计算溶液所需的质量、体积或浓度。
间充质干细胞无血清培养基 (含酚红)
有货
为什么选择此级别
BioReagent,无菌过滤,用于细胞培养 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
2-8°C储存。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
间充质干细胞无血清培养基是一款无血清、无异源成分的培养基，用 于多种来源(即骨髓、脂肪组织、脐带组织和牙髓) 间充质干细胞的原代分离及传代培养，具 备保持间充质干细胞的多谱系分化潜能及维持其良好的增殖速率的特性。
产品用途
适用于多种来源人间充质干细胞的生长和扩增。
使用方法
MSC 无血清完全培养基配制： 将干细胞培养基添加剂在 2-8℃完全融化，按 1:20 的比例加入到 MSC 无血清基础培养基中， 混合均匀，即为人间充质干细胞完全培养基，4℃保存，2 周内使用。原代（P0）分离时建议 使用青链双抗避免污染。
原代间充质干细胞分离（组织块法）
1. 手术台上取正常健康新生儿脐带，浸泡于含双抗的无菌生理盐水或 PBS 中常温或 4℃保 存；
2. 超净台内取出脐带，用生理盐水或者 PBS 洗去脐带残留血液，剪成 3-4cm 小段；
3. 用生理盐水或者 PBS 再次清洗，用组织镊去除脐带中的 2 条脐动脉；
4. 沿脐静脉将脐带剪开，用组织镊刮去静脉，放入生理盐水或者 PBS 中洗涤 2-3 次，剪成 1.5mm 左右大小。
5. 将剪好买的组织块均匀铺于培养皿中，间隔 5mm 左右。
6. 放置 5-10 分钟后，根据所选培养容器添加相应量的培养基，放置于 37℃、5%CO2 培养 箱中培养；
7. 培养 3 天后，镜下观察有无细菌污染，进行半量换液；
8. 细胞培养至 7-10 天可见长梭形细胞从组织块内爬出，7 天进行全换液，培养至 12-15 天可见大量细胞爬出，此时爬出的细胞记为 P0；
9. 待组织块周边细胞密度达到 80%-90%左右时，重组胰酶消化细胞进行传代；
10. 传代后的细胞记为 P1，以此类推。
人间充质干细胞传代与冻存
1. 待细胞融和度达到约 80%后进行传代(细胞不能太密集，否则容易分化)，吸弃瓶中的培 养基，加适量 DPBS 轻轻冲洗 1 次；
2. 根据培养瓶适量加入温和型细胞消化液，T175 建议使用 3-5ml，在室温作用 1-3min (可轻拍培养瓶帮助细胞脱落)。
3. 显微镜下观察细胞完全脱落后，用移液器轻轻吹打细胞，使细胞完全脱落，然后 1000 rpm 离心 3-5min。
4. 谨慎吸出上清，细胞团块用适当体积的完全培养基悬浮后，混匀细胞悬液。
5. 按照 6000-8000cells/cm² 的细胞密度将细胞接种至 T175 培养瓶中加入 25ml 细胞悬 液，使其均匀的铺在培养瓶底部，放入 37℃, 5% CO2 培养箱内培养。
6. 每 2-3 天更换一次培养基，待细胞融合度达到 80%左右时，进行细胞传代操作或者收获 细胞进行细胞冻存操作。
细胞冻存
将细胞团块悬浮于适量无血清干细胞专用冻存液中，冻存液 重悬细胞密度为 5×10⁵-5 ×10⁶cells/ml；
装入冻存管，-80℃冰箱放置 24h，转入液氮罐 中长期冻存。
间充质干细胞复苏
1. 人间充质干细胞完全培养基提前预热，在生物安全柜或超净台中吸取适量（如 T75 瓶： 10-15mL)完全培养基沿上表面加入间充质干细胞培养瓶中，切勿冲到细胞培养瓶底面。 然后慢慢将细胞培养瓶平放，在 37℃、恒温 CO2培养箱中放置 5-10 分钟后使用。可 让培养基中的促贴壁物质更好地与细胞培养瓶底部结合，使间充质干细胞的贴壁能力增 强，降低“生长空洞”出现的概率。
2. 从液氮中取出冻存的间充质干细胞，迅速将冻存管放入 37℃水浴中，快速融解。
3. 用 70%-75%酒精消毒冻存管外壁，在生物安全柜或超净台中打开冻存管，将细胞悬液 缓慢移入装有 5-10mL 完全培养基的离心管中。
4. 1200rpm 离心 5min，弃上清，加入 2mL 完全培养基重悬细胞，计数，按密度 6000- 8000 cells/cm²将细胞接种至步骤 1 中孵育完的细胞培养瓶中，添加细胞时细胞悬液直 接加到底部，切忌冲到细胞培养瓶底面。
5. 轻轻摇晃细胞培养器瓶，使细胞均匀分布，混匀后，置于 37℃、5%CO2、饱和湿度的培 养箱中静置培养。
6. 2-3 天后，更换新鲜的完全培养基。
注意事项
1. 干细胞培养基添加剂在 2-8℃解冻，避免反复冻融，建议分装后于-20℃冰箱避光保存。
2. 本产品启封前若有少量细小的凝聚物，是培养基成分的析出，属于正常现象，可轻轻混匀 后使用；
3. 使用本产品时应严格按照无菌操作的规程进行操作。
保存条件
MSC 无血清基础培养基 2-8℃避光保存，有效期 12 个月。
声明
仅用于科研使用，不能用于临床诊断和治疗。
Mesenchymal Stem Cell Serum-Free Medium is a serum‑free, xeno‑free medium designed for the primary isolation and subculture of mesenchymal stem cells (MSCs) derived from various sources (e.g., bone marrow, adipose tissue, umbilical cord tissue, and dental pulp). It maintains the multi‑lineage differentiation potential of MSCs while supporting their robust proliferation rate.
Product Application
