【阿拉丁】脂质染色｜脂滴、胆固醇、髓鞘染色怎么选？

       常规石蜡制片过程可能导致部分脂质流失。脂滴及游离胆固醇原位检测通常优先采用冰冻切片；髓鞘染色应根据目标脂质和具体染色方法选择合适的制片方式。实验选用温和固定体系；强有机溶剂、过度透化易造成脂类组分丢失。荧光探针操作全程注意避光。

1. 脂滴染色

       油红 O：脂溶性染料，富集于中性脂滴，呈红 / 橙红色。适配冰冻切片、细胞样本，可开展图像半定量；染液使用前需过滤。

       尼罗红：疏水性荧光染料，在脂环境中荧光增强，适合活细胞、微生物脂滴高通量筛查，多用于组间相对比较。

       BODIPY 荧光探针：硼二吡咯甲川类探针，实现脂滴成像，兼容荧光成像、流式、多通道共染。

2. 胆固醇染色

       菲律平（Filipin）：与游离胆固醇结合产生蓝紫色荧光，用于