计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,分子生物学级,无菌 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
2-8°C储存,禁止冷冻。低温运输,禁止冷冻 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
LNP 原代免疫细胞 RNA 转染试剂盒是基于脂质纳米粒(LNP)技术研发的专门针对原代免疫细胞的新型即用型转染试剂,利用 LNP 独特的跨膜转运和内体逃逸机制,实现对 RNA 高效递送,适用于不同类型 RNA 在原代免疫细胞的体外转染。
易用:无需特定包封设备,一步混合即可实现 RNA-LNP 瞬时包封,无需孵育。
高效:微量样品的包封率可达 80%以上,实现对原代免疫细胞高效转染。
安全:本品采用新型生物可降解脂质材料,细胞毒性极低,且经 0.2μm 微孔滤膜过滤。
产品组分表
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运输与保存方法
受控常温(≤25℃)运输。2℃~8℃保存。不得冷冻!
适用范围
LNP原代免疫细胞 RNA 转染试剂盒适用于人或鼠原代免疫细胞的 RNA 转染,其中 RNA 类型包括siRNA、miRNA、gRNA 和 mRNA 等。
本产品仅供研究使用。
注意事项
(1)转染增强剂为冻干粉,开盖前请先离心,用 1×PBS 溶液制备成浓度 1μg/μL 的转染增强剂溶液,复溶后不得涡旋,根据使用需求进行分装,避免反复冻融。转染增强剂溶液-20℃可保存 3 个月, 2-8℃可储存 1 周。
如每孔转染增强剂用量较低,可在临用前将上述转染增强剂储存液用 1×PBS 溶液稀释至 0.1μg/μL,再加入细胞。
(2)RNA 原液的最佳溶剂为无酶水,且 mRNA 浓度不低于 200ng/μL、siRNA 浓度不低于 10μM,其他类型的溶剂对转染效果可能会有一定影响,具体情况可以联系我们。
(3)制备 RNA 预混液请确保使用试剂盒专用 Buffer 稀释 RNA 原液,不得使用 PBS 或培养基。
(4)请确保 RNA 预混液浓度为 40ng/μL。若多种 RNA 共转染,如 CRISPR Cas9 mRNA 与 gRNA 共转染,则 RNA 预混液浓度为 Cas9 mRNA + gRNA 的总浓度,Cas9 mRNA 与 gRNA 的推荐用量比为 1:1~1:2(μgmRNA:μggRNA)。
(5)RNA/LNP 的比例是 LNP 包封的关键因素,如需增减每孔用量,请按附录 A 和附录 B 项下注意事项进行调整。
(6)RNA-LNP 复合物在室温条件下可稳定存放 8 小时,请勿将 RNA-LNP 复合物置于冷冻条件。
(7)转染前后均无需更换细胞培养基,含有血清、双抗的完全培养基对转染效果无明显影响;转染 6h 以后可按细胞常规培养流程,进行换液或其他操作。
附录 A:原代免疫细胞 mRNA 转染操作说明
1. LNP原代免疫细胞 RNA 转染试剂盒操作流程

2. 不同培养容器中每孔试剂用量
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3.注意事项
(1) 转染增强剂的使用见正文“5. 注意事项”。
(2) 请确保 mRNA 原液的溶剂为无酶水,且浓度不低于 200ng/μL。
(3) 不得使用 PBS 或培养基稀释 mRNA 原液,请确保稀释得到的 mRNA 预混液浓度为 40ng/μL。
(4) mRNA-LNP复合物在室温条件下可稳定存放 8 小时,请勿将 mRNA-LNP复合物置于冷冻条件。
(5) 请注意 mRNA/LNP 的比例是 LNP 包封的关键因素,如需增减每孔 mRNA 用量,您可以按比例增加或减少加入细胞的每孔 mRNA-LNP复合物和转染增强剂的用量。
附录 B:原代免疫细胞 siRNA 转染操作说明
1. LNP原代免疫细胞 RNA 转染试剂盒操作流程
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2. 不同培养容器中每孔试剂用量
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3. 注意事项
(1)转染增强剂的使用见正文“5. 注意事项”。
(2)请确保 siRNA 原液的溶剂为无酶水,且浓度不低于 10μM。
(3)不得使用 PBS 或培养基稀释 siRNA 原液,请确保稀释得到的 siRNA 预混液浓度为 3pmol/μL(即 3μM)。
(4)siRNA-LNP复合物在室温条件下可稳定存放 8 小时,请勿将 siRNA-LNP复合物置于冷冻条件。
(5)请根据 siRNA 用量调整 LNP转染试剂用量。以 96 孔为例,如每孔 siRNA 用量>3pmol,可按比例增加每孔 siRNA-LNP复合物的体积。例如:每孔需加入 6pmol siRNA,仅需取 4μL 上述 siRNA-LNP复合物,和 0.08μg 转染增强剂加入细胞即可。
如每孔 siRNA 用量<3pmol,转染试剂用量应维持在 1μL/孔,仅需对应调整 siRNA 预混液的浓度,其他操作维持不变。例如:每孔需加入 1.5pmol siRNA,仅需调整 siRNA 预混液浓度为 1.5μM 即可。
附录 C:人原代 T 细胞活化、扩增参考方案
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注意事项
(1)原代 T 细胞培养也可使用有血清培养基。
(2)如使用 T 细胞激活剂活化人原代 T 细胞,具体活化方案请参考所用 T 细胞激活剂说明书。
(3)请尽量在细胞活化后一周内完成细胞转染实验。
(4)使用 24 孔板进行时,推荐的细胞密度为 2-5×105cells/孔。
(5)请确保转染前 CD25 表达水平不低于 80%,这对 RNA-LNP复合物成功递送到 T 细胞至关重要。
是否无菌:是
我们的级别选择指南涵盖了目录中所有的变体的纯度、稳定剂状态和应用适用性。
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