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植物组织培养抗菌保护剂 (PPA)
有货
为什么选择此级别
BioReagent,无菌 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
2-8°C储存。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
是否无菌：是
植物组织培养抗菌保护剂 (PPA) 是一种广谱抗微生物剂，可以杀死细菌和真菌细胞，防止真菌孢子的萌发，并在较高浓度下能消除内源性污染的外植体。研究表明PPA活性成分可以穿透真菌或细菌细胞壁，抑制柠檬酸循环和电子传递链等中心代谢循环中的关键酶的活性，并且可以抑制培养基中的单糖和氨基酸向真菌和菌细胞的运输。PPA能有效地抑制植物细胞和植物组织培养中的通过空气、水、人传播的微生物污染及内源性污染，而不会影响体外种子发芽、愈伤组织增殖和愈伤组织的再生。
使用简介：
(以下使用指南是针对大多数情况下的常规使用说明，特殊情况可做适当调整。)
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使用方法：
(以下所述的操作流程是通用的，可能需要根据待处理的定物种稍作改动。)
1. 含有PPA的培养基可以在超净台外面分装，即无需无菌操作，等琼脂凝固后把盖子盖好。如果用泵来分装培养基，建议在分装前后先用高压灭菌处理的热水清理导管/软管。
2. 如果储存在无菌容器或在此之前储备液未受污染，含PPA的热敏感或热稳定的液体培养基无需经微孔滤膜或高压灭菌处理。但是对于含有200mg/L或更多氨基酸或蛋白质的富集培养基，建议加入PPA后用滤膜过滤处理。
3. 超争工作台里的器具 (镊子或解剖刀) 无需在火焰上烧，只要定期地在70%酒精里蘸一下即可。超净工作台无需验证，可以在超争工作台外面的干净台面上操作，不超过一小时即可。
4. PPA溶液呈酸性，pH 5-7，需保存在4℃。低接种密度下推荐工作剂量 0.05-0.2% (v/v)，可在灭菌前或灭菌后加入培养基，防止通过空气传播污染或内源性污染。处理内源性污染或获得无农杆菌的植物材料需要高剂量的PPA。
5. 对于一些常规情况下表皮上被大量细菌或真菌孢子污染的种子来说，PPA的抗菌效率可能比较弱。对于体外萌发实验，种子应该按照传统的方法先用漂白剂进行表面消毒。因此，在含有PPA的萌发培养基里，在一个非灭菌的容器中种子可以在自来水下冲洗然后在超净台中吹干。如果所使的器具末端接触到活性细菌、真菌组织或其它怀疑被污染的东西，这些器具应该通过高压或电子加热设备进行灭菌。
6. 一般剂量水平：除了内源性污染以外，推荐剂量是：0.05-0.2%。对于愈伤增殖、器官形成和还形成，推荐的剂范围是0.05-0.075%。低接种密度或者处理慢生长的细菌条件下，在培养基灭菌前或灭菌后加入此剂量的PPA，可防止空气传播的污染和内源性污染。要消除更高密度的内源性污染，需要增加PPA的剂量 (参考7-内源性污染)。
7. 内源性污染
(注意：以下从第7条(b)到第10条内容用于观赏植物。)
a) 对于外植体：以1cm (更短) 外植体为例，添加4~5% PPA到完全MS基础盐中，不要添加Tween 20和pH调整剂，搅拌4~12小时之后直接拿出。不用清洗，直接插入含有PPA的培养基里，若是草本植物换至0.05~0.1% PPA的萌发培养基即可；而木本植物则换至0.2% PPA的萌发培养基。
b) 对于块茎，球茎和鳞状物：把整个块茎/球茎/鳞状物在漂白剂里摇晃或搅拌。然后用水洗 (可以在非无菌条件下操作)。把块茎/球茎切成小片，在含有4-5% PPA的全基盐中摇晃或搅拌12-24h，不要加pH调整剂和Tween 20。不用冲洗直接插入到含有0.1~0.2% PPA的培养基中。
8. 如果按照以上操作流程没有取得满意的结果 (尤其是厚的和非常密集的外植体、种子)，建议按照以下流程：
