糖苷内切酶 A (Endo A)

CAS: 37278-88-9 货号: rp223107 EC号: 998-699-9
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级别和纯度: 生物活性 ? 生物活性级(Bioactive)—— 经验证在功能检测中保持生物活性。当分子须具有功能活性而不仅是纯度时使用。 ActiBioPure™ ? ActiBioPure™ —— 阿拉丁面向生物活性和重组产品的优质系列。当同时需要高纯度和保持生物活性时使用。 高性能 ? 高性能级 —— 纯度和性能特性经过优化。适用于普通等级无法满足的灵敏分析。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 His标签 ? 组氨酸(His) 标签级 —— 带有 His 标签的重组蛋白,供亲和纯化/检测。用于纯化、固定或检测带标签蛋白。 ≥2000U/mg protein; 蛋白浓度: 见COA
Accession #
Q9ZB22
蛋白标签
N-His
表达系统
E. coli
生物活性
≥2000U/mg protein, Unit definition: The amount of enzyme required to remove over 95% of carbohydrates from 5 μ g RNaseB in a reaction system of 10 μ l at 37 ℃ for 1 hour.
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规格
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1KU
rp223107-1KU
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¥629.90
5KU
rp223107-5KU
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¥1,999.90
10KU
rp223107-10KU
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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,His标签,生物活性,高性能 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

Endo A 全称糖苷内切酶 A ,基因来源原玻璃蝇节杆菌(Arthrobacter protophormiae),是一种高度特异性糖苷内切酶,可以从糖蛋白上切除没有核心岩藻糖基化的高甘露糖、杂交型 N-聚糖 ,本产品活性高,稳定性好,可以用于抗体糖基化修饰和分析。


组分和说明

rp223107Component1KU5KU10KUStorage
rp223107AEndo-β-N-acetylglucosaminidase A1KU5KU10KU-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
rp223107B10×Glycoprotein Denaturing Buffer (0.5% SDS, 40mM DTT)1000μl1000μl1000μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
rp223107C10×GlycoBuffer 2 (500 mM Sodium Phosphate, pH7.5)1000μl1000μl1000μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
rp223107D10% NP-401000μl1000μl1000μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

使用前准备:
反应试剂:将-20°C储存的10×Glycoprotein Denaturing Buffer缓冲液、10×Glyco Buffer 2及10%NP-40溶液取出,待用。

注意:根据实验需要,准备相应的试剂,如非变性条件下进行去糖基化反应,不需要准备10×Denaturing缓冲液及10%NP-40溶液。
使用方法:
变性条件下糖蛋白去糖基化
1、用去离子水溶解 1-20 µg 的糖蛋白,加入 1 µl 的 10×Glycoprotein Denaturing Buffer,用去离子水定容到 10 µl;
2、75℃孵育 10 min;
3、加入 2 µl 的 10×GlycoBuffer 2,2 µl 的 10% NP-40,轻轻吹打混匀;
4、加入 1-4 µl 的 Endo A,加去离子水到 20 µl,轻轻吹打混匀;
5、37℃ 孵育 1-4hr;
6、用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。
非变性条件下糖蛋白去糖基化
1、取 10-100µg 糖蛋白溶液,加入 2µl 10×GlycoBuffer 2,2-5µl Endo A ,补加纯化水使得反应体系总体积为20µl,轻柔混匀;
2、37℃条件下反应 4-24hr。
注意:当对天然糖蛋白去糖基化时,建议将等量糖蛋白样品进行变性后再同步进行酶切实验作为阳性对照,以确定非变性条件下去糖基化反应的程度。
【注】体系放大时候,孵育时间或酶量需要根据实际情况调整,可低速震荡混匀,可以增加转化率。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途!

Endo A, full name Endo-β-N-acetylglucosaminidase A, is derived from Arthrobacter protophormiae. It is a highly specific endoglycosidase that cleaves high-mannose and hybrid-type N-glycans without core fucosylation from glycoproteins. This product features high enzymatic activity and excellent stability, suitable for antibody glycosylation modification and analysis.

