作溶液应始终置于冰上。
重组人FRRS1L蛋白已验证适用于哪些实验应用?
重组人FRRS1L蛋白适用于体外研究应用,包括蛋白-蛋白相互作用研究(pull-down、SPR、BLI)、抗体验证(Western blot、ELISA)、生化表征及结构研究。具体已验证的应用及实验条件请以产品数据表或随批次提供的质量检验报告(CoA)为准。
rp367838采用何种表达系统生产?这是否会影响我的实验?
rp367838的具体表达宿主(如大肠杆菌、HEK293细胞或杆状病毒/昆虫细胞)应以产品数据表为准,因为表达系统的选择会影响翻译后修饰,如糖基化和磷酸化。若实验需要特定的修饰状态,请在订购前向Aladdin Scientific技术支持团队核实表达系统及所含标签信息。
若观察到蛋白聚集或SDS-PAGE条带大小异常,应如何处理?
若观察到蛋白聚集,请在使用前将解冻样品高速离心(如4°C下14,000×g离心10分钟)以去除聚集体,并确保后续所有操作均在冰上进行。若出现条带大小异常,请与批次特定CoA中列出的预期表观分子量进行对比,因为亲和标签或信号肽切割可能导致迁移位置偏移。若问题未能解决,请携带批次号联系Aladdin Scientific技术支持团队。
重组人FRRS1L蛋白是否适合用作抗体验证对照?
是的,重组蛋白常用作阳性对照抗原,用于在Western blot、ELISA及dot blot等实验中验证抗体特异性。使用rp367838进行此类用途时,请确认抗体识别的表位区域存在于重组蛋白构建体中,并核实任何亲和标签是否可能干扰抗体结合。
参考文献
- Schwenk J et al. (2019) Regional diversity and developmental dynamics of the AMPA-receptor proteome in the mammalian brain. Neuron. (Characterizes AMPAR auxiliary subunit complexes including FRRS1L.)
- Brechet A et al. (2017) AMPA-receptor specific biogenesis complexes control synaptic transmission and intellectual ability. Nature Communications. (Describes FRRS1L as part of AMPA receptor biogenesis complexes.)
- Hamdan FF et al. (2017) Autosomal recessive variants in FRRS1L cause a neurodevelopmental disorder with epilepsy. European Journal of Human Genetics. (Links FRRS1L loss-of-function to epileptic encephalopathy.)
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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