重组人GIGYF1蛋白:研究指南与应用
重组人GIGYF1蛋白:研究指南与应用
Recombinant Human GIGYF1 Protein是GRB10相互作用GYF蛋白1的重组形式,作为研究试剂用于mRNA翻译调控、胰岛素受体信号传导及GYF结构域介导的蛋白质-蛋白质相互作用研究。
- 产品名称
- 重组人GIGYF1蛋白
- 货号
- rp372896
- 基因名称
- GIGYF1(GRB10相互作用GYF蛋白1)
- 物种来源
- 人(智人)
- 蛋白形式
- 重组蛋白
- 研究领域
- 翻译调控、胰岛素信号通路、RNA生物学
GIGYF1的生物学背景
GIGYF1(GRB10相互作用GYF蛋白1)是含GYF结构域蛋白家族的成员。它最初因与GRB10相互作用而被发现,GRB10是参与胰岛素及胰岛素样生长因子(IGF)受体信号通路的衔接蛋白。GYF结构域是一种保守的富含脯氨酸序列结合模块,介导对信号转导和转录后调控至关重要的特异性蛋白质-蛋白质相互作用。
GIGYF1及其旁系同源物GIGYF2已被证明参与mRNA翻译和降解的调控。这些蛋白与4EHP(eIF4E2)帽结合蛋白及CCR4–NOT去腺苷酸化酶复合物的组分相互作用,从而实现对特定靶mRNA的翻译抑制。该机制在发育调控、细胞应激反应以及受体酪氨酸激酶激活下游基因表达网络的调控中具有重要意义。
GIGYF1功能缺失与胰岛素信号改变有关,目前正在研究其在代谢性疾病和神经发育障碍中的潜在作用。因此,重组人GIGYF1蛋白是在体外解析上述分子通路的重要工具。
蛋白特性与规格
重组人GIGYF1蛋白(货号:rp372896)以重组方式生产,供研究使用。GIGYF1与实验设计相关的关键生化特性包括:其GYF结构域可结合富含脯氨酸的基序(通常为PPPPGHR或类似序列),以及其延伸的内禀无序区域,该区域有助于与多种结合伙伴相互作用,包括4EHP和三核苷酸重复序列含蛋白。
研究人员应查阅产品专属数据表,以获取经确认的表达宿主系统、标签配置、纯度等级(通常通过SDS-PAGE和/或HPLC验证)、内毒素水平及制剂缓冲液等详细信息。上述参数直接影响下游实验性能,包括结合实验、酶学研究及基于细胞的功能实验。
注意:为避免信息不准确,本文未列出分子量、纯度百分比、内毒素限值和浓度的具体数值;所有经确认的规格参数请参阅Aladdin Scientific rp372896产品数据表。
复溶、操作与储存指南
复溶:若产品为冻干形式,开瓶前先短暂离心,使所有物料沉集于瓶底。按产品数据表所注明的方法,用无菌超纯水或指定缓冲液复溶蛋白。在室温下轻轻旋转数分钟使溶液平衡;避免剧烈涡旋,以防蛋白变性。推荐的复溶体积及所得浓度见产品数据表。
操作:在无菌条件下操作,防止微生物污染。使用低蛋白结合离心管和移液枪头,以减少吸附损失。若蛋白用于基于细胞的实验,确保所有缓冲液和添加剂均为无菌细胞培养级别。
储存:收到产品后,按数据表指示将冻干蛋白存于–20 °C或–80 °C。复溶后的蛋白应分装成小份,避免反复冻融,以防聚集和活性丧失。工作分装液可在4 °C短期保存(通常不超过一周);如建议添加载体蛋白(如0.1% BSA),长期保存应置于–80 °C。请务必参阅产品数据表获取针对该产品的具体储存条件。
研究应用
重组人GIGYF1蛋白适用于多种体外研究应用,包括但不限于:
- 蛋白质-蛋白质相互作用研究:GIGYF1的GYF结构域和无序区域使其成为pull-down实验、共免疫沉淀验证、表面等离子体共振(SPR)及等温滴定量热法(ITC)的理想靶点,用于表征其与GRB10、4EHP、三核苷酸重复蛋白及CCR4–NOT复合物亚基的相互作用。
- 翻译抑制实验:该蛋白可用于无细胞翻译体系,研究GIGYF1–4EHP复合物抑制靶mRNA帽依赖性翻译的机制。
- 胰岛素和IGF信号通路研究:作为GRB10的下游效应物,GIGYF1可用于重建实验,解析受体酪氨酸激酶信号级联。
- 抗体验证:重组GIGYF1蛋白可作为阳性对照抗原,通过Western blot、ELISA或斑点杂交验证GIGYF1特异性抗体。
