重组人IL31RA蛋白:研究指南与实验方案
重组人IL31RA蛋白:研究指南与实验方案
Recombinant Human IL31RA Protein是一种纯化的具有生物活性的受体亚基,用于研究与炎症性和过敏性疾病相关的IL-31介导的信号通路。
- 蛋白质名称
- 重组人IL31RA蛋白
- 别名
- 白细胞介素-31受体α亚基;IL-31 RA;IL31RA;GPL
- 生物学功能
- IL-31受体复合物的亚基;与OSMRβ协同结合IL-31,激活参与炎症、瘙痒及组织重塑的JAK/STAT信号通路
- 表达系统
- 通常在哺乳动物或昆虫表达系统中生产,以保留糖基化修饰和生物活性;具体表达系统请以产品数据表为准
- 主要应用
- ELISA、细胞结合实验、受体-配体相互作用研究、Western blot、SDS-PAGE质量验证
- 储存建议
- 冻干蛋白应储存于-20 °C至-80 °C;避免反复冻融;按数据表指引用无菌缓冲液复溶
IL31RA的生物学背景
白细胞介素-31受体α亚基(IL31RA),又称GPL或IL-31 RA,是一种I型细胞因子受体,作为功能性IL-31受体复合物的两个亚基之一发挥作用。另一亚基为肿瘤抑素M受体β(OSMRβ)。IL31RA与OSMRβ共同结合其同源配体IL-31——一种主要由活化CD4+ Th2辅助T细胞分泌的细胞因子。
IL-31结合后,受体复合物通过Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)通路,以及MAPK和PI3K级联反应启动胞内信号传导。这些下游事件调控与炎症、上皮屏障功能障碍、瘙痒及组织重塑相关的基因表达程序。IL31RA在角质形成细胞、背根神经节神经元、气道上皮细胞、单核细胞及巨噬细胞等多种细胞类型上均有表达,揭示了其在皮肤稳态和特应性疾病中的重要作用。
IL-31/IL31RA信号失调与特应性皮炎、哮喘、过敏性鼻炎及某些血液系统恶性肿瘤密切相关。因此,IL31RA已成为治疗性抗体的重要靶点,也是基础和转化研究中探索2型炎症性疾病的关键蛋白。
蛋白质规格与质量控制
重组人IL31RA蛋白(Aladdin目录号:rp368365)采用重组表达系统生产,旨在获得可溶性、具有生物活性的人IL31RA胞外域。以下规格参数为此类重组受体蛋白的典型值;使用前请务必以当前产品数据表核实具体数值。
- 蛋白形式:通常为人IL31RA的胞外域,常与亲和标签(如His标签或Fc标签)融合,以便于纯化和检测。
- 纯度:还原条件SDS-PAGE检测纯度≥90%;内毒素水平经控制,以最大程度降低对细胞实验的干扰。
- 制剂形式:通常以冻干粉末或液态形式供应,溶于生理缓冲液(如含BSA等载体蛋白的PBS)。批次特定详情请参阅数据表。
- 生物活性:通过功能性结合或抑制实验验证与IL-31配体的相互作用;具体ED50值因批次而异,详见质量检测报告(CoA)。
Aladdin Scientific以SDS-PAGE及功能性生物活性实验(适用时)作为标准质量控制步骤。批次特定的CoA文件可按需提供。
复溶、储存与操作方案
正确的复溶与储存操作对于维持重组人IL31RA蛋白的生物活性至关重要。请遵循以下步骤,并始终参阅产品特定数据表中与批次相关的操作说明。
复溶
- 开瓶前短暂离心(1,000–2,000 × g,30秒),使冻干物集中于瓶底。
- 用无菌去离子水或数据表推荐的缓冲液(通常为pH 7.4的PBS)将蛋白复溶至0.1–1.0 mg/mL。若蛋白用于低浓度实验或需长期储存,建议加入载体蛋白(0.1% BSA)。
- 通过移液管轻柔混匀或滚动小瓶混匀。切勿涡旋振荡,以免引起蛋白变性和聚集。
- 在室温下静置10分钟至蛋白完全溶解,然后置于冰上。
储存条件
- 短期储存(≤1周):4 °C保存。
- 长期储存:按单次用量分装后,于-20 °C或-80 °C保存。分装可避免反复冻融导致的活性损失。
- 避免反复冻融;每次冻融循环均可能显著降低生物活性。
使用条件
- 使用前在冰上解冻分装蛋白。
- 实验操作过程中将蛋白置于冰上。
- 避免长时间暴露于37 °C以上温度。
实验应用与检测指导
重组人IL31RA蛋白适用于多种体外研究应用。以下为最常见的用途及各应用的实用操作指导。
ELISA与结合实验
IL31RA常作为捕获或检测试剂用于夹心ELISA,用于定量IL-31配体。作为包被抗原,还可用于筛选与IL31RA结合的抗体或小分子。板包被浓度通常为0.5–2 µg/mL,具体浓度应针对每个检测体系进行优化。
受体-配体相互作用研究
