Blue High Sensitivity 双链DNA定量试剂盒

货号: W1372296
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级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 分子生物学级 ? 适用于分子生物学 —— 不含降解 DNA/RNA 的核酸酶和污染物。适用于克隆、PCR 和需要洁净试剂的核酸工作。
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200T
W1372296-200T
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1000T
W1372296-1000T
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为什么选择此级别

BioReagent,分子生物学级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

2-8°C储存,避光。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

Blue High Sensitivity 双链DNA定量试剂盒不同于常规的基于吸光度的测量,这款试剂盒可以区分dsDNA、ssDNA或RNA,有选择性地检测dsDNA(见图2)。与传统DNA定量方法相比,本产品具有检测范围广、高灵敏度、高特异性等优点。 Blue High Sensitivity 双链DNA定量试剂盒可以在200 μL体系内定量0.2-100 ng的dsDNA(见图3)。此外,本产品还可以将其他污染物的影响降低至最低,可以耐受常规污染物例如蛋白质,盐,有机溶剂和洗涤剂等(见表1),且 本产品不具有细胞膜通透性,没有细胞毒性和诱发突变性,对人体安全无害。

产品组分表:

W1372296Component200 T1000 TStorage
W1372296A Blue High Sensitivity dsDNA Quantitation Solution 50 mL 250 mL2-8 ℃. Store in the dark. 
W1372296BBlue High Sensitivity dsDNA Enhancer, 100×0.5 mL2 ×1.25 mL2-8 ℃. Store in the dark. 
W1372296C dsDNA Standards. 0 ng/uL dsDNA 0.1 mL 0.5 mL2-8 ℃. Store in the dark. 
W1372296D dsDNA Standards. 0.5 ng/uL dsDNA 0.1 mL 0.5 mL2-8 ℃. Store in the dark. 
W1372296E dsDNA Standards. 1 ng/uL dsDNA 0.1 mL 0.5 mL2-8 ℃. Store in the dark. 
W1372296F dsDNA Standards. 2 ng/uL dsDNA0.1 mL 0.5 mL2-8 ℃. Store in the dark. 
W1372296G dsDNA Standards. 4 ng/uL dsDNA0.1 mL 0.5 mL2-8 ℃. Store in the dark. 
W1372296H dsDNA Standards. 6 ng/uL dsDNA0.1 mL 0.5 mL2-8 ℃. Store in the dark. 
W1372296I  dsDNA Standards. 8 ng/uL dsDNA0.1 mL 0.5 mL2-8 ℃. Store in the dark. 
W1372296J dsDNA Standards. 10 ng/uL dsDNA0.1 mL 0.5 mL2-8 ℃. Store in the dark. 

储存条件

4℃避光保存,有效期见外包装。

产品参数

Ex/Em:485/530 nm(结合 dsDNA)

图 1. 在 dsDNA 过饱和的条件下,Blue的激发与发射光谱图

使用方法

1. 为了得到最佳结果,请使用精确校准的移液器和去 RNA 酶的枪头、试管以及检测板。建议检测时每个 DNA 标样和未知样品都设定 3 个复孔。如果检测时不只一块 96 孔板,建议每块 96 孔板都设定一条标准曲线,尽量减少检测板之间的误差。

2. 使用前,将产品从储存条件下取出恢复至室温。如果 B 组分出现沉淀,可以 37℃水浴溶解。每个组分应充分震荡或涡旋混匀、离心,以免造成不必要的试剂的损耗。

3. 每个待测样品对应 200 µL 的 Blue 工作液。对于一个 96 孔板,吸取 200 µL B 组分,加入到 20 mL A 组分中,涡旋混匀,配制成 Blue 工作液,为得到最佳结果,工作液应在一小时内使用完毕。如果将工作液重新储存并在 24 h 内使用,结果的准确性会有轻微损失。储存过程中,增强液可能会出现沉淀现象,可以通过涡旋震荡使其重悬。

4. 对于每个样品,吸取 200 µL 的工作液至黑色的 96 孔板微孔中。为确保结果精确可靠,建议每个测试样品和 DNA 标样分别做平行 3 个复孔,此过程也可以使用有精确量程的多通道移液器进行。黑色的检测板可以减少各测试样品间的荧光干扰。

