T4 RNA 连接酶

Name: T4 RNA 连接酶
SKU: T750871
Availability: InStock

货号: T750871

COA

有货

级别和纯度: 无动物源 ? 无载体 ? 生物活性 ? 无DNA酶和RNA酶 ? ActiBioPure™ ? EnzymoPure™ ? 无菌 ? 10 U/µL

Accession #

2C5U_B,P00971

表达系统

E. coli

生物活性

One unit is defined as the amount of enzyme required to catalyze 1nmol of 5'-[32P]-(A)12-18 to a phosphatase-indigestible cyclic product within 30 minutes at 37℃.

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T750871-200U

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概述规格储存与运输技术文档高级数据质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱) 技术文档和文章溶液计算器常见问题

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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,无DNA酶和RNA酶,无动物源,无菌,无载体,生物活性级，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

🌡

储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输。请查阅批次 COA 获取详细规格。

📋

质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

📚

文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

本公司生产的 T4 RNA 连接酶，即 T4 RNA Ligase，是一种 ATP-依赖的可以催化单链 RNA、单链 DNA 或单核苷酸分子间或分子内 5'-P 末端与 3'-OH末端之间形成磷酸二酯键的酶。T4 RNA Ligase 主要用于 RNA 和 RNA 之间的连接，连接时需要 5'磷酸基团和 3'羟基的存在。不仅可以进行 RNA分子间的连接，也可以进行 RNA 分子(最短 8 个碱基)的环化连接。T4 RNA Ligase 可以用于 RNA 和单核苷酸之间的连接，单核苷酸必须为 5'和 3' 均磷酸化的形式，此时常用于 RNA 的 3'末端标记。T4 RNA Ligase 也可以用于 DNA 和 RNA 之间的连接。当 DNA 提供 5'磷酸基团，RNA 提供 3' 羟基时，连接效率较高；当 DNA 提供 3'羟基，RNA 提供 5'磷酸基团时，连接效率非常低。T4 RNA Ligase 也可以用于 DNA 和 DNA 之间的连接，但连接效率非常低。主要用于 DNA 的环化连接，例如 5' RACE 中的 cDNA 环化。DNA 和 DNA 之间的连接尽管可以进行，但比较困难。

纯度（Purity）: 不含 DNA 内切酶和外切酶，不含 RNA 酶，不含磷酸酯酶。

组分和说明

T750871	Component	200U	5*200U	Storage
T750871A	T4 RNA Ligase(10U/μl)	200U	5*200U	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
T750871B	Reaction Buffer(10X)	40µl	5*40µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
T750871C	ATP(10mM)	40µl	5*40µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
T750871D	BSA(1mg/ml)	40µl	5*40µl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

产品应用

用 RNA 3'末端标记；RNA 和 RNA 分子间连接；寡核苷酸的环化；tRNA 修饰；5' RACE 中寡核苷酸连接到 cDNA 单链；在蛋白质特定位点引入非天然氨基酸。

产品优势

T4 RNA Ligase 可以用于 RNA 和单核苷酸之间的连接，单核苷酸必须为 5'和 3'均磷酸化的形式，此时常用于 RNA 的 3'末端标记。

使用说明

1. DNA 片段和载体 DNA 的连接

参考下表在冰浴中配制如下反应体系：

Reagent	Volume	Final Concentration
Water (DNase/RNase free)	To 10µl	-
Reaction Buffer(10X)	1µl	1X
插入片段^a	0.3poml
载体 DNA^b	0.03poml
T4 RNA Ligase(10U/μl)	40µl	-

a.插入片段与载体的摩尔比应在 3:1-10:1 之间。

b.平末端载体与 DNA 片段进行连接时，应首先将载体进行去磷酸化处理，以防止其自身环化。

2.16℃过夜反应

3.连接产物转化

① 在冰上解冻克隆用的化学感受态细胞(如:DH5a Competent cell)。

② 取 10µl 连接产物加入到 100µl 感受态细胞中，轻弹管壁混匀(请勿振荡混匀)，冰上静置 30 min。

注：连接产物转化体积最多不应超过所用感受态细胞体积的 1/10。

③42℃水浴热激 45 sec 后，立即置于冰上冷却 2-3 min。

④ 加入 900 u SOC 或 LB 培养基(不添加抗生素)，37℃摇菌 1h(200-250 rpm)。

⑤将相应抗性的 LB 平板固体培养基在 37℃培养箱中预热。

⑥ 5000 rpm(2,400x g)离心 5 min，弃掉 900 μl 上清。用剩余培养基将菌体重悬，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀。

⑦37℃培养箱中倒置培养 12-16 h.

保存条件： -20℃保存，≤0℃运输

注意事项：

（1）反应体系中需加入的 ATP 量取决于连接反应的类型；在最终反应体系中 BSA 推荐浓度为 0.1mg/ml。

（2）使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。

（3）本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

（4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

规格

产品名称

T4 RNA 连接酶

别名

T4 RNA连接酶 | T4RNA连接酶

英文别名

rnlA

规格或纯度

ActiBioPure™, 生物活性, EnzymoPure™, 无动物源, 无载体, 无菌, 无DNA酶和RNA酶, 10 U/µL

生物活性

One unit is defined as the amount of enzyme required to catalyze 1nmol of 5'-[32P]-(A)12-18 to a phosphatase-indigestible cyclic product within 30 minutes at 37℃.

表达系统

E. coli

种属

肠杆菌噬菌体T4(Enterobacteria phage T4)

来源

重组表达

分子类型

酶

产品线

生物产品

储存与运输

物理形态

液体

储存缓冲液

10mM Tris-HCl, 1mM DTT, 50mM KCl, 0.1mM EDTA, 50%(v/v) Glycerol, pH7.5

浓度

10 U/µL

储存条件

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温运输

稳定性与储存

长期储存-20℃（24个月）；避免反复冻融。

单位定义

37℃30分钟内，催化1nmol5'-[", '32P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

下载 SDS →

✅ 分析证书 (COA)

批次质量数据。输入批号以获取对应 COA。

查询 COA →

📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

查看数据表 →

🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

查看规格说明 →

高级数据

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

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批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F1129858	分析证书	T750871
ZJ25F1129857	分析证书	T750871

技术文档和文章

t750871_t4 rna 连接酶产品说明书.pdf

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浓度1（C1）

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体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

所需的复溶浓度

常见问题

什么是「无动物源」？

「无动物源」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

什么是「无载体」？

「无载体」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。

本产品应如何储存？

请于?20 °C条件下保存。避免反复冻融。建议按单次用量分装保存。

本产品如何运输？

本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。

如何获取批次专用COA？

每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。

需要帮助选择级别？

我们的级别选择指南涵盖了目录中所有的变体的纯度、稳定剂状态和应用适用性。

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