表面等离子体共振(SPR)、生物层干涉(BLI)及共免疫沉淀(co-IP)实验均可利用重组IL31RA表征IL31RA与IL-31或候选阻断分子之间的结合动力学参数(KD、kon、koff)。使用前应通过0.22 µm滤膜过滤或进行尺寸排阻色谱,确保蛋白无聚集体。
基于细胞的功能实验
作为可溶性受体(诱饵受体策略),重组IL31RA胞外域可在细胞培养体系中中和IL-31的生物活性。该方法有助于验证下游信号传导(JAK1/2、STAT3/5磷酸化),并在目的细胞模型中确认IL-31的依赖性。
Western Blot与SDS-PAGE
纯化蛋白可作为阳性对照或分子量参照,用于抗IL31RA抗体的Western blot实验。在还原和非还原条件下分别电泳,以评估二硫键完整性。
安全性、法规状态与订购信息
仅供研究使用(RUO):重组人IL31RA蛋白(目录号:rp368365)仅供体外研究使用,未经批准或验证用于诊断、治疗或兽医应用。
安全操作:与所有蛋白试剂一样,操作时应遵守标准实验室防护规程,佩戴适当的个人防护装备(手套、实验服、护目镜)。尽管IL31RA本身未被列为生物危害物质,仍应遵循所在机构的生物安全指南。完整危害信息请参阅安全数据表(SDS)。
废弃物处理:蛋白溶液及受污染材料的处置应遵守当地机构及法规关于生物实验室废弃物的相关规定。
订购:重组人IL31RA蛋白可通过Aladdin Scientific订购,目录号为rp368365。请联系当地Aladdin代表或访问Aladdin Scientific官网索取报价、获取最新数据表或申请特定批次的质量检测报告。
常见问题
IL31RA的生物学功能是什么?它与疾病研究有何关联?
IL31RA是异二聚体IL-31受体复合物的亚基。与OSMRβ共同结合IL-31后,激活JAK/STAT、MAPK和PI3K信号通路,驱动炎症、瘙痒及上皮重塑。IL-31/IL31RA信号失调与特应性皮炎、哮喘和过敏性鼻炎相关,使IL31RA成为治疗研究和机制研究的重要靶点。
如何复溶和储存重组人IL31RA蛋白以保持其生物活性?
将冻干蛋白用无菌PBS(pH 7.4)或数据表指定的缓冲液复溶,浓度为0.1–1.0 mg/mL。低浓度使用时建议加入0.1% BSA作为载体蛋白。按单次用量分装后于-80 °C长期保存。避免反复冻融及涡旋振荡,以防聚集和活性丧失。
重组人IL31RA蛋白适用于哪些实验格式?
该蛋白适用于ELISA(作为包被抗原或检测试剂)、基于SPR或BLI的受体-配体结合研究、细胞功能中和实验,以及作为Western blot阳性对照。应针对每种具体实验体系通过实验优化蛋白浓度,并参阅产品数据表获取推荐条件。
重组人IL31RA蛋白是否适用于体内实验或诊断用途?
不适用。本产品标注为仅供研究使用(RUO),仅供体外实验室研究。未经验证或批准用于诊断、治疗或兽医应用。如需用于非研究目的,须进行相应的法规申报和验证。
如何验证收到的IL31RA蛋白的质量和纯度?
每个批次均附有质量检测报告(CoA),详细记录纯度(SDS-PAGE检测)、内毒素水平及生物活性测试结果。您可向Aladdin Scientific索取批次特定CoA。收货后,亦可在还原条件下进行SDS-PAGE电泳,独立确认预期分子量条带并评估纯度。
参考文献
- Dillon SR, et al. Interleukin 31, a cytokine produced by activated T cells, induces dermatitis in mice. Nature Immunology. 2004;5(7):752-760. doi:10.1038/ni1084
- Kasaian MT, et al. IL-31 is associated with cutaneous lymphocyte antigen-positive skin homing T cells in patients with atopic dermatitis. Journal of Allergy and Clinical Immunology. 2011;127(2):418-425.
- Zhang Q, et al. Structures of the IL-31 receptor: insights into the mechanisms of cytokine signal transduction. Nature Structural & Molecular Biology. 2018;25(12):1071-1081.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
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