EnzymoPure™ 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
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在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
产品组成
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产品简介
快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在 5~15 分钟内精确完成 DNA 切割的限制性内切酶，适用于质粒 DNA、 PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。快速内切酶具有如下特点：5~15 分钟内即可完成酶切；共用一种酶切 Buffer，大大简化酶切反应体系；良好的酶活冗余度，轻松应对底物过量或困难模板酶切。此外，去磷酸化、连接试剂在 酶切 Buffer 中具有 100% 活性，支持一管化反应，提升“酶切 - 修饰 - 连接” 的体验。
建议反应条件
1× 缓冲液；
37℃温育；
参照“DNA 快速酶切流程”配制反应体系。
失活条件
80℃温育 20 min。
质量控制
功能活性检测：最适反应温度下，在 20 μl 反应体系中，1 μl 快速内切酶FspI 能够在 15 min 内完全消化 1 μg λDNA。
超长时间温育检测：最适反应温度下，将 1 μl 快速内切酶FspI 与 1 μg λDNA 共同温 育 3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，延时酶切可能出现星号活性。
酶切 - 连接 - 再酶切检测：最适反应温度下，使用 1 μl 快速内切酶 FspI 消化底物，回收酶切产物。在 22℃下使用适量 Fast T4 DNA Ligase 可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
使用方法
1. DNA 快速酶切流程
① 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系：
| 质粒DNA | PCR产物 | 基因组DNA | |
| ddH₂O | 15μl | 16μl | 30μl |
| 10×Buffer或10×Color Buffer | 2μl | 3μl ᵃ | 5μl |
| 底物DNA | 2μl(up to 1μg) | 10μl(~0.2μg) | 10μl(5μg) |
| FspI | 1μl | 1μl | 5μl |
| Total | 20μl | 30μl | 50μl |
a. 本体系适用于经过纯化的 PCR 产物酶切。未纯化的 PCR 产物具备一定的离子强度，10× Buffer 加入量可适当减少至 2 μl。但由于 DNA 聚合酶同时具有外切酶活性，会影响酶切产物，因此如下一步需进行克隆等操作，建议酶切前对 PCR 产物进行纯化。
② 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴；
③ 37℃温育 15 min（质粒），或 15~30 min（PCR 产物），或 30~60 min（基因组 DNA）；
④ 80℃温育 20 min 即可使酶失活，停止反应（可选）。
2. 双酶切或多酶切
① 每种快速内切酶的用量为 1 μl，并根据需要适当扩大反应体系；
② 所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的 1/10；
③ 如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，在其最适反应温度下进行酶切反应。
3. 适用于质粒的扩大反应体系
| DNA | 1μg | 2μg | 3μg | 4μg | 5μg |
| FspI | 1μl | 2μl | 3μl | 4μl | 5μl |
| 10×Buffer或10×Color Buffer | 2μl | 2μl | 3μl | 4μl | 5μl |
| Total | 20μl | 20μl | 30μl | 40μl | 50μl |
注：如果总反应体系大于 20 μl，应适当增加温育时间，尽量使用水浴、金属浴或沙浴。
不同 DNA 中的酶切位点数量
甲基化修饰影响
危险品化学品经营许可证（带存储）