Suitable for the growth and expansion of human MSCs from multiple sources.
Instructions for Use
Preparation of MSC Serum‑Free Complete Medium:
Thaw the stem cell culture supplement completely at 2–8 °C. Add it to the MSC serum‑free basal medium at a ratio of 1:20, and mix thoroughly to obtain complete human MSC medium. Store at 4 °C and use within 2 weeks. For primary (P0) isolation, it is recommended to add penicillin‑streptomycin (dual antibiotics) to prevent contamination.
Primary Isolation of MSCs (Tissue Explant Method)
1.Collect normal healthy neonatal umbilical cord during surgery and immerse it in sterile physiological saline or PBS containing dual antibiotics, store at room temperature or 4 °C.
2.In a laminar flow hood, remove the cord and wash off residual blood with saline or PBS, then cut it into 3–4 cm segments.
3.Wash again with saline or PBS, and use tissue forceps to remove the two umbilical arteries from the cord.
4.Open the cord along the umbilical vein, scrape away the venous tissue with forceps, wash the remaining tissue 2–3 times in saline or PBS, and cut into pieces of about 1.5 mm.
5.Evenly distribute the minced tissue pieces onto a culture dish, leaving gaps of about 5 mm between them.
6.After letting stand for 5–10 min, add an appropriate volume of medium according to the culture vessel used, and place in a 37 °C, 5 % CO₂ incubator.
7.After 3 days of culture, check under a microscope for bacterial contamination and perform a half‑volume medium change.
8.Within 7–10 days of culture, spindle‑shaped cells will begin to migrate out of the tissue explants. Perform a full medium change at day 7. By days 12–15, a large number of cells will have migrated out; these cells are designated as P0 (primary).
9.When the cell density around the explants reaches about 80–90 % confluence, dissociate the cells with recombinant trypsin for subculture.
10.The cells after the first passage are designated P1, and so on.
Subculture and Cryopreservation of Human MSCs
1.Subculture when cell confluence reaches approximately 80 % (avoid over‑confluence, which may induce differentiation). Aspirate the medium, and rinse gently once with an appropriate volume of DPBS.
2.Add a gentle cell dissociation solution according to the flask size (e.g., 3–5 mL for a T175 flask) and incubate at room temperature for 1–3 min (tap the flask gently to help detach cells).
3.Under a microscope, confirm that cells have completely detached, then gently pipette to break up clumps. Centrifuge at 1000 rpm for 3–5 min.
