细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒

Name: 细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒
SKU: N778382
Availability: InStock

概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器常见问题

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为什么选择此级别

BioReagent,for western blot,哺乳动物样品抽提用,用于蛋白分析级，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

产品介绍：

细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒 (Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit) 提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白与浆蛋白的方法。约90分钟就可以完成培养细胞的核蛋白与浆蛋白的分离。抽提得到的蛋白为非变性、有活性的，可以用于Western、EMSA、footprinting、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。

本试剂盒的抽提原理是，通过CER A和CER B在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀后破坏细胞膜，释放出浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的NER抽提得到核蛋白。

对于细胞样品，本试剂盒可以抽提50个，数量为2×10⁶个Hela细胞（约40mg）的样品；对于组织样品，如果每个样品的重量不超过30mg，本试剂盒可以抽提50个样品，如果每个样品约为30-60mg，本试剂盒大约可以抽提37个样品。可根据需要按比例放大或缩小提取规模。

组分表

N778382	Component	50T	Storage
N778382A	Cytoplasmic Extraction Reagent A (CER A)	15 mL	-20℃
N778382B	Cytoplasmic Extraction Reagent B (CER B)	0.5 mL	-20℃
N778382C	Nuclear Extraction Reagent (NER)	2.5 mL	-20℃

使用说明：

准备溶液：室温融解试剂盒中的三种试剂，溶解后立即放置在冰上，混匀。取适量的 CER A和NER备用，分别在需要加入前数分钟内加入PMSF至终浓度为1mM。如果目标蛋白含丰富的半胱氨酸，可在CER A、NER中加入DTT至终浓度0.5mM。

1、对于贴壁细胞：用 PBS 洗一遍，用细胞刮刀刮下细胞，或用EDTA溶液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打细胞（尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解需抽提的目的蛋白）。500g离心2-3分钟，尽可能吸弃上清，留下细胞沉淀备用。接步骤4。

2、对于悬浮细胞：用PBS洗一遍，500g离心2-3分钟，尽可能吸弃上清，留下细胞沉淀备用。接步骤4。

3、对于新鲜组织：

方法1：把组织尽可能切成非常细小的碎片。在 PBS 里面匀浆制成细胞悬液，500g 离心 2-3 分钟，弃上清，估计细胞沉淀体积，接步骤4。

方法2：把组织称重后，把组织尽可能切成非常细小的碎片，按照每50mg组织加入500μl 的比例加入 CER A，匀浆后把匀浆液转移到塑料离心管内，接步骤 5。(在步骤 7 按照每 200μl CER A加10μl比例加入CER B。)

4、每20μl细胞沉淀加入200μl添加了PMSF的CER A。(对于2×10⁶个Hela细胞，其细胞沉淀的体积大约为20μl或40mg。)

5、最高速剧烈 Vortex 5 秒，把细胞沉淀完全悬浮并分散开。(如果细胞沉淀没有完全悬浮并分散开，可以适当延长Vortex时间。)

6、冰浴10-15分钟。

7、加入CER B 10μl。最高速剧烈Vortex 5秒，冰浴1分钟。

8、最高速剧烈Vortex 5秒，4℃ 14,000-16,000g离心5分钟。

9、立即吸取上清至一预冷的离心管中，即为抽提得到的细胞浆蛋白。可以立即使用，也可以-70℃冻存。(千万不要触及沉淀，可在沉淀上方保留极小体积的上清，以免触及沉淀。)

10、对于沉淀，完全吸尽残余的上清，加入50μl添加了PMSF的NER。(不吸尽上清会污染有细胞浆蛋白。)

11、最高速剧烈 Vortex 15-30 秒，把细胞沉淀完全悬浮并分散开。然后放回冰浴中，每隔 1-2 分钟再高速剧烈Vortex 15-30秒，共30分钟。

12、4℃ 14,000-16,000g离心10分钟。

13、立即吸取上清至一预冷的塑料管中，即为抽提得到的细胞核蛋白。可以立即使用，也可以-70℃冻存。

注意事项

1、需自备PMSF，PMSF一定要在抽提试剂加入到样品前 2-3 分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。

2、抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。所用试剂都需要预冷或者即融，保证操作过程中的低温环境。

3、对于组织样品，本试剂盒仅适合于新鲜组织，对冻存过的组织抽提效果较差。可以抽提的组织样品数通常不足50个。

4、使用本试剂盒抽提得到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白都可以直接用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。

5、为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。

规格

别名

核蛋白与胞浆蛋白抽提试剂盒

规格或纯度

BioReagent, 用于蛋白分析, for western blot, 哺乳动物样品抽提用

英文名称

Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit

应用

储存与运输

储存条件

-20°C储存

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

Store at -20℃ long term (12 months).

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

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找到1个结果

批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F0723936	分析证书	N778382

技术文档和文章

n778382_细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒产品说明书.pdf

用于蛋白分析

目录：阿拉丁试剂的规格、级别和纯度

探索主题:

用于蛋白分析

For Protein Analysis

目录：阿拉丁试剂的规格、级别和纯度

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For Protein Analysis

溶液计算器

摩尔浓度计算器

计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

浓度

体积

分子量

g/mol

稀释计算器

计算配制储备溶液所需的稀释度。

浓度1（C1）

体积 1 (V1)

浓度 2 (C2)

体积 2 (V2)

复溶计算器

复溶计算器允许您快速计算试剂的体积，以复溶小瓶。只需输入试剂的质量和目标浓度，计算器将确定其余部分。

体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

所需的复溶浓度

常见问题

什么是「哺乳动物样品抽提用」？

「哺乳动物样品抽提用」表示该产品经过加工和检测，适用于提取工作流程和微生物学。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。

什么是「BioReagent」？

「BioReagent」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。

本产品应如何储存？

请于?20 °C条件下保存。需冷冻保存以维持规定的有效期。

本产品如何运输？

本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。

如何获取批次专用COA？

每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。

需要帮助选择级别？

我们的级别选择指南涵盖了目录中所有的变体的纯度、稳定剂状态和应用适用性。

查看 BioReagent 级别指南 → 查看 Suitable for mammalian cell and tissue extract 级别指南 → 查看 for Protein analysis 级别指南 → 查看 for Western blot 级别指南 →

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