兔抗绵羊红细胞抗体血清 (溶血素)

货号: R1371696
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级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 无菌 ? 无菌级 —— 经处理并验证无活微生物。可直接用于无菌操作和细胞培养,无需再灭菌。 效价 1:4000
别名
兔抗绵羊红细胞抗体溶血素 | 兔抗绵羊红细胞溶血素 | 溶血素 | 兔抗绵羊红细胞抗体 | SRBC抗体
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
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规格
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10×1ml
R1371696-10×1ml
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BioReagent,无菌 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

利用绵羊细胞与相应抗体(溶血素)结合成的复合物,可激活血清中的补体,导致红细胞溶解,当红细胞和溶血素量一定时,在规定反应的时间内,溶血程度与补体量及活性呈正相关。在接近 50%溶血( CH50)时,二者之间近似直线关系,故以 50%溶血作为最敏感的判断终点。以引起 50%溶血所需的最小补体量为一个 CH50U,可计算出待测血清中总的补体溶血活性,以CH50U/ml 表示。本实验主要反映补体经典活化途径的溶血功能,其结果与补体 C1~C9 各组成分的量及活性均有关。
试剂及配制
1、缓冲生理盐水:
(1) 贮存液:
Na2HPO4.12H2O2.85g   KH2PO4 0.27g   NaCl 17.00g
蒸馏水定容至 100mL,4℃保存备用。
(2)应用液:5mL贮存液加 95ml 蒸馏水,再加 10%硫酸镁 0.1mL,当日配制,12小时内使用。
2、2%绵羊红细胞:无菌采取绵羊血液,于等量 Alsever 液中可保存 3 周。用前以缓冲液洗 3次,并配成 2%细胞悬液。必要时可用吸光光度法或细胞计数法使悬液细胞浓度标准化。
3、溶血素:将绵羊红细胞溶血素(效价 1:4000),用应用液做 1:200 倍稀释(即 1mL溶血素加 199ml 应用液)。
4、待测血清:新鲜血液室温放置 30min,再 4℃放置 60min,使血块收缩, 4℃离心( 3000r/min)10min,取上清,-20℃保存。
操作步骤
试管法(改良 Mayer 法)
1、致敏羊红细胞: 2%绵羊红细胞加等量稀释后的溶血素(1:2000),混匀,置 37℃水浴 30min。
2、稀释血清:待测血清 0.2mL,加应用液 3.8ml,稀释度为 1:20。
3、配制溶血标准管:全溶血管:2%绵羊红细胞 2mL加 8mL蒸馏水,混匀。50%溶血管:取全溶血管液 2mL加缓冲液 2mL。
4、按表所示,依次加各成分于试管中,混匀,置 37℃水浴 30min, 第 10 管为非溶血对照:

补体 CH50 测定试管法

成分1号试管2号试管3号试管4号试管5号试管6号试管7号试管8号试管9号试管10号试管
1:20待测血清 (mL)0.100.150.200.250.300.350.400.450.50—
应用液  (mL)1.401.351.301.251.201.151.101.051.001.50
致敏红细胞  (mL)1111111111

5、结果测定:取出试管,2000r/min 离心 10min,对照管应不溶血。肉眼比色,选与 50%溶血标准管相近二管,再用分光光度计测(波长 542nm、 0.5cm 比色杯) OD 值,确定与标准管最接近者为终点管,然后按下公式计算 CH50 值:
血清补体 CH50(U/ml)=(1/血清用量)×稀释度。
如第 5 管为终点管,测待测血清中CH50为66.7U/mL。血清补体 CH50 正常值为50-100U/mL。




规格

别名
兔抗绵羊红细胞抗体溶血素 | 兔抗绵羊红细胞溶血素 | 溶血素 | 兔抗绵羊红细胞抗体 | SRBC抗体
规格或纯度
BioReagent, 无菌, 效价 1:4000
稳定性与储存
-20℃储存(5年);收货后建议分装,避免反复冻融。
英文名称
SRBC Ab
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
血清/血浆

技术文档

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