黏蛋白染色液 (温和甲基化法)

货号: M1508670
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级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 生物染色剂 ? 生物染色剂级 —— 经表征用于细胞和组织染色的染料。适用于注重染色一致性的组织学和显微镜检查。 用于显微镜 ? 显微镜级 —— 适用于样品制备和成像的试剂/染料。适用于需要清晰度和低背景的显微镜检查。
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2×50ml
M1508670-2×50ml
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为什么选择此级别

BioReagent,生物染色剂,用于显微镜 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

2-8°C储存,避光,室温。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

黏液物质染色有多种方法,如AB-PAS染色、黏液HID-AB染色、标准阿利新蓝染色等,以上方法大多是利用阿利新蓝 (Alcian)属于阳离子染料可与酸性基团结合,也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物这一原理。

黏蛋白染色液 (温和甲基化法)属于化学修饰和阻断法的一种,其原理是利用含酒精的碱性溶液裂解耐酶唾液酸中的O-乙酰基,O-乙酰基的去除及唾液酸侧链羟基的形成恢复了唾液酸对PAS的反应性;Alcian染色液pH值为2.5时组织内的羧基电离,带有一个负电荷,与阿利新蓝中的阳离子形成盐键,使带有羧基的组织 (如蛋白多糖/透明质酸以及上皮酸性黏蛋白)染色,主要用于鉴别黏蛋白中的酸性基团。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

自备材料:

1、系列乙醇、蒸馏水、去离子水、二甲苯或环保脱蜡透明液、封片胶

2、恒温箱、显微镜


操作步骤(仅供参考):

1、两张阳性对照片和两张实验切片均脱蜡至水。

2、将一张阳性对照片和一张实验片入酸性甲醇溶液,37℃孵育4h;另外的一张阳性对照片和一张实验片仅用去离子水37℃孵育4h。流水冲洗5min。

3、Alcian染色液染色15-30min。流水冲洗。

4、梯度乙醇脱水,二甲苯或脱蜡透明液透明,中性树胶封片。


染色结果:

未处理的硫酸黏蛋白、硫酸蛋白多糖、唾液粘蛋白、透明质酸: 蓝色

处理后的切片: 淡蓝色

注:处理后的残存的任何颜色都是由于存在硫酸黏蛋白和 (或)硫酸蛋白多糖。


注意事项:

1、处理时间超过4h有可能导致硫酸根水解。

2、需要阳性对照片以便验证甲基化程序的有效性。

3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



There are various methods for staining mucous substances, such as AB-PAS staining, mucin HID-AB staining, and standard Alcian blue staining. Most of these methods rely on the principle that Alcian blue, a cationic dye, can bind to acidic groups-specifically, Alcian blue forms insoluble complexes with anionic groups (e.g., carboxyl groups and sulfate groups) present in tissues.


Mucin Staining Solution (Mild Methylation Method) belongs to the category of chemical modification and blocking methods. Its principle is to use an alcohol-containing alkaline solution to cleave the O-acetyl groups in enzyme-resistant sialic acid. The removal of O-acetyl groups and the formation of hydroxyl groups on the side chains of sialic acid restore the reactivity of sialic acid to PAS staining. When the pH value of Alcian staining solution is 2.5, the carboxyl groups in tissues undergo ionization and carry a negative charge, forming salt bonds with the cations in Alcian blue. This enables the staining of tissues containing carboxyl groups (e.g., proteoglycans/hyaluronic acid and epithelial acidic mucins), and the solution is mainly used to identify acidic groups in mucins. This reagent is for research use only and not intended for clinical diagnosis or other purposes.


Materials to Be Prepared by the User

1. Graded ethanol solutions, distilled water, deionized water, xylene or environmentally friendly dewaxing-clearing solution, mounting medium

2. Incubator, microscope


Operating Procedures (For Reference Only)

1. Dewax two positive control sections and two experimental sections to water.

2. Place one positive control section and one experimental section in Acidic Methanol Solution and incubate at 37℃ for 4 hours; incubate the remaining one positive control section and one experimental section in deionized water at 37℃ for 4 hours only. Rinse with running water for 5 minutes.

3. Stain with Alcian Staining Solution for 15-30 minutes. Rinse with running water.

4. Dehydrate with graded ethanol solutions, clear with xylene or dewaxing-clearing solution, and mount with neutral gum.


Staining Results

Untreated sulfated mucins, sulfated proteoglycans, sialomucins, and hyaluronic acid: Blue

Treated sections: Light blue

Note: Any residual color in the treated sections is due to the presence of sulfated mucins and/or sulfated proteoglycans.


Precautions

1. Incubation time exceeding 4 hours may cause hydrolysis of sulfate groups.

2. Positive control sections are required to verify the effectiveness of the methylation procedure.

3. For your safety and health, wear a lab coat and disposable gloves during operation.

规格

别名
黏蛋白染色液
英文别名
Mucin Staining Solution
规格或纯度
BioReagent,用于显微镜,生物染色剂
英文名称
Mucin staining solution (mild methylation method)
应用
组织染色
检测波长
0
敏感性
Light-sensitive
检测时长
0
样本体积
0
储存与运输
储存条件
2-8°C储存,避光,室温
运输条件
低温运输
稳定性与储存
各组分在相应的储存条件下保质期1年。
组分与储存
M1508670
Component2×50 mLStorage
M1508670A酸性甲醇溶液50 mLRT.
M1508670BAlcian染色液50 mL2-8℃. Store in the dark.

技术文档

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F0131589 分析证书 M1508670
ZJ26F0131588 分析证书 M1508670
技术文档和文章
溶液计算器

常见问题

本产品应如何储存?
请于2–8 °C、避光条件下保存。本品对光敏感,请保存在原始的避光或棕色容器中。
什么是「生物染色剂」?
「生物染色剂」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
什么是「BioReagent」?
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品如何运输?
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。