重组人LAMP2蛋白:科研使用指南
重组人LAMP2蛋白:科研使用指南
Recombinant Human LAMP2 Protein是一种关键科研试剂,助力科学家研究人类细胞生物学中的溶酶体膜完整性、自噬通量及伴侣蛋白介导的自噬通路。
- 产品名称
- 重组人LAMP2蛋白
- 货号
- rp364754
- 蛋白功能
- 溶酶体相关膜蛋白2;参与自噬、溶酶体生物发生及伴侣蛋白介导的自噬过程
- 主要研究应用
- 自噬研究、溶酶体标志物检测、蛋白互作研究、Western blot、ELISA
- 物种来源
- 人(智人)
- 参考编号
- absea#PP-171
背景:LAMP2的生物学意义
溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)是一种主要定位于溶酶体膜的I型跨膜糖蛋白。它在维持溶酶体膜完整性、促进自噬体与溶酶体融合以及作为伴侣蛋白介导自噬(CMA)受体方面发挥着关键作用。LAMP2是溶酶体膜上最丰富的蛋白质之一,被广泛用作细胞生物学研究中的经典溶酶体标志物。
人类中已鉴定出LAMP2的三种剪接异构体——LAMP2A、LAMP2B和LAMP2C,各异构体在跨膜区和胞质尾部序列上有所不同,因而具有不同的生物学功能。LAMP2A是CMA的限速受体,LAMP2B则与心肌和骨骼肌功能相关。LAMP2基因突变会导致Danon病,这是一种罕见的X连锁疾病,以心肌病、骨骼肌病和智力障碍为特征,进一步凸显了该蛋白的生理重要性。
复溶与操作规程
为确保重组人LAMP2蛋白的最佳活性和稳定性,请遵循以下复溶与操作指南:
- 复溶:开瓶前短暂离心小瓶,使内容物集中至底部。将冻干蛋白溶于无菌超纯水或适当缓冲液(如pH 7.4的磷酸盐缓冲液)中,配制至工作储液浓度。在室温下轻柔摇动10–15分钟使溶液平衡,避免剧烈涡旋以防蛋白变性。
- 浓度:按产品说明书推荐浓度制备工作分装液,具体批次浓度详见absea#PP-171。
- 载体蛋白:若需长期稳定保存,可考虑添加终浓度0.1%的牛血清白蛋白(BSA)作为载体蛋白,以减少蛋白吸附于管壁造成的损失。
- 缓冲液相容性:除非已针对本蛋白格式进行特异性验证,否则避免使用含强还原剂或去污剂的缓冲液。
储存条件与稳定性
适当的储存条件对维持重组人LAMP2蛋白的生物活性和完整性至关重要:
- 短期储存(不超过1个月):将复溶后的蛋白储存于2–8 °C,尽量减少反复冻融次数。
- 长期储存:将复溶蛋白分装为单次用量,储存于−20 °C或−80 °C。建议在−80 °C下储存以获得最长期的最佳稳定性。
- 冻干状态:将冻干蛋白储存于−20 °C干燥环境中,避免潮湿和光照。
- 冻融次数:冻融次数不超过三次,以防止蛋白聚集和活性丧失。
- 有效期:请查阅每批次随附的质量检测报告(CoA)以获取具体有效期和稳定性数据。
注意:具体储存缓冲液成分和推荐浓度应以每批次产品说明书(absea#PP-171)为准。
推荐研究应用
重组人LAMP2蛋白适用于多种体外研究应用,包括但不限于:
- 自噬研究:用作测量自噬通量、溶酶体功能及CMA活性检测中的阳性对照或刺激物。
- Western blot(WB):可用作标准蛋白,用于校准LAMP2特异性抗体检测。
- 酶联免疫吸附测定(ELISA):可作为标准品或捕获抗原用于夹心ELISA格式,以定量生物样品中的LAMP2水平。
- 蛋白-蛋白互作研究:适用于pull-down实验、共免疫沉淀对照或表面等离子共振(SPR),以表征LAMP2的结合伙伴。
- 无细胞功能检测:可用于在重建系统中研究溶酶体膜融合事件和蛋白转位。
- 抗体验证:作为抗原对照,用于在不同检测平台上验证靶向LAMP2的抗体。
请在实验室环境中对应用特异性条件(抗体稀释度、蛋白浓度、孵育时间)进行经验性验证。
质量、安全及法规注意事项
质量:重组人LAMP2蛋白(rp364754)在受控条件下生产。纯度、特性和活性由供应商依据内部质量标准absea#PP-171进行评估。可按需提供质量检测报告(CoA),应查阅该报告以获取批次特异性质量数据,包括SDS-PAGE纯度、内毒素水平和生物活性结果。
仅供科研使用(RUO):本产品仅供实验室研究目的使用,未经批准、验证或授权用于临床诊断、治疗应用或对人类及动物的体内给药。
安全:操作所有重组蛋白时应采取标准实验室防护措施:穿戴适当的个人防护装备(PPE),避免吸入或摄入,并按照机构生物安全和废物处置政策处理废弃物。
出口合规:在国际运输前请核查适用的出口管制法规。阿拉丁科学的条款和条件适用于所有销售和退货;详细指导请参阅我们的运输和退货政策。
常见问题
重组人LAMP2蛋白推荐使用哪种复溶缓冲液?
通常建议在无菌超纯水或磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4)中复溶冻干重组蛋白。如需批次特异性缓冲液建议,请参阅产品说明书absea#PP-171或随订单附带的质量检测报告。
重组人LAMP2蛋白应如何储存以保持活性?
复溶后,将蛋白分装为单次用量,长期保存于−80 °C,短期使用可储存于2–8 °C(不超过一个月)。冻干蛋白应在干燥条件下储存于−20 °C。为保持生物活性,冻融次数不超过三次。
重组人LAMP2蛋白经过哪些研究应用验证?
重组人LAMP2蛋白适用于Western blot、ELISA、蛋白-蛋白互作研究(如pull-down和SPR实验)、自噬通量检测及抗体验证实验。应用特异性条件需在各实验室中经验性优化。详细验证应用信息请参阅产品说明书absea#PP-171。
重组人LAMP2蛋白是否适用于临床或诊断用途?
不适用。本产品标注为仅供科研使用(RUO),未经批准或验证用于临床诊断、治疗应用或人体及动物体内使用,仅限实验室研究目的。
LAMP2已知的生物学功能有哪些,与我的研究有何关联?
LAMP2(溶酶体相关膜蛋白2)是溶酶体膜的主要组成成分,在自噬、溶酶体生物发生及伴侣蛋白介导的自噬(CMA)中发挥关键作用。它是公认的溶酶体标志物,基因突变时与Danon病相关。研究自噬、溶酶体贮积病、心肌病或蛋白质降解通路的研究人员将发现该蛋白具有重要的研究价值。
参考文献
- Eskelinen EL. Roles of LAMP-1 and LAMP-2 in lysosome biogenesis and autophagy. Mol Aspects Med. 2006;27(5-6):495-502. doi:10.1016/j.mam.2006.08.005
- Cuervo AM, Dice JF. A receptor for the selective uptake and degradation of proteins by lysosomes. Science. 1996;273(5274):501-503. doi:10.1126/science.273.5274.501
- Nishino I, Fu J, Tanji K, et al. Primary LAMP-2 deficiency causes X-linked vacuolar cardiomyopathy and myopathy (Danon disease). Nature. 2000;406(6798):906-910. doi:10.1038/35022604
- Aladdin Scientific. Recombinant Human LAMP2 Protein, SKU rp364754, Product Datasheet absea#PP-171.
产品仅供科研与开发使用,不用于人体、动物、诊断或治疗。
危险品化学品经营许可证(带存储)