细胞凋亡诱导剂套装 (即用型)

货号: U1524531
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级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 适用于分析 ? 适用于分析 —— 纯度满足一般分析程序。作为常规方法中可靠的分析试剂使用。 比色法 ? 比色级 —— 适用于显色定量检测的纯度。当试剂纯度影响显色强度和准确度时使用。
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BioReagent,比色法,适用于分析 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

细胞凋亡诱导剂套装 (即用型) (U1524531) 包含五种经典细胞凋亡诱导剂,用于在哺乳动物细胞中诱导或调节细胞凋亡(程序性细胞死亡)。该套装以DMSO溶液形式提供,不含防腐剂。

  • 放线菌素D:经典抗肿瘤药物,肿瘤细胞凋亡的细胞毒性诱导剂。放线菌素是RNA合成的DNA依赖性抑制剂,可通过某些特异性刺激(如TRAIL和Fas(CD95))促进凋亡的诱导。
  • 喜树碱:强效抗肿瘤剂,DNA-拓扑异构酶I的抑制剂。该药物激活p53,导致TRAIL-R2(DR5)和Bak的表达上调。
  • 环己酰亚胺:强效蛋白翻译抑制剂,能抑制蛋白合成并随后阻止细胞生长和诱导细胞死亡。
  • 地塞米松:胸腺细胞中凋亡的经典诱导剂,糖皮质激素消炎药。调节T细胞存活、生长和分化。
  • 依托泊苷:强效拓扑异构酶II抑制剂,增强dsDNA和ssDNA裂解并抑制DNA再连接

各组分应用场景与使用方法

1. 放线菌素D (Actinomycin D)

核心机制:抗肿瘤抗生素,通过插入DNA双链抑制RNA合成(转录抑制剂)。

典型应用场景:

  • mRNA稳定性分析(转录阻滞实验):加入放线菌素D终止新RNA合成后,检测特定mRNA随时间衰减情况,计算其半衰期。

  • 转录调控研究:研究特定基因表达是否依赖于持续转录活性。

  • 细胞凋亡模型建立:作为转录依赖性凋亡的诱导剂。

使用方法:

  • 按1:1000稀释至培养基中(如1 μL储存液加入1 mL培养基),初始工作浓度为10 μM。

  • 处理时间通常为6-24小时,具体需根据细胞类型优化。

  • 参考浓度:文献报道放线菌素D诱导Vero细胞凋亡的浓度为0.25-4.0 mg/L,处理12-60小时。

2. 喜树碱 (Camptothecin)

核心机制:DNA拓扑异构酶I抑制剂,通过抑制Topo I活性导致DNA损伤,激活p53并上调TRAIL-R2(DR5)和Bak表达。

典型应用场景:

  • 凋亡实验阳性对照:作为诱导细胞凋亡的通用方法,为各类细胞死亡检测实验(如Annexin V染色、TUNEL染色、Caspase活性检测等)提供可靠的阳性对照。

  • DNA损伤与修复研究:作为特异性Topo I抑制剂,用于研究DNA损伤响应及修复机制。

  • 细胞周期与凋亡研究:喜树碱主要作用于S期细胞,常用于研究细胞周期检查点激活和凋亡通路。

  • 抗癌药物机制研究:喜树碱及其衍生物(伊立替康、拓扑替康)是临床抗癌药物,用于抗癌机制或药物联用研究。

使用方法:

  • 按1:1000稀释至培养基中,初始工作浓度为2 μM。

  • 建议进行时间梯度实验以确定最佳处理时间,推荐 2-12 小时 孵育(37°C)。 

  • 参考浓度:文献报道50 nmol/L喜树碱处理U937细胞24小时即可诱导明显凋亡;100 nmol/L~10 μmol/L处理HeLa细胞24小时可见促凋亡效果。

3. 环己酰亚胺 (Cycloheximide)

核心机制:蛋白质合成抑制剂,通过抑制核糖体翻译过程阻断新蛋白合成。

典型应用场景:

  • 蛋白质降解动力学(CHX Chase实验) :这是环己酰亚胺最独特和最重要的应用。加入环己酰亚胺终止新蛋白合成后,追踪特定已有蛋白水平随时间下降的速度,直接测定该蛋白的降解速率和半衰期。

  • 信号通路研究:判断某个快速细胞反应是否需要新蛋白合成。

使用方法:

  • 按1:1000稀释至培养基中,初始工作浓度为100 μM。

  • 在CHX Chase实验中,通常在加入环己酰亚胺后0、2、4、6、8小时等时间点收集细胞裂解液,通过免疫印迹(Western Blot)检测目标蛋白剩余量。

  • 参考浓度:文献中常用浓度为50-200 μg/mL。

4. 地塞米松 (Dexamethasone)

核心机制:合成糖皮质激素,通过结合并激活细胞内糖皮质激素受体诱导凋亡。

典型应用场景:

  • 胸腺细胞及淋巴细胞凋亡研究:地塞米松是胸腺细胞凋亡的经典诱导剂。

  • 免疫抑制与炎症研究:作为强效免疫抑制剂和抗炎药,广泛用于研究炎症信号通路(如NF-κB)和免疫细胞功能调控。

  • 疾病模型构建:常用于构建糖皮质激素性骨质疏松等疾病模型。

使用方法:

  • 按1:1000稀释至培养基中,初始工作浓度为10 μM。

  • 处理时间通常为12-48小时。

  • 参考浓度:文献报道0.5-2.0 μg/mL地塞米松处理SMMC-7721细胞24小时可诱导凋亡;0.1-10 μmol/L处理CEM细胞48小时可抑制增殖。

5. 依托泊苷 (Etoposide)

核心机制:鬼臼毒素衍生物,拓扑异构酶II抑制剂,可增强dsDNA和ssDNA裂解并抑制DNA再连接。

典型应用场景:

  • DNA损伤与修复研究:作为Topo II抑制剂造成DNA双链断裂,是研究DNA损伤修复(同源重组修复、非同源末端连接)的常用工具。

  • 细胞周期与凋亡研究:在S期抑制细胞周期,在正常细胞系和肿瘤细胞系中诱导凋亡。

  • 抗癌药物机制研究:依托泊苷是临床广泛使用的化疗药物,可用于研究其抗癌机制、耐药性或药物联用效果。

使用方法:

  • 按1:1000稀释至培养基中,初始工作浓度为10 μM。

  • 处理时间通常为16-48小时。

  • 参考浓度:文献报道1.5-15 μM依托泊苷处理MEF细胞18小时即可诱导凋亡;100-500 μM处理多种肿瘤细胞24小时可显著诱导凋亡 

总结:如何选择用哪种诱导剂?

本试剂盒中的五种诱导剂通过不同机制诱导凋亡,分别适用于不同的研究场景。请务必根据您的实验目的选择合适的诱导剂,切勿随意混用或替换。

  • 研究转录或mRNA稳定性 → 放线菌素D

  • 研究DNA损伤修复或作为凋亡阳性对照 → 喜树碱或依托泊苷

  • 研究蛋白质降解动力学 → 环己酰亚胺(CHX Chase实验)

  • 研究免疫抑制或糖皮质激素信号 → 地塞米松

重要提示:五种诱导剂的作用靶点和机制各不相同。放线菌素D和环己酰亚胺分别作用于转录和翻译层面,喜树碱与依托泊苷均靶向拓扑异构酶但亚型不同,地塞米松则通过核受体途径发挥作用。若不明确实验目的而随意选用,可能无法获得预期凋亡效果,甚至产生误导性结果。如果确实需要联合使用多种诱导剂,请务必先进行预实验,优化各组分浓度和处理时间,并设置完善的单药对照组。

