膜回收缓冲液

货号: S301877
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级别和纯度: 1×
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2-8°C储存
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低温运输
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500ml
S301877-500ml
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概述

膜回收缓冲液(Stripping Buffered Solution for Western Blots)可以对印记膜进行抗体洗脱从而达到Western Blot多次检测的目的。在37℃条件下,将用过的膜浸泡在膜再生液5-15分钟,可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后,可以使用不同的抗体进行新一轮Western Blot实验。即使样品量并不匮乏,采用这一策略多次检测同一张膜上的蛋白,能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。而且可以消除重新上样而带来的误差。适用于清除硝酸纤维素膜或PVDF膜上结合的抗体。

使用方法:

1.将膜充分浸泡于适当体积的再生液中,37℃洗脱5-15分钟,时间长短应该参考注意事项进行优化。

2.取出膜,用TTBS,TBST,PBST等洗涤缓冲液漂洗至少5次,每次5-10min。

3.此时膜上抗体已除去,可重新封闭后再加入另一种抗体进行检测。

4.膜再生液实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下将抗体洗脱下来,实际操作中,膜类型,抗体类型,浓度及抗原特性都影响洗脱难易度。

5.适用于ECL和类似的化学发光试剂进行的Western检测。不适用于非化学发光试剂进行的 Western检测,例如 DAB,NBT/BCIP。

6.用ECL显色后,再生液洗脱几分钟后,可再次加入ECL显色液显影,如胶片上显示条带,表明抗体未除净,须进一步在再生液中浸泡至胶片上无显色。

7.使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA封闭的膜更容易再生。8.不可让膜干燥。

使用范围:

适用于一般生物学及医学研究


规格

规格或纯度
1×
英文名称
Stripping Buffered Solution
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
F2110945F2110945 分析证书 S301877
溶液计算器