Components List


rp223107

Component

1KU

5KU

10KU

Storage

rp223107A

Endo-β-N-acetylglucosaminidase A

1KU

5KU

10KU

-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

rp223107B

10×Glycoprotein Denaturing Buffer (0.5% SDS, 40mM DTT)

1000μl

1000μl

1000μl

-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

rp223107C

10×GlycoBuffer 2 (500 mM Sodium Phosphate, pH7.5)

1000μl

1000μl

1000μl

-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

rp223107D

10% NP-40

1000μl

1000μl

1000μl

-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

Pre-experiment Preparation

Reaction Reagent:Take out 10× Glycoprotein Denaturing Buffer, 10× GlycoBuffer 2 and 10% NP-40 solution stored at -20°C for standby use.

Note: Prepare corresponding reagents according to experimental requirements. If deglycosylation is performed under non-denaturing conditions, 10× Denaturing Buffer and 10% NP-40 solution are not required.

Operating Protocols

Glycoprotein Deglycosylation under Denaturing Conditions

1. Dissolve 1–20 µg glycoprotein in deionized water, add 1 µL 10× Glycoprotein Denaturing Buffer, and make up to 10 µL with deionized water.

2. Incubate at 75°C for 10 min.

3. Add 2 µL 10× GlycoBuffer 2 and 2 µL 10% NP-40, mix gently by pipetting.

4. Add 1–4 µL Endo A, top up to 20 µL with deionized water and mix gently by pipetting.

5. Incubate at 37°C for 1–4 hr.

6. The reaction mixture can be subjected to SDS-PAGE or HPLC analysis.

Glycoprotein Deglycosylation under Non-denaturing Conditions

1. Take 10–100 µg glycoprotein sample solution, add 2 µL 10× GlycoBuffer 2 and 2–5 µL Endo A. Add purified water to bring the total reaction volume to 20 µL, and mix gently.

2. Incubate the reaction mixture at 37°C for 4–24 hr.

Note: When deglycosylating native glycoproteins, it is recommended to prepare an equal amount of denatured sample for parallel enzymatic digestion as a positive control, to evaluate the deglycosylation efficiency under non-denaturing conditions.Remark: When scaling up the reaction system, adjust incubation time or enzyme dosage as appropriate. Gentle shaking during incubation can improve digestion conversion rate.

Precautions

For personal safety and health, wear a lab coat and disposable gloves during operation. This product is for research use only.

规格

产品名称
糖苷内切酶 A (Endo A)
别名
内切糖苷酶 | 内切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶 | 内切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶A | 糖苷内切酶A | 内切-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 A (Endo A)
英文别名
Endo-β-N-acetylglucosaminidase | mannosyl-glycoprotein endo-beta-N-acetylglucosaminidase | di-N-acetylchitobiosyl beta-N-acetylglucosaminidase | endo-beta-N-acetylglucosaminidase | ENGASE
规格或纯度
生物活性, ActiBioPure™, 高性能, EnzymoPure™, His标签, ≥2000U/mg protein; 蛋白浓度: 见COA
生物活性
≥2000U/mg protein, Unit definition: The amount of enzyme required to remove over 95% of carbohydrates from 5 μ g RNaseB in a reaction system of 10 μ l at 37 ℃ for 1 hour.
表达系统
E. coli
种属
原胸节杆菌(Arthrobacter protophormiae)
蛋白标签
N-His
来源
重组表达
SDS-PAGE
67 kDa
CAS编号和信息
37278-88-9
酶学委员会编号
3.2.1.96
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
液体
储存缓冲液
20 mM Tris-HCl, 200mM NaCl, 10% Glycerol, pH 7.5.
浓度
≥2000U/mg protein; 蛋白浓度: 见COA
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
长期储存-20℃(18个月);避免反复冻融。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

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✅ 分析证书 (COA)

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📊 产品数据表

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🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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找到3个结果

批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0724203 分析证书 rp223107
ZJ25F0724204 分析证书 rp223107
ZJ25F0724205 分析证书 rp223107
技术文档和文章
溶液计算器