a) 在水中摇晃或搅拌外植体 (较软的组织1h，较坚硬的组织2h)；
b) 在含有50% PPA的完全MS基盐中 (不加pH调整剂和Tween 20) 摇晃或搅拌5-10min。
c) 无需冲洗，直接把处植体插入到培养基中。如果真菌污染，可以选择额外再加入PPA到培养基中。然而，对于细菌或混合污染，第一个月在培养基中加入0.05-0.2%的PPA是必要的。不要丢弃高度氧化的外植体，因为大约50%的外植体在4-6周内即可恢复正常。
9. 为了消除“组培中”污染的植物材料 (抢救措施)：
注意：仅适合明显观察到受污染不超过一周的组织。
a) 在自来水细水流下面用牙刷洗材料。在含有50% PPA (用灭菌水稀释) 中摇晃或搅拌5-15min。对于细菌或混合污染，我们建议用低pH值2.8-3.2的溶液，即100% PPA与0.6g/L的柠檬酸溶液 (用灭菌水) 按1:1混合。
b) 不用冲洗直接把处理好的材料插入到含有0.05-0.2% PPA的培养基里，培养至少一个月。前10天弱光培养，如上所提，不要丢弃高度氧化的外植体，等4-6周以后将约有50%的材料恢复。
对于真菌孢子或细菌位于外植体极深的部位，而PPA无法接触到的情况，需要把材料在水中浸泡一段时间，然后沿着外植体切片，在50% PPA中摇晃或搅拌5-15min。通过以上消毒步骤，保证PPA能够充分接触到外植体的整个表面。
10. 去除农杆菌：共培养之后，用水冲洗叶盘。然后把转染的叶盘在含有100% PPA的完全基础盐中蘸 (整个叶盘) 约2min。用两张无菌纸巾吸干放到含有常用抗生素的培养基上。三周后，转到只含有0.05-0.075% PPA的培养基上。
注意事项：
1. 采用PPA消毒后首次转移的材料，我们建议把外植体完全地插入半固体培养基中。
2. 50% PPA溶液能重复利用大约5-10次。重复利用的次数取决于所处理外植体的体积和接种密度。保存50% PPA在4°C以延长它的活性。如有必要，准备两种PPA消毒液：一种是灭菌内源性污染，第二种是灭菌“组培中”的污染。用第二种消毒溶液处理料后都要用0.2μm的滤膜滤灭，滤灭过程可以非无菌条件下完成。一个滤器能用于溶液灭的整个过程。
3. 如果用50% PPA处理材料效果仍不佳，可以用100% PPA。处理方法跟50% PPA相似，但处理时间不要超过10min。
4. 建议实验人员根据以上步骤操作，并进行优化调整PPA发挥效力的最佳工作条件，或者确认PPA是否能满足其特定的应用要求。整体来说，PPA是能够非常有效的预防植物样本受到的空气污染，水介质污染以及人源接触带来的各种污染。使用得当，PPA可以拯救内源性污染的外植体；推荐剂量 (0.05-0.2% (v/v) )下PPA几乎不造成任何负面损伤。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6. 本产品仅作科研用途。
Is it sterile: Yes
规格
别名
植物组培抗菌剂 | 广谱组培抑菌剂
英文别名
Plant Tissue Culture Antimicrobial Protective Agent | Plant Tissue Culture Antimicrobial Agent | Plant Preservative Mixture
规格或纯度
BioReagent, 无菌
稳定性与储存
Store at 2-8°C long term (36 months).
英文名称
Plant Protective Agent (PPA)
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液
技术文档
高级数据
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:
技术文档和文章
溶液计算器
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