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BHK 无血清培养基 (不含酚红, 含谷氨酰胺)
有货
为什么选择此级别
BioReagent,无菌过滤,用于细胞培养 级 ，适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
储存与运输
2-8°C储存。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
质量文档
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
文献证明
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
概述
BHK 无血清培养基是一款无血清培养基（Serum Free Media Media），不含血清、蛋白及任何动物源成分等，采用高品质原料配制，产品的质量以及稳定性高，培养过程不需要添加血清，适合于BHK 细胞的高密度悬浮培养，支持完全无血清无蛋白体系下BHK快速扩增、高密度培养及病毒疫苗生产。
应用范围
BHK 无血清培养基适用于BHK 细胞悬浮驯化及规模化无血清悬浮培养，可用于狂犬疫苗等生物制品的研发和生产过程，可支持从研发至规模化生产，但不可直接用于人体或作为药物使用。
细胞复苏
1. 37℃水浴中预热BHK无血清培养基;
2.使用75% 酒精喷洒培养基瓶，并置于生物安全柜；
3.复苏1 支细胞，并在37℃ 水浴中，轻轻晃动冻存管，解冻1 分钟；
4.将冻存管中的细胞轻轻移到含有10mL已预热BHK无血清培养基的离心管中；
5. 170g-190g（约800rpm ~ 1000rpm）离心5 分钟，丢弃上清液并将细胞重悬于10 ~ 30mL 新鲜预热的培养基中，调节活细胞密度至1×10⁶ cells/mL mL；
6.取0.5mL 细胞悬液，用细胞计数仪分析活细胞密度（×10⁶ cells /mL）和细胞活率（%）。
7.如果细胞活率 > 90%，将细胞置于规定的环境条件下进行细胞培养。
细胞传代
1.将BHK无血清培养基放入37℃ 条件下预热20-30 min；
2.取活细胞密度 ≥ 7×10⁶ cells/mL 、细胞活率 ≥ 90% 、处于对数生长期中期的细胞进行传代；
3.根据1×10⁶ cells/mL 的接种密度和传代体积，计算所需种子液量；
4.无菌转移所需量的种子液，添加至含所需体积的已预热培养基的摇瓶中；
5.将摇瓶置于规定的环境条件下进行细胞培养；
6.每48 ± 3 小时用新鲜的培养基按上述步骤进行传代培养。
7.传代前，如果活细胞密度低于7.0 ×10⁶ cells/mL mL，或细胞活率低于90%，需要170g-190g（大约800rpm-1000rpm）离心5 分钟处理细胞。轻轻弃上清，使用已预热的培养基重悬细胞，取样计数后进行细胞传代。
细胞适应
直接适应
1.对于可以直接适应的细胞，可以从无血清培养基中直接接种到BHK无血清培养基中，接种密度参考传代步骤，并需要依据具体情况而定。
2.继续传代细胞，直到细胞稳定生长。
3.传代几次后，活细胞密度在接种的48 ± 3 小时内达到7×10⁶ cells/mL 及以上、细胞活率 >90%，且倍增时间稳定，此时可以认为细胞已被驯化成功。
连续适应
1.对于传统的生长在5-10% 血清或无血清的细胞，采用连续适应法，接种密度1×10⁶ cells/mL 。
2.监测细胞生长情况，直到活细胞密度达到 ≥ 7×10⁶ cells/mL 。
3.用BHK无血清培养基：原始培养基 = 25 : 75 的比例稀释细胞。直到这个比例的培养基细胞生长良好，再进一步稀释培养，按25 : 75，50 : 50，75 : 25，90 : 10，100 : 0 。逐提高BHK 无血清培养基的比例。
4.在完全使用BHK无血清培养基接种48 ± 3 小时之后，活细胞计数应该至少达到7×10⁶ cells/mL mL，细胞活率 ≥ 。此时，细胞已经完全适应BHK无血清培养基。
细胞冻存
1.准备处于对数生长中期的、细胞活率 > 90% 、状态较好的细胞。
2.测定活细胞密度，计算所需的冻存培养基体积，最终活细胞密度 > 1×10⁷ cells/mL 。
3.准备所需的冻存培养基：93% BHK无血清培养基+7%DMSO，4℃ 冷藏保存。
4. 170g-190g（大约800rpm1000rpm）离心5 分钟，弃去上清，用冻存培养基重新悬浮细胞。
5.根据项目具体需要，将悬浮液进行等分保存于适宜规格的冻存管中。
6.按照标准程序，对冻存管进行自动或手工操作降温（每分钟降1℃）。
7.将细胞转移到液氮罐中保存。
BHK Serum-Free Medium is a serum-free medium formulated without serum, proteins, or any animal-derived components. It is prepared with high-quality raw materials to ensure high product quality and stability. The culture process does not require serum supplementation, making it suitable for high‑density suspension culture of BHK cells. It supports rapid BHK cell expansion, high‑density culture, and viral vaccine production under a completely serum‑free and protein‑free system.
Applications
BHK Serum‑Free Medium is suitable for suspension adaptation and large‑scale serum‑free suspension culture of BHK cells. It can be used in the research, development, and production of biologics such as rabies vaccines, supporting processes from R&D to industrial scale. However, it is not intended for direct use in humans or as a pharmaceutical product.
Cell Recovery
1.Pre‑warm BHK Serum‑Free Medium in a 37°C water bath.
2.Spray the medium bottle with 75% alcohol and place it in a biosafety cabinet.
