T4 多聚核苷酸激酶 (3'磷酸酶活性缺失)

Name: T4 多聚核苷酸激酶 (3'磷酸酶活性缺失)
SKU: T1372520
Availability: InStock

货号: T1372520

COA

有货

级别和纯度: 无动物源 ? 无载体 ? 生物活性 ? 无DNA酶和RNA酶 ? ActiBioPure™ ? EnzymoPure™ ? 无菌 ? 10 U/μL

Accession #

NP_049834.1

表达系统

E. coli

规格

库存

价格

数量

500U

T1372520-500U

现货

¥219.90

4×500U

T1372520-4×500U

现货

¥639.90

20×500U

T1372520-20×500U

现货

¥2,399.90

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概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器

🧪

为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无DNA酶和RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性级，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

本公司生产的 T4 多聚核苷酸激酶(3'磷酸酶活性缺失)，即 T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus)，简称 T4 PNK (3' phosphatase minus)是一种多聚核苷酸 5'羟基激酶，可以催化 ATP 的γ位磷酸基团向单链或双链 DNA、RNA、寡核苷酸或带有 3'磷酸基团的单核苷酸的 5'羟基转移。其它 NTP 也可产生相同的反应：5'-OH + NTP → 5'-P + NDP。与 T4 Polynucleotide Kinase 相比较，T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphataseminus)缺失了 3'磷酸酶活性，即不能催化 3'端磷酸化多聚核苷酸的去磷酸化：3'-P → 3'-OH + Pi (最适 pH 为 5.9 左右)。T4 PNK (3' phosphataseminus)特别适用于把 OH-DNA/RNA-p 催化转变为 p-DNA/RNA-p，或把 Np 催化转变为 pNp。

来源（Source）	大肠杆菌重组表达
外观（Appearance）	无菌液体
保存液（Storage Buffer）	10mM Tris-HCl, 50mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.1µM ATP, 50%glycerol,pH7.4
酶浓度（Enzyme Concentration）	10U/μL
纯度（Purity）	不含其它 DNA 内切酶和外切酶，不含 RNA 酶。
活性定义（Activity Definition）	One unit is defined as the amount of enzyme catalyzing the incorporation of 1 nmol of phosphate from ATP to 5’-OH DNA in 30 minutes at 37℃。

组分

T1372520	Component	500U	4*500U	20*500U	Storage
T1372520A	T4 PNK (3' phosphatase minus) (10U/µl)	50µl	4*50µl	20*50µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
T1372520B	T4 PNK Buffer (10X)	150µl	4*150µl	20*150µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品应用

寡核苷酸、DNA 或 RNA 的 5'末端标记；寡核苷酸、DNA 或 RNA 的 5'端磷酸化，确保后续连接反应顺利进行；催化 3'磷酸化的单核苷酸的 5'磷酸化，产生的底物 pNp 可以和 DNA 或 RNA 的 3'末端连接；催化 3'磷酸化的寡核苷酸的 5'末端标记。

产品优势

T4 PNK (3' phosphatase minus)特别适用于把 OH-DNA/RNA-p 催化转变为 p-DNA/RNA-p，或把 Np 催化转变为 pNp。

使用说明

1.DNA 5'末端标记：

a.参考如下表格设置反应体系：

Reagent	Volume
DNA to be phosphorylated	1-20pmol
T4 PNK Buffer (10X)	2µl
[γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol)	20pmol
Nuclease-free Water	to 19µl
T4 PNK (3' phosphatase minus) (10U/µl)	1µl

b.按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。

c.37℃孵育 30min。

d.加入 1µl 0.5M EDTA (pH 8.0)混匀，以终止反应。

e.后续可以使用酚氯仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的 DNA，也可以使用适当的 DNA 纯化试剂盒进行纯化。

2.DNA 5'末端磷酸化：

a.参考如下表格设置反应体系：

Reagent	Volume
DNA to be phosphorylated	1-20pmol
T4 PNK Buffer (10X)	2µl
0.1mM ATP	1µl
Nuclease-free Water	to 19µl
T4 PNK (3' phosphatase minus) (10U/µl)	1µl

b.按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。

c.37℃孵育 30min。

d.加入 1µl 0.5M EDTA (pH 8.0)混匀，以终止反应。

e.后续可以使用酚氯仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的 DNA，也可以使用适当的 DNA 纯化试剂盒进行纯化。

保存条件：-20℃保存，≤0℃运输。

注意事项：

（1）铵盐沉淀获得的 DNA 不能用于 T4 Polynucleotide Kinase (3' phosphatase minus)的标记反应。铵盐可强烈抑制 T4 Polynucleotide Kinase(3' phosphatase minus)的酶活性。

（2）酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

（3）本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

（4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

规格

产品名称

T4 多聚核苷酸激酶 (3'磷酸酶活性缺失)

英文别名

T4 PNK (3' phosphatase minus)

规格或纯度

无动物源, 无载体, 生物活性, 无DNA酶和RNA酶, ActiBioPure™, EnzymoPure™, 无菌, 10 U/μL

表达系统

E. coli

种属

Escherichia phage T4

无载体

Yes

无动物源

Yes

来源

重组表达

分子类型

酶

产品线

生物产品

储存与运输

物理形态

液体

储存缓冲液

10mM Tris-HCl, 50mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.1µM ATP, 50% Glycerol, pH7.4.

浓度

10 U/μL

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃（48个月）；避免反复冻融。

单位定义

One unit is defined as the amount of enzyme catalyzing the incorporation of 1 nmol of phosphate from ATP to 5’-OH DNA in 30 minutes at 37℃

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA，每批产品都进行了严格的验证，您可放心使用！

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批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F0826209	分析证书	T1372520
ZJ25F0826208	分析证书	T1372520

技术文档和文章

t1372520 t4 多聚核苷酸激酶 3 磷酸酶活性缺失中文说明书.pdf

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溶液计算器

摩尔浓度计算器

计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

浓度

体积

分子量

g/mol

稀释计算器

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浓度1（C1）

体积 1 (V1)

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