产品组分

U1524531 组件 物理外观 1 kit 储存 单次测试使用量
U1524531A 放线菌素D (10 mM) 液体 50 μL -20℃,避光 建议1/1000稀释
U1524531B 喜树碱 (2 mM) 液体 1 mL -20℃,避光 建议1/1000稀释
U1524531C  环己酰亚胺 (100 mM) 液体 1 mL -20℃,避光 建议1/1000稀释
U1524531D 地塞米松 (10 mM) 液体 1 mL -20℃,避光 建议1/1000稀释
U1524531E 依托泊苷 (10 mM) 液体 100 μL -20℃,避光 建议1/1000稀释
警告:试剂盒含有高毒性试剂;仅限专业用户;在操作浓缩溶液和稀释溶液时,请佩戴手套和其他防护设备以及遵循良好的实验室规范。

使用方法

1、推荐起始浓度:建议使用所提供贮备液的1000倍稀释液作为诱导许多细胞培养系统中凋亡活性的起点(例如,在1 mL培养基中加入1 μL储备液)。最佳剂量可能因不同的细胞和培养条件而异。

2、小体积添加技巧:当需要将抑制剂添加到小于1 mL的体系中时,为避免加样误差,可以先将储备液用新鲜的DMSO进行1:10稀释,然后再用培养基或PBS进行1:100的稀释。

3、剂量优化:最佳诱导剂量会因细胞类型和培养条件的不同而异,建议根据实验体系进行优化。

注意事项

1、该试剂盒含有高毒性试剂,仅限专业用户使用。

2、在操作浓缩溶液和稀释溶液时,请佩戴手套和其他防护设备以及遵循良好的实验室规范。

3、应在-20°C下储存试剂盒物料直至其有效期,避免反复冻融循环。

4、该产品仅供研究使用,不得用于诊断或治疗目的。

The Apoptosis Inducer Set (Ready-to-use) (U1524531) contains five classic apoptosis inducers for inducing or regulating apoptosis (programmed cell death) in mammalian cells. The set is provided as a liquid in DMSO without preservatives

  • Actinomycin D: A classic antitumor drug and cytotoxic inducer of apoptosis in tumor cells. Actinomycin is a DNA-dependent inhibitor of RNA synthesis and can promote apoptosis induction through specific stimuli such as TRAIL and Fas (CD95).
  • Camptothecin: A potent antitumor agent and inhibitor of DNA-topoisomerase I. This drug activates p53, leading to upregulation of TRAIL-R2 (DR5) and Bak expression.
  • Cycloheximide: A potent inhibitor of protein translation that inhibits protein synthesis and subsequently prevents cell growth and induces cell death.
  • Dexamethasone: A classic inducer of apoptosis in thymocytes; a glucocorticoid anti-inflammatory drug. Regulates T cell survival, growth, and differentiation.
  • Etoposide: A potent topoisomerase II inhibitor that enhances dsDNA and ssDNA cleavage and inhibits DNA religation

Application Scenarios and Usage for Each Component

1. Actinomycin D

Mechanism: Antitumor antibiotic that intercalates into DNA and inhibits RNA synthesis (transcription inhibitor).

Typical Applications:

  • mRNA stability assay (transcriptional arrest): After adding Actinomycin D to block new RNA synthesis, measure the decay of a specific mRNA over time to calculate its half‑life.

  • Transcriptional regulation studies: Investigate whether gene expression depends on ongoing transcription.

  • Apoptosis model: Induce transcription‑dependent apoptosis.

Usage:

  • Dilute 1:1000 into culture medium (e.g., 1 μL stock into 1 mL medium). Initial working concentration = 10 μM.

  • Treatment time: typically 6-24 hours, but optimize according to cell type.

  • Reference range in literature: 0.25-4.0 mg/L for Vero cells, 12-60 hours.

2. Camptothecin

Mechanism: DNA topoisomerase I inhibitor. By inhibiting Topo I activity, it causes DNA damage, activates p53, and upregulates TRAIL‑R2 (DR5) and Bak expression.

Typical Applications:

  • Positive control for apoptosis assays: As a general method for inducing apoptosis, it provides a reliable positive control for various cell death detection assays (e.g., Annexin V staining, TUNEL staining, Caspase activity assays).

  • DNA damage and repair studies: As a specific Topo I inhibitor, it is used to study DNA damage response and repair mechanisms.