4.Carefully aspirate the supernatant, resuspend the cell pellet in an appropriate volume of complete medium, and mix well.
5.Seed the cells at a density of 6000–8000 cells/cm² into a T175 flask containing 25 mL of cell suspension. Gently rock to distribute evenly, then place in a 37 °C, 5 % CO₂ incubator.
6.Replace the medium every 2–3 days. When confluence reaches about 80 %, subculture or harvest the cells for cryopreservation.
Cryopreservation
Resuspend the cell pellet in an appropriate volume of serum‑free, stem cell‑specific cryopreservation medium to achieve a final density of 5×10⁵–5×10⁶ cells/mL.
Transfer the suspension into cryovials, place them in a –80 °C freezer for 24 h, then transfer to liquid nitrogen for long‑term storage.
Thawing of MSCs
1.Pre‑warm the complete human MSC medium. In a biosafety cabinet or laminar flow hood, pipette an appropriate volume (e.g., 10–15 mL for a T75 flask) of complete medium along the upper surface of the culture flask, avoiding direct contact with the bottom surface. Then gently lay the flask flat and place it in a 37 °C, CO₂ incubator for 5–10 min before use. This allows the attachment‑promoting substances in the medium to coat the bottom, enhancing MSC adhesion and reducing the occurrence of "growth voids."
2.Remove the cryovial from liquid nitrogen and quickly thaw it in a 37 °C water bath.
3.Disinfect the outer surface of the cryovial with 70–75 % ethanol. In a biosafety cabinet, open the vial and slowly transfer the cell suspension into a centrifuge tube containing 5–10 mL of pre‑warmed complete medium.
4.Centrifuge at 1200 rpm for 5 min, discard the supernatant, and resuspend the cell pellet in 2 mL of complete medium. Count the cells and seed them at 6000–8000 cells/cm² into the culture flask that was pre‑incubated in step 1. When adding the cells, dispense the suspension directly onto the bottom surface—do not flush against the bottom.
5.Gently rock the flask to distribute the cells evenly. Place the flask in a 37 °C, 5 % CO₂ incubator with saturated humidity for static culture.
6.After 2–3 days, replace with fresh complete medium.
Precautions
1.Thaw the stem cell culture supplement at 2–8 °C. Avoid repeated freeze‑thaw cycles; it is recommended to aliquot and store at –20 °C in the dark.
2.If minor fine precipitates appear before opening, this is normal due to medium component precipitation; mix gently before use.
3.Strictly follow aseptic techniques when using this product.
Storage Conditions
MSC serum‑free basal medium: store at 2–8 °C, protected from light. Shelf life: 12 months.
Statement
For research use only. Not for clinical diagnosis or therapeutic use.
规格
规格或纯度
无菌过滤, BioReagent, 用于细胞培养, 内毒素＜0.3 EU/mL; 渗透压290-310 mOsm/kg
稳定性与储存
Store at 2-8℃ long term (12 months). Store in the dark.
英文名称
MSC Serum-Free Medium (with Phenol Red)
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液
技术文档
高级数据
产品属性
| pH | 7.3-7.7 |
|---|
化学和物理性质
敏感性
Light sensitive
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA，每批产品都进行了严格的验证，您可放心使用！
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ26F0938971 |
分析证书 | M1525782 |
技术文档和文章
溶液计算器
常见问题
什么是「无菌过滤」？
「无菌过滤」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。
什么是「BioReagent」？
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品应如何储存？
请于2–8 °C条件下保存。需冷藏保存以维持规定的有效期。
本产品如何运输？
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA？
每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。
需要帮助选择级别？
我们的级别选择指南涵盖了目录中所有的变体的纯度、稳定剂状态和应用适用性。
查看 Sterile-filtered 级别指南 → 查看 BioReagent 级别指南 → 查看 for Cell culture 级别指南 →产品仅提供给经过验证的企业、机构和合格的专业人员用于研发。不适用于人类、动物、诊断或治疗。
Copyright © 2023至今 上海阿拉丁生化科技股份有限公司 保留所有权利。
危险品化学品经营许可证（带存储）