5. 在 96 孔板微孔中,每孔加入 10 µL 的 dsDNA 标样或 1-20 µL 未知样品,并用移液器轻轻混匀。

6. 将微孔板室温避光孵育 5-10 min,为得到最佳结果,孵育结束后,应立即读取检测板。也可以在 6 h 内读取数据,但结果的精确性会有轻微损失。

7. 使用激发波长和发射波长在 485 nm 和 530 nm 处的酶标仪测量荧光值。

8. 制作一条标准曲线,计算检测样品的 DNA 浓度(见图 2)。

注:图 3 标准曲线仅供参考,您可以根据实际测得的数据自制标准曲线,从而求算样品的浓度。

图 2. 使用 Blue High Sensitivity 双链 DNA 定量试剂盒检测不同类型核酸得到的相对荧光强度。

图 3. 使用 Blue High Sensitivity 双链 DNA 定量试剂盒制作的 calf thymus DNA 标准曲线(Ex/Em 485/530)。

实验参考因素

1. 对于要检测的植物或动物来源的DNA样本,小牛胸腺DNA(Calf thymus DNA )常常作为制作DNA标样的参照物。 因为Calf thymus DNA具有双链结构、高度聚合,碱基分配均匀(AT含量58%,GC含量42%)。如果检测样品的荧光值超过了标准曲线,那么需要将样品做进一步稀释处理。为了保持结果的一致性,务必使每孔上样量均等,且不含有其他高浓度的污染物。

2. Blue High Sensitivity 双链DNA定量试剂盒可以测量范围在0.2-100 ng的dsDNA。对于一些不需要线性检测的样品,试剂盒检测范围可以扩展至200 ng。如需检测更低含量的样品,您可以将DNA标样用1×TE缓冲液作进一步的稀释,浓度可以稀释到0.02 ng/μL,然后按照常规程序每孔10 μL上样。

3. 对于不同种类的检测仪器,您可以优化仪器设置,以获取最佳线性度。一些可能会影响最终线性度和相对荧光强度的因素有:(1)激发和发射波长与带宽;(2)截止型滤波器;(3)灵敏度设置;(4)移液的准确性;(5)微孔板制造商。

4. 表1详细列出了几种常见的DNA污染物,如盐、溶剂、洗涤剂和蛋白质等。

表 1. 常见的 DNA 污染物对 Blue High Sensitivity 双链 DNA 定量试剂盒的影响

复合物

初始浓度

终浓度(200µL)

结果

醋酸铵

100 mM

5 mM

Pass

醋酸钠

600 mM

30 mM

Pass

氯化钠

200 mM

10 mM

Pass

氯化镁

25 mM

1.25 mM

Pass

苯酚

2 %

0.10 %

Pass

乙醇

10 %

0.5 %

Pass

氯仿

2 %

0.1 %

Pass

十二烷基硫酸钠(SDS)

0.2 %

0.01 %

Pass

Triton X-100

0.2 %

0.01 %

Pass

牛血清白蛋白(BSA)

200 mg/mL

10 mg/mL

Pass*

dNTPs**

2 mM

100 µM

Pass

聚乙二醇

40 %

2 %

 

琼脂糖

2 %

0.1 %


注:三份 dsDNA 平行样品的标准曲线,分别在上述含有指定浓度污染物的条件下(初始浓度进行检测,“Pass”指与没有污染物的体系相比较,实验结果变化范围<20%。所有样品用 Molecular Devices Gemini XS 酶标仪在 485 nm 处激发,在 530 nm 处测荧光强度。“ Pass *”指由此条件测得的标准曲线有少许变动。“dNTPs**”指 dATP, dCTP, dGTP, dTTP 的混合物。

注意事项

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


规格

规格或纯度
BioReagent, 分子生物学级
英文名称
Blue High Sensitivity Double-Stranded DNA Quantification Kit
敏感性
Light sensitive
储存与运输
储存条件
2-8°C储存,避光
运输条件
低温运输
稳定性与储存
Store at 2-8℃ long term (20 months). Store in the dark.

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

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✅ 分析证书 (COA)

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📊 产品数据表

产品规格和应用的快速参考摘要。

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🔬 规格说明书

该级别的完整质量属性和验收标准。

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:

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找到1个结果

批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0825130 分析证书 W1372296
技术文档和文章
溶液计算器

常见问题

什么是「分子生物学级」?
「分子生物学级」表示该产品经过加工和检测,适用于分子生物学和蛋白质组学。典型规格包括:低或不可检测的核酸酶/蛋白酶活性、低内毒素、受控的微生物限度,以及高批间重现性。
什么是「BioReagent」?
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品应如何储存?
请于2–8 °C、避光条件下保存。本品对光敏感,请保存在原始的避光或棕色容器中。
本产品如何运输?
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA?
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