计算溶液所需的质量、体积或浓度。
,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
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在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
N-羟基琥珀酰亚胺活化聚乙二醇(PEG-NHS)是可与氨基(-NH2)发生反应的活性聚乙二醇衍生物,适用于修饰蛋白质、多肽以及其他带有游离氨基的材料表面。 琥珀酰亚胺酯基团可在 pH 7~8.5 条件下与伯氨基发生反应,生成稳定的酰胺键。 相较于其他普通 PEG 琥珀酰亚胺酯衍生物,本款琥珀酰碳酸酯型甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯(mPEG-SC)具备更优异的反应活性,且在水溶液中稳定性更强。 琥珀酰亚胺酯仅能与去质子化伯胺发生偶联,因此该反应体系需维持中性至弱碱性环境才能顺利进行。伯氨基通过亲核进攻与 NHS 酯结合,反应副产物为游离 NHS。 水溶液中 NHS 酯的水解会与氨基偶联反应形成竞争关系,且 pH 越高,水解速率越快。
N-hydroxylsuccinimide (NHS) functionalized polyethylene glycol (PEG-NHS) is an amino (-NH2) reactive PEG derivative that can be used to modify protein, peptide or any other surfaces with their available amino groups. NHS esters react with primary amine groups at pH 7~8.5 to form stable amide bonds.Compared to other PEG NHS ester derivatives, our succinimidyl carbonate (SC) functionalized mPEG-NHS offers superior reactivity and higher stability in aqueous solution. NHS esters react with deprotonated primary amines, therefore, the reaction requires neutral to basic pH values to proceed. Primary amines react with NHS esters by nucleophilic attack and NHS is released as a byproduct. Hydrolysis of the NHS-ester competes with the reaction in aqueous solution and increases with increasing pH.
一般情况下,NHS PEG 摩尔过量 10 至 50 倍于含胺材料的量就能充分缀合。
所需材料
反应步骤:
将目标材料溶解在共轭缓冲液中。估计目标材料上伯胺基团的浓度。向目标共轭材料中加入 NHS PEG 原液,最终浓度至少为 10 mg/mL。最佳共轭需要 10~50 摩尔过量的 PEG NHS;将混合物在室温下搅拌 30~60 分钟或在 40C下搅拌 2 小时。共轭物可通过尺寸排阻色谱法或透析法纯化。