3.Thaw one vial of cells by gently swirling it in a 37°C water bath for 1 minute.
4.Carefully transfer the cells from the cryovial to a centrifuge tube containing 10 mL of pre‑warmed BHK Serum‑Free Medium.
5.Centrifuge at 170–190 g (approximately 800–1000 rpm) for 5 minutes. Discard the supernatant and resuspend the cell pellet in 10–30 mL of fresh pre‑warmed medium. Adjust the viable cell density to 1×10⁶ cells/mL.
6.Take 0.5 mL of the cell suspension and analyze the viable cell density (×10⁶ cells/mL) and cell viability (%) using a cell counter.
7.If the cell viability is >90%, place the cells under the specified environmental conditions for culture.
Cell Passage
1.Pre‑warm BHK Serum‑Free Medium at 37°C for 20–30 minutes.
2.Use cells in the mid‑logarithmic growth phase with a viable cell density ≥7×10⁶ cells/mL and cell viability ≥90% for subculturing.
3.Calculate the required seed culture volume based on an inoculation density of 1×10⁶ cells/mL and the passage volume.
4.Aseptically transfer the required volume of seed culture into a shake flask containing the appropriate volume of pre‑warmed medium.
5.Place the shake flask under the specified environmental conditions for cell culture.
6.Subculture every 48 ± 3 hours with fresh medium following the above procedure.
7.Before passaging, if the viable cell density is below 7.0×10⁶ cells/mL or the cell viability is below 90%, centrifuge the cells at 170–190 g (approximately 800–1000 rpm) for 5 minutes. Gently discard the supernatant, resuspend the cells in pre‑warmed medium, take a sample for counting, and then proceed with passaging.
Cell Adaptation
Direct Adaptation
1.For cells that can be directly adapted, they can be inoculated directly from their current serum‑free medium into BHK Serum‑Free Medium. The seeding density should follow the passaging procedure but may be adjusted based on specific conditions.
2.Continue subculturing the cells until stable growth is achieved.
3.After several passages, when the viable cell density reaches ≥7×10⁶ cells/mL within 48 ± 3 hours of inoculation, cell viability is >90%, and the doubling time is stable, the cells can be considered successfully adapted.
Sequential Adaptation
1.For cells conventionally grown in 5–10% serum‑containing or serum‑free media, use a gradual adaptation method with an initial seeding density of 1×10⁶ cells/mL.
Monitor cell growth until the viable cell density reaches ≥7×10⁶ cells/mL.
2.Dilute the cells with a mixture of BHK Serum‑Free Medium and the original medium at a ratio of 25:75 (BHK:original). Once cells grow well in this ratio, further dilute stepwise by increasing the proportion of BHK Serum‑Free Medium: 25:75 → 50:50 → 75:25 → 90:10 → 100:0.
3.After complete replacement with BHK Serum‑Free Medium, within 48 ± 3 hours of inoculation, the viable cell count should reach at least 7×10⁶ cells/mL with cell viability ≥90%. At this point, the cells are fully adapted to BHK Serum‑Free Medium.
Cell Cryopreservation
1.Prepare cells in the mid‑logarithmic growth phase with viability >90% and in good condition.
2.Determine the viable cell density and calculate the required volume of cryopreservation medium so that the final viable cell density is >1×10⁷ cells/mL.
3.Prepare the cryopreservation medium: 93% BHK Serum‑Free Medium + 7% DMSO, and store at 4°C.
4.Centrifuge at 170–190 g (approximately 800–1000 rpm) for 5 minutes. Discard the supernatant and resuspend the cells in the cryopreservation medium.
5.Aliquot the cell suspension into appropriate cryovials according to project requirements.
6.Follow standard procedures to cool the cryovials automatically or manually (at a rate of approximately 1°C per minute).
7.Transfer the cells to liquid nitrogen for long‑term storage.
规格
别名
BHK-21无血清培养基
英文别名
BHK-21 Serum-Free Medium (SFM)
规格或纯度
无菌过滤, BioReagent, 用于细胞培养, 内毒素 ＜10 EU/mL; 渗透压 300-355 mOsm/kg
稳定性与储存
Store at 2-8℃ long term (12 months). Store in the dark.
英文名称
BHK Serum-Free Medium (Phenol Red-Free, with L-Glutamine)
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
产品线
生物产品
名称和识别符
分子类型
生物试剂/缓冲液
技术文档
高级数据
产品属性
| pH | 7.0-7.4 |
|---|
化学和物理性质
敏感性
Light sensitive
质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ26F1039637 |
分析证书 | B1525348 |
技术文档和文章
细胞培养中的培养基和补充剂
目录： 技术文章
用于细胞培养
目录： 阿拉丁试剂的规格、级别和纯度
溶液计算器
常见问题
什么是「无菌过滤」？
「无菌过滤」表示该物料经过加工和检测，适用于特种工业加工。规格侧重于影响该应用性能的杂质——例如，电子应用的金属含量、电池应用的粒度、光学应用的折射率，或对水分敏感工艺的水分含量。
什么是「BioReagent」？
「BioReagent」表示该产品经过加工和检测，适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性，以及在相关情况下的生物活性验证。
本产品应如何储存？
请于2–8 °C条件下保存。需冷藏保存以维持规定的有效期。
本产品如何运输？
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包，并按上述储存条件保存。
如何获取批次专用COA？
每个订单都会随附分析证书（COA），您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA，请联系您的客户代表，或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。
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