pET-Dual-N-GST-PreScission

货号: P748961
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储存条件
-20°C储存
运输条件
超低温运输
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1μg
P748961-1μg
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为什么选择此级别

,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

pET-Dual-N-GST-PreScission是一种用于在大肠杆菌中高效共表达两种目的蛋白的质粒,其中一种可以带上GST标签(GlutathioneS-transferasetag,GSTtag)并且GST标签后有PreScission蛋白酶的酶切位点。本质粒包含两个多克隆位点(MCS),每个多克隆位点前都有一个T7启动子/lac操作子和一个核糖体结合位点(rbs),因此都可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白的表达。本质粒为氨苄青霉素抗性。在共表达两个蛋白的复合物时,通常宜把较难表达的基因克隆到第一个多克隆位点,宜把较易表达的基因克隆到第二个多克隆位点。这样通过GST柱纯化,可分离纯化获得带有GST标签的蛋白复合物。本质粒的N端GST标签与第一个多克隆位点之间有PreScission蛋白酶识别的八肽序列LEVLFQGP,对应核酸序列为CTGGAAGTTCTGTTCCAGGGGCCC,配合使用阿拉丁生产的PreScission Protease 4℃酶切过夜,第二天收集穿柱液即可获得蛋白复合物,这为后续进行蛋白复合物的功能检测、蛋白结晶等工作带来了极大的便利。PreScission蛋白酶酶切发生在八肽序列的Q和G之间,因此在酶切去除GST标签的时候会在目的蛋白的N端留下两个额外的氨基酸残基GP。当然,本质粒也可以只在第一个多克隆位点插入目的基因,这样就会仅表达一个含有N端GST标签和PreScission识别位点的目的蛋白。pET-Dual-N-GST-PreScission质粒的主要信息如下:pET-Dual-N-GST-PreScission质粒(6065bp)的图谱如下:pET-Dual-N-GST-PreScission中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pET-Dual-N-GST-PreScission)包括:pET-Dual-N-GST-PreScission中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pET-Dual-N-GST-PreScission once)包括:pET-Dual-N-GST-PreScission质粒中推荐使用的测序引物序列如下:MCS1-N Primer (626-647): 5′-GCTATCCCACAAATTGATAAGT-3′MCS1-C Primer (853-834): 5′-GATTATGCGGCCGTGTACAA-3′ MCS2-N Primer (834-853): 5′-TTGTACACGGCCGCATAATC-3′pET-Dual-N-GST-PreScission的全序列信息:D2933 pET-Dual-N-GST-PreScission.txt。不同原核表达质粒的比较和选择,以及标签、蛋白酶切位点和蛋白共表达的考虑可以参考如下网页:http://www.aladdin-e.com/


注意事项:

本质粒未经阿拉丁书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


使用说明:

1.首次使用1μg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。2.100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl,共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。3.pET-Dual-N-GST-PreScission质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转入表达菌株。

规格

稳定性与储存
-20℃保存。
英文名称
pET-Dual-N-GST-PreScission
储存条件
-20°C储存
运输条件
超低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
小分子

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

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✅ 分析证书 (COA)

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📊 产品数据表

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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溶液计算器

常见问题

本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。需冷冻保存以维持规定的有效期。
本产品如何运输?
本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。