SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X)

货号: S750309
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级别和纯度: BioReagent ? 生物试剂级(BioReagent)—— 经测试适用于生命科学和分子生物学。适用于需要生物相容性的细胞培养、检测和生化工作。 用于聚丙烯酰胺凝胶电泳 ? PAGE 级 —— 适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳的纯度。适用于试剂纯度影响分辨率的蛋白/核酸 PAGE。 for western blot ? Western 印迹级 —— 适用于蛋白转印和免疫检测。适用于试剂纯度可保持低背景的 Western 流程。 1X, 无气味, 不含 DTT
别名
双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) | 双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X | 不含DTT)
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
应用
SDS-PAGE, WB
★
规格
库存
价格
数量
10×1ml
S750309-10×1ml
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为什么选择此级别

BioReagent,for western blot,用于聚丙烯酰胺凝胶电泳 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

-20°C储存,避免反复冻融。超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

产品介绍:

SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X) 是阿拉丁自主研发的一款更加安全无气味、以溴酚蓝为染料的改良型蛋白上样缓冲液。本产品从-20℃取出后可快速融化,不粘稠且节省时间;使用无味、更稳定的新型还原剂代替了DTT和β-巯基乙醇。适用于SDS-PAGE蛋白样品的上样操作,与常规的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液电泳效果基本一致。1X蛋白上样缓冲液可以用于直接裂解蛋白样品,方便快捷,但裂解好的蛋白样品不能用常规的Bradford法或BCA法测定蛋白浓度,所以需要借助考染或WB的检测结果来调整上样量。本产品也可以用于SDS-PAGE时待上样蛋白样品的稀释等。

使用说明:

1. 在室温(10~30℃)融化完全,并混匀。

注:如需要更快速使用,可置于37℃水浴或金属浴中融化,但尽量减少融化后水浴或金属浴放置时间。

2. 制备带上样蛋白样品:
(1)对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μL SDS-PAGE蛋白上样缓冲液( 1X)的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X)和细胞充分接触。通常SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X)接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。裂解后的样品收集到一洁净离心管内。

(2)对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μL SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X)的比例加入SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X)。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再进行裂解。

(3)对于组织样品:

a. 把组织剪切成细小的碎片。

b. 按照每20mg组织加入150-250μL SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X)的比例加入SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X)。如果裂解不充分可以适当添加更多的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X),如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X)的用量。

c. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

d. 充分裂解后,将样品收集到一洁净离心管内。

【注】如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈涡旋使样品裂解充分。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

3. 将上述混合物放入100℃水浴加热5-10分钟,使蛋白变性。

【注】煮沸前如果发现蛋白样品内有粘稠的半透明状物体,可以延长水浴加热时间至8-10分钟后可以确保该粘稠的半透明状物体消失,以便于后续的上样操作。

【注】如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组DNA含量较高,煮沸5-10分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5-10分钟或者加入适量SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 (1X)后再煮沸3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放,同时会导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失,方便上样操作。

4. 冷却至室温后,10000-14000rpm离心2-5分钟,取上清直接上样即可。

5. 通常电泳至溴酚蓝到达胶的底端附近1cm处即可停止电泳。

注意事项:

1. 无气味款和含DTT款SDS-PAGE蛋白上样缓冲液因为含有的还原剂不同,个别蛋白的电泳结果可能会有差异。

2. 本产品含有变性剂,不适用于Native-PAGE。

3. 本产品必须完全融化混匀后再使用。

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服和佩戴一次性手套。


规格

别名
双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X) | 双色SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(1X | 不含DTT)
英文别名
Dual Color SDS-PAGE Protein Sample Loading Buffer, 1X, Odorless | Dual Color SDS-PAGE Protein Sample Loading Buffer (1X)
规格或纯度
BioReagent, 用于聚丙烯酰胺凝胶电泳, for western blot, 1X, 无气味, 不含 DTT
稳定性与储存
Store at -20°C long term (12 months). Upon receipt, it is recommended to aliquot. Avoid freeze/thaw cycle.
英文名称
SDS-PAGE Protein Sample Loading Buffer (1X)
储存条件
-20°C储存,避免反复冻融
运输条件
超低温运输
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液

技术文档

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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0521894 分析证书 S750309
技术文档和文章
溶液计算器