计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
室温。常规运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
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在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
RNA 的种类来源比较多,提取制备的方法各异,一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法,其中最常用的是苯酚法,即 Trizol 法提取 RNA。Trizol 含苯酚和异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞或组织并且灭活核酸酶,保持 RNA 的完整性,工业上常用稀碱法和浓盐法提取RNA,用这两种方法提取的核酸均为变性的 RNA,主要用作制备核苷酸的原料,其工艺相对简单。
本品采用低浓度碱液破裂酵母细胞,然后用酸中和,去除蛋白质和菌体后的上清液用乙醇沉淀 RNA 或调 pH2.5 利用等电点沉淀,酵母细胞含RNA 达 2.5~10%,含 DNA 仅为 0.03~0.5%,因此提取 RNA 多以酵母为原料。
该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
组分表
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自备材料
1、 天平、水浴锅、离心机
2、 DEPC 处理水、无水乙醇
3、 石蕊试纸、布氏漏斗、玻璃棒
4、 经 RNase free 处理的移液器吸头、EP 管等耗材
操作步骤(仅供参考):
1、 配制 RNA 碱性裂解工作液:将 RNA 碱性裂解液(20×)用 DEPC 处理水 20 倍稀释即可。
2、 配制 RNA 沉淀工作液:将 RNA 沉淀液(5×)用无水乙醇 5 倍稀释即可。
3、 准确称取酵母粉 5.0g 置于 100ml 烧杯,加入 40ml RNA 碱性裂解工作液,沸水浴上加热 30min,加热过程中要经常搅拌。
4、 加入数滴 RNA 酸性中和液使提取液呈酸性(用石蕊试纸或 pH 计检查),3000r/min 离心 15min。
5、 取上清,加入 10ml RNA 沉淀工作液,边加边搅动,静置,待 RNA 沉淀完全后,离心。
6、 滤渣先用 95%乙醇洗两次,每次 10ml,再用无水乙醇洗两次,每次 10ml,洗涤时可用细玻璃棒小心搅动沉淀。
7、 用布氏漏斗抽滤,沉淀在空气中干燥,称量 RNA 的质量,计算酵母粉中 RNA 含量。
注意事项
1、 三种试剂均有一定的腐蚀性,污染皮肤或眼睛后,应立即用清水或生理盐水冲洗,必要
时寻求医生的帮助。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
RNA sources are diverse, and various extraction and preparation methods have been established. Commonly used methods include the phenol method (i.e., the Trizol method), detergent‑based methods, and the guanidinium hydrochloride method, among which the Trizol method is the most widely used. Trizol reagent contains phenol, guanidinium thiocyanate, and other components that rapidly lyse cells or tissues and inactivate nucleases (RNases), thereby preserving RNA integrity. In industrial settings, dilute alkali and concentrated salt methods are commonly employed for RNA extraction. Both of these approaches yield denatured nucleic acids and are primarily used for the production of nucleotide raw materials, with relatively simple procedures. This product employs a low‑concentration alkaline solution to disrupt yeast cells, followed by neutralization with acid. After removal of proteins and cell debris, the RNA in the supernatant is collected via ethanol precipitation or by adjusting the pH to 2.5 to precipitate it at its isoelectric point. Yeast cells contain 2.5%–10% RNA but only 0.03%–0.5% DNA, making yeast a commonly used raw material for RNA extraction. This reagent is intended for research use only and is not suitable for clinical diagnosis or other applications.
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