- 结构生物学:该重组蛋白可支持X射线晶体学或冷冻电镜研究,用于解析GIGYF1结构域架构和相互作用界面。
研究人员应针对每种具体应用,凭经验优化蛋白浓度、缓冲液条件和实验格式。
质量保证与法规信息
Aladdin Scientific提供的重组人GIGYF1蛋白(rp372896)仅供科学研究使用(RUO),未经批准或验证用于诊断、治疗或兽医用途。
每批产品均按随附的质量分析证书(CoA)进行质量控制检测。重组蛋白的典型质控评估包括:在还原和/或非还原条件下通过SDS-PAGE评估纯度、通过Western blot或质谱确认蛋白鉴定,以及通过LAL法检测内毒素含量。具体质控数据因批次而异,可根据需求提供。
如对产品规格、批次特定CoA、定制配方或批量订购有任何疑问,请联系Aladdin Scientific技术支持团队。
常见问题
GIGYF1是什么?它在研究中为何重要?
GIGYF1(GRB10相互作用GYF蛋白1)是一种含GYF结构域的衔接蛋白,参与mRNA翻译抑制及胰岛素/IGF受体信号传导。它通过4EHP–CCR4–NOT轴将受体酪氨酸激酶活性与转录后基因调控相连,在代谢性疾病、神经发育生物学和RNA调控研究中具有重要意义。
如何复溶和储存重组人GIGYF1蛋白?
若产品为冻干形式,开瓶前先短暂离心,然后用无菌超纯水或数据表指定缓冲液复溶。将复溶后的蛋白分装成小份以避免反复冻融,并在–80 °C长期储存。请务必查阅产品数据表(rp372896)获取准确的复溶体积和储存条件。
重组人GIGYF1蛋白已验证适用于哪些实验应用?
重组人GIGYF1蛋白适用于蛋白质-蛋白质相互作用研究(pull-down、SPR、ITC)、无细胞翻译抑制实验、抗体验证(Western blot、ELISA)及结构生物学研究。研究人员应针对每种具体实验格式进行实验验证。
重组人GIGYF1蛋白是否适用于临床或诊断用途?
不适用。Aladdin Scientific提供的重组人GIGYF1蛋白(rp372896)标注为仅供研究使用(RUO),未经验证或批准用于诊断、治疗或兽医应用。
GIGYF1如何与GRB10相互作用,其功能意义是什么?
GIGYF1通过其GYF结构域与GRB10相互作用,该结构域能识别GRB10中的富含脯氨酸基序。GRB10本身是胰岛素和IGF-1受体信号通路的负调控因子,GIGYF1–GRB10相互作用被认为将受体水平的信号事件与下游翻译调控机制相偶联,但其确切的功能结果仍在持续研究中。
参考文献
- Morita M, et al. A novel 4EHP-GIGYF2 translational repressor complex is essential for mammalian development. Molecular and Cellular Biology. 2012.
- Giovannone B, et al. GIGYF1 and GIGYF2 proteins associate with mRNA decapping complexes. Biochemical and Biophysical Research Communications. 2009.
- Iossifov I, et al. The contribution of de novo coding mutations to autism spectrum disorder. Nature. 2014.
- Aladdin Scientific. Recombinant Human GIGYF1 Protein, SKU rp372896. Product Datasheet. Aladdin Scientific.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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