  • Cell cycle and apoptosis studies: Camptothecin primarily acts on S‑phase cells and is commonly used to investigate cell cycle checkpoint activation and apoptotic pathways.

  • Anticancer drug mechanism studies: Camptothecin and its derivatives (irinotecan, topotecan) are clinical anticancer agents; useful for studying anticancer mechanisms or drug combination effects.

Usage:

  • Dilute 1:1000 into culture medium. Initial working concentration = 2 μM.

  • Treatment time: typically 12-48 hours.

  • Reference range in literature: 50 nmol/L induces apoptosis in U937 cells at 24 h; 100 nmol/L-10 μmol/L effective in HeLa cells at 24 h.

3. Cycloheximide

Mechanism: Protein synthesis inhibitor that blocks translation by acting on ribosomes.

Typical Applications:

  • Protein degradation kinetics (CHX chase assay): This is its most distinctive and important use. After blocking new protein synthesis, track the decline of a pre‑existing protein over time to measure its degradation rate and half‑life.

  • Signal transduction studies: Determine whether a rapid cellular response requires de novo protein synthesis.

Usage:

  • Dilute 1:1000 into culture medium. Initial working concentration = 100 μM.

  • For CHX chase: collect cell lysates at multiple time points (e.g., 0, 2, 4, 6, 8 h) after addition and analyse by Western blot.

  • Reference range in literature: Commonly 50–200 μg/mL.

4. Dexamethasone

Mechanism: Synthetic glucocorticoid that binds and activates the intracellular glucocorticoid receptor to induce apoptosis.

Typical Applications:

  • Thymocyte and lymphocyte apoptosis: Classic inducer of apoptosis in thymocytes.

  • Immunosuppression and inflammation research: Potent anti‑inflammatory and immunosuppressive agent; widely used to study NF‑κB and immune cell regulation.

  • Disease modelling: Often used to establish glucocorticoid‑induced osteoporosis models, among others.

Usage:

  • Dilute 1:1000 into culture medium. Initial working concentration = 10 μM.

  • Treatment time: typically 12-48 hours.

  • Reference range in literature: 0.5-2.0 μg/mL in SMMC‑7721 cells at 24 h; 0.1-10 μmol/L in CEM cells at 48 h for proliferation inhibition.

5. Etoposide

Mechanism: Podophyllotoxin derivative; topoisomerase II inhibitor that enhances dsDNA and ssDNA cleavage and prevents DNA religation.

Typical Applications:

  • DNA damage and repair studies: Causes DNA double‑strand breaks; a common tool to study homologous recombination and non‑homologous end joining repair.

  • Cell cycle and apoptosis: Arrests cells in S phase and induces apoptosis in both normal and tumour cell lines.

  • Anticancer drug mechanism: Clinically used chemotherapeutic; useful for studying its anticancer action, resistance, or combination therapies.

Usage:

  • Dilute 1:1000 into culture medium. Initial working concentration = 10 μM.

  • Treatment time: typically 16-48 hours.

  • Reference range in literature: 1.5-15 μM in MEF cells at 18 h; 100-500 μM in various tumour cells at 24 h for significant apoptosis.

Summary: How to Choose Which Inducer to Use?

The five inducers in this kit induce apoptosis through distinct mechanisms and are suitable for different research scenarios. Please select the appropriate inducer according to your experimental objectives – do not mix or substitute them arbitrarily.

  • Transcription or mRNA stability studies → Actinomycin D

  • DNA damage and repair studies, or as a positive control for apoptosis → Camptothecin or Etoposide

  • Protein degradation kinetics studies → Cycloheximide (CHX chase assay)

  • Immunosuppression or glucocorticoid signaling studies → Dexamethasone

Important Note: These five inducers have completely different targets and mechanisms. Actinomycin D and Cycloheximide act at the transcriptional and translational levels, respectively; Camptothecin and Etoposide both target topoisomerases but with different subtypes; Dexamethasone functions through the nuclear receptor pathway. Using an incorrect inducer without a clear purpose may fail to achieve the expected apoptotic effect or may lead to misleading results. If combination treatment with multiple inducers is required, please perform pilot experiments to optimize concentrations and treatment times, and include appropriate single‑agent controls.

