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ActiBioPure™,EnzymoPure™,无DNA酶和RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
本公司生产的 T4 多聚核苷酸激酶,即 T4 Polynucleotide Kinase,简称 T4 PNK,是一种多聚核苷酸 5'羟基激酶,可以催化 ATP 的γ位磷酸基团向单链或双链 DNA、RNA、寡核苷酸或带有 3'磷酸基团的单核苷酸的 5'羟基转移。其它 NTP 也可产生相同的反应:5'-OH + NTP → 5'-P + NDP。上述的磷酸化反应是可逆的。当缺失 ATP 并且存在 ADP 的情况下,T4 Polynucleotide Kinase 可以显示出 5'磷酸酯酶的活性,催化单链或双链 DNA、RNA、寡核苷酸或带有 3'磷酸基团的单核苷酸的 5'磷酸基团向 ADP 的转移形成 ATP。其它 NTP 也可产生相同的反应:5'-P + NDP → 5'-OH + NTP(最适 pH 为 6.4 左右)。当 ATP 和 ADP 都适量存在时,T4 Polynucleotide Kinase 可以催化单链或双链 DNA、RNA、寡核苷酸或带有 3'磷酸基团的单核苷酸的 5'磷酸基团和 ATP 的γ位磷酸基团之间的交换反应。其它 NTP 也可产生相同的反应:5'-P + NTP + NDP → 5'-P + NDP + NTP。T4Polynucleotide Kinase 同时具有 3'磷酸酯酶活性,可催化 3'磷酸化的多聚核苷酸的去磷酸化:3'-P → 3'-OH + Pi (最适 pH 为 5.9 左右)。T4Polynucleotide Kinase 的激酶活性在 N-末端附近,而磷酸酯酶活性在 C-末端附近。
纯度(Purity):不含 DNA 内切酶和外切酶,不含 RNA 酶。
组分和说明
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产品应用
寡核苷酸、DNA 或 RNA 的 5'末端标记,用作 Southern、Northern、EMSA 等的探针,凝胶电泳的 marker,DNA 测序引物,PCR 引物等;使寡
核苷酸、DNA 或 RNA 的 5'端磷酸化,确保后续连接反应顺利进行;催化 3'磷酸化的单核苷酸的 5'磷酸化,使该单核苷酸可以和 DNA 或 RNA 的
3'末端连接;去除 3'端磷酸基团。
产品优势
可以催化 ATP 的γ位磷酸基团向单链或双链 DNA、RNA、寡核苷酸或带有 3'磷酸基团的单核苷酸的 5'羟基转移。
使用说明
1.DNA 5'末端标记:
a.参考如下表格设置反应体系:
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b.按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c.37℃孵育 30min。
d.加入 1µl 0.5M EDTA (pH 8.0)混匀,以终止反应。
e.后续可以使用酚氯仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的 DNA,也可以使用适当的 DNA 纯化试剂盒进行纯化。
2.DNA 5'末端磷酸化:
a.参考如下表格设置反应体系:
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b.按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex 在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c.37℃孵育 30min。
d.加入 1µl 0.5M EDTA (pH 8.0)混匀,以终止反应。
e.后续可以使用酚氯仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的 DNA,也可以使用适当的 DNA 纯化试剂盒进行纯化。
保存条件: -20℃保存,≤0℃运输
注意事项:
(1)铵盐沉淀获得的 DNA 不能用于 T4 Polynucleotide Kinase 的标记反应。铵盐可强烈抑制 T4 Polynucleotide Kinase 的酶活性。 PEG 可促进磷酸化反应速率和效率;交换反应体系应加入 PEG。
(2)酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
(3)本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
(4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!
| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | T665879 | |
| 分析证书 | T665879 |
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