计算溶液所需的质量、体积或浓度。
,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
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在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
阿拉丁研发的pT3/SP6/T7-RNA-Template (体外转录质粒)是阿拉丁研发的一种用于体外基于T3、SP6或T7 Promoter进行RNA转录的模板质粒。该质粒中的PstI/SacI位点反向插入了人β-actin基因的125bp cDNA片段(X00351的823-947核苷酸片段),不仅可以作为插入目的基因用于体外转录的模板质粒,也可以作为体外转录的阳性对照。体外转录的RNA可以用于mRNA疫苗、体外蛋白翻译、转染细胞用于目的基因的表达、体外研究翻译调控机制、体外研究RNA降解机制、蛋白与RNA的相互作用等。当本质粒用HindIII等插入片段后边的限制性内切酶线性化处理之后,就可作为体外转录的模板。本质粒用HindIII线性化之后,当使用T3 RNA聚合酶、SP6 RNA聚合酶或T7 RNA聚合酶进行体外转录时,获得的RNA的长度分别为221nt、198nt和175nt,并且获得的RNA是与人β-actin mRNA互补的。推荐使用阿拉丁生产的R7006 SP6 RNA Polymerase、R7009 T3 RNA Polymerase和R7012 T7 RNA Polymerase。本质粒线性化之后转录产生的RNA可用作核糖核酸酶和S1核酸酶保护试验的探针,也可以在Northern blot和Dot blot中作为内参或用于建立每个样品中RNA相对量的参考等。pT3/SP6/T7-RNA-Template质粒的主要信息如下:pT3/SP6/T7-RNA-Template质粒(2878bp)的图谱如下:pT3/SP6/T7-RNA-Template的多克隆位点的详细图谱见说明书:https://www.aladdin-e.com/Manual/D2310 pT3/SP6/T7-RNA-Template (RNA体外转录质粒).pdf。pT3/SP6/T7-RNA-Template中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pT3/SP6/T7-RNA-Template)包括:pT3/SP6/T7-RNA-Template中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pT3/SP6/T7-RNA-Template)包括:pT3/SP6/T7-RNA-Template质粒中推荐使用的测序引物序列如下:M13 forward primer (2484-2500): 5´-GTAAAACGACGGCCAGT-3´M13 reverse primer (2206-2222): 5´-CAGGAAACAGCTATGAC-3´pT3/SP6/T7-RNA-Template的全序列信息:D2310 pT3_SP6_T7-RNA Template全序列.txt
注意事项:
本质粒未经阿拉丁书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。使用说明:
1.首次使用1µg包装的本产品时,请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。 2.100µg包装的本产品质粒浓度为0.1µg/µl,共1ml。可以直接用HindIII等限制性内切酶线性化处理之后进行体外转录。也可在其多克隆位点适当酶切后插入待体外转录的目的基因,或者也可以用无缝克隆技术插入目的基因,构建的质粒可以通过蓝白斑筛选阳性克隆,最终也可以在线性化后进行体外转录。具体的体外转录反应体系可以参考阿拉丁生产的T7 RNA Polymerase 、 SP6 RNA Polymerase 和T3 RNA Polymerase 。