Components

U1524531 Components Appearance 1 kit Storage Quantity Per Test
U1524531A Actinomycin D (10 mM) Liquid 50 μL -20℃,Store in the dark Recommended 1:1000 dilution
U1524531B Camptothecin (2 mM) Liquid 1 mL -20℃,Store in the dark Recommended 1:1000 dilution
U1524531C Cycloheximide (100 mM) Liquid 1 mL -20℃, Store in the dark Recommended 1:1000 dilution
U1524531D Dexamethasone (10 mM) Liquid 1 mL -20℃,Store in the dark Recommended 1:1000 dilution
U1524531E Etoposide (10 mM) Liquid 100 μL -20℃, Store in the dark Recommended 1:1000 dilution
WARNING: This kit contains highly toxic reagents. For professional users only. Wear gloves and other protective equipment and follow good laboratory practices when handling concentrated and diluted solutions.
Usage Protocol
1. Recommended Starting Concentration: A 1000-fold dilution of the provided stock solutions is recommended as a starting point for inducing apoptotic activity in many cell culture systems (e.g., add 1 μL to 1 mL of medium). Optimal dosages may vary depending on cell type and culture conditions.
2. Small Volume Addition Tip: For additions to volumes less than 1 mL, dilute the stock solution 1:10 in fresh DMSO, then further dilute 1:100 in medium or PBS to facilitate accurate addition.
3. Dose Optimization: The optimal inducing dose varies by cell type and culture conditions; optimization according to the experimental system is recommended.
Precautions
1. This kit contains highly toxic reagents; for professional users only.
2. Wear gloves and other protective equipment and follow good laboratory practices when handling concentrated and diluted solutions.
3. Store kit components at -20°C until the expiration date. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
4. This product is for research use only and is not intended for diagnostic or therapeutic purposes.

规格

别名
细胞凋亡诱导剂套装 | Apoptosis Inducer试剂盒(Ready-to-use) | 细胞凋亡阳性对照试剂盒
英文别名
Apoptosis Inducers Kit | 5 Apotosis Inducers | Ready-to-use Apoptosis Inducer Set
规格或纯度
BioReagent, 比色法, 适用于分析
英文名称
Apoptosis Inducer Set (Ready-to-use)
应用
Cell Apoptosis Analysis, 细胞代谢
检测仪器
流式细胞仪,荧光显微镜,荧光酶标仪
敏感性
Light-sensitive
储存与运输
储存条件
-20°C储存
运输条件
超低温运输
稳定性与储存
各组分在相应的储存条件下保质期1年。
组分与储存
U1524531 组件 物理外观 1 kit 储存 单次测试使用量
U1524531A 放线菌素D (10 mM) 液体 50 μL -20℃,避光 建议1/1000稀释
U1524531B 喜树碱 (2 mM) 液体 1 mL -20℃,避光 建议1/1000稀释
U1524531C 环己酰亚胺 (100 mM) 液体 1 mL -20℃,避光 建议1/1000稀释
U1524531D 地塞米松 (10 mM) 液体 1 mL -20℃,避光 建议1/1000稀释
U1524531E 依托泊苷 (10 mM) 液体 100 μL -20℃,避光 建议1/1000稀释

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ26F0838525 分析证书 U1524531
技术文档和文章
溶液计算器

常见问题

本产品应如何储存?
请于?20 °C条件下保存。需冷冻保存以维持规定的有效期。
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本产品采用保温箱配冰袋运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。
什么是「适用于分析」?
「适用于分析」是一个明确定义的分析纯度级别,适用于定量分析方法。它规定了最低含量百分比、对常见杂质(水分、重金属、灼烧残渣)的受控限值,以及批间一致性。「适用于分析」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
什么是「适用于分析」?
「适用于分析」是一个明确定义的分析纯度级别,适用于定量分析方法。它规定了最低含量百分比、对常见杂质(水分、重金属、灼烧残渣)的受控限值,以及批间一致性。「适用于分析」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
什么是「BioReagent」?
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。