重组人MCM3AP蛋白:特性与应用
重组人MCM3AP蛋白:特性与应用
Recombinant Human MCM3AP Protein是一种研究级重组蛋白,靶向微小染色体维持复合物3相关蛋白(MCM3AP),该蛋白是参与DNA复制许可和染色质调控的关键乙酰转移酶。
- 蛋白名称
- 微小染色体维持复合物3相关蛋白(MCM3AP)
- 产品货号
- rp372295
- 物种来源
- 人(智人)
- 蛋白类型
- 重组蛋白
- 主要功能
- 乙酰转移酶活性;通过乙酰化MCM3调控DNA复制许可
- 主要研究领域
- DNA复制、染色质生物学、细胞周期调控
MCM3AP的生物学背景
MCM3AP(微小染色体维持复合物3相关蛋白),又称GANP(生发中心相关核蛋白),是由人类MCM3AP基因编码的多功能核蛋白。其最为明确的功能是作为乙酰转移酶,对MCM3进行乙酰化修饰。MCM3是MCM2–7复制解旋酶复合物的核心亚基,负责在复制起始位点执行DNA复制许可。
除参与DNA复制外,MCM3AP还与核内mRNA输出、生发中心B细胞分化及DNA损伤应答密切相关。其广泛参与基本核过程,使其成为癌症生物学、免疫学和细胞生物学等多个研究领域的重要靶标蛋白。
重组人MCM3AP蛋白的生化特性
重组人MCM3AP蛋白采用重组表达系统生产,可提供适用于体外生化及细胞生物学实验的研究级蛋白。由于MCM3AP是一种大型核蛋白,其重组生产面临相当大的挑战,研究人员在选择批次用于功能检测时,应充分考虑所采用的表达系统(如哺乳动物细胞、杆状病毒或细菌表达系统)。
收货后需核实的关键生化指标包括:纯度(通过SDS-PAGE评估)、生物活性(如乙酰转移酶活性检测)及内毒素水平(尤其当蛋白用于细胞实验时)。适当的储存条件(通常为–70°C,并避免反复冻融)对维持蛋白完整性和功能活性至关重要。
研究应用
重组人MCM3AP蛋白广泛应用于多种体外及细胞实验研究:
- 乙酰转移酶活性检测:作为酶源,用于研究MCM3乙酰化及其对复制许可的下游影响。
- 蛋白质相互作用研究:用于pull-down实验、共免疫沉淀对照及表面等离子共振,以绘制MCM复合物内的相互作用图谱。
- 抗体验证:在Western blotting和ELISA中作为阳性对照抗原,用于抗MCM3AP抗体的特性鉴定。
- 结构生物学:可作为底物或组分用于MCM复合物的冷冻电镜或X射线晶体学研究。
- 药物发现:作为潜在靶标蛋白,用于针对癌症研究中DNA复制通路小分子抑制剂的高通量筛选。
操作、储存与质量注意事项
为确保重组人MCM3AP蛋白在下游应用中的最佳性能,研究人员应遵循以下操作规范:
- 储存:收货后立即置于–70°C保存。冻存前分装为单次使用量,以减少反复冻融次数。
- 复溶:若为冻干品,按照产品说明书指示使用推荐缓冲液复溶。建议在4°C短暂平衡,而非室温,以减少聚集。
- 质量验证:在关键实验前,通过SDS-PAGE确认纯度,并使用经验证的抗MCM3AP抗体通过Western blot确认蛋白身份。
- 内毒素检测:用于细胞实验时,需确认内毒素水平符合实验要求(通常<1 EU/µg)。
请务必参阅随批次提供的具体产品说明书,了解确切规格、储存条件及推荐稀释比例。
常见问题
MCM3AP在人类细胞中的功能是什么?
MCM3AP主要作为乙酰转移酶发挥功能,对MCM2–7复制解旋酶复合物亚基MCM3进行乙酰化修饰,从而调控DNA复制许可。此外,它还参与mRNA核输出、B细胞生发中心反应及DNA损伤应答等过程。
重组人MCM3AP蛋白采用何种表达系统生产?
Aladdin Scientific重组人MCM3AP蛋白(货号:rp372295)所用的具体表达系统,请查阅产品说明书确认。大型核蛋白的常用表达系统包括哺乳动物细胞表达、杆状病毒/昆虫细胞表达系统及大肠杆菌表达系统,各系统在翻译后修饰和产量方面各有利弊。
如何储存重组人MCM3AP蛋白以维持其活性?
蛋白收货后应立即置于–70°C储存。强烈建议在冻存前将蛋白分装为单次使用量,以避免反复冻融导致蛋白变性和活性丧失。请参阅产品专属说明书,了解推荐储存缓冲液及稳定剂添加建议。
重组人MCM3AP蛋白能否用于抗体验证?
可以。重组人MCM3AP蛋白非常适合用作Western blotting和ELISA实验中的阳性对照抗原,用于验证抗MCM3AP抗体的特异性和灵敏度,在明确抗原的可控条件下进行抗体表征。
重组人MCM3AP蛋白是否适用于细胞实验?
重组人MCM3AP蛋白可能适用于细胞实验,但使用前必须确认内毒素水平在可接受范围内(通常低于1 EU/µg)。研究人员应查阅特定批次的质量检验报告(CoA),以确认内毒素及纯度指标。
参考文献
- Takei Y, et al. A novel nuclear protein, GANP, is associated with MCM3 that shows efficient transport from the cytoplasm to the nucleus. FEBS Lett. 2001.
- Kuwahara K, et al. GANP regulates mRNA export and is implicated in cellular senescence and B-cell differentiation. Mol Cell Biol. 2000.
- Bhatt DL, et al. General reference on minichromosome maintenance complex function in DNA replication licensing. Cell. (Textbook-level knowledge; specific citation requires verification).
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