不同类辅荧光素(Coelenterazine)类似物之间的差异
不同类辅荧光素(Coelenterazine)类似物之间的差异
引言
类辅荧光素的三种主要类似物分别为:类辅荧光素(Coelenterazine)、类辅荧光素h(Coelenterazineh)和类辅荧光素400a(Coelenterazine400a)。虽然它们都可以用于相似的实验,但根据具体应用的不同,有些类似物可能提供更佳的实验结果。
补充信息
类辅荧光素(Coelenterazine)(Aladdin目录号C131248)
通常被称为天然类辅荧光素(NativeCoelenterazine),是广泛使用的底物,适用于Renilla荧光素酶(Rluc)和Gaussia荧光素酶(Gluc)。其发射波长范围为460–470nm,广泛应用于:
· 活细胞中的钙离子检测
· 基因报告系统分析
· BRET(生物发光共振能量转移)研究
· ELISA实验
· 细胞中超氧阴离子的检测
类辅荧光素h(Coelenterazineh)(目前暂无供应)
在与Renilla或Gaussia荧光素酶一起使用时,类辅荧光素h的效果有限。然而,它在与钙激活光蛋白的体外实验中表现更佳。据报道,其发光强度是天然类辅荧光素的10到20倍,因此特别适用于检测钙离子浓度的微小变化。其发射波长同样位于460–470nm范围内。
类辅荧光素400a(Coelenterazine400a)(Aladdin目录号C332017)
此类似物是Rluc在BRET实验中的首选底物。类辅荧光素400a的发射波长位于390–400nm,能有效减少与GFP受体发光波长的重叠,从而降低干扰并提高能量转移测量的准确性。
参考文献
Thomson, C. M., Herring, P. J., & Campbell, A. K.(1998).
咪唑并吡嗪类荧光素的广泛存在及其在组织中的分布。《生物发光与化学发光杂志》,12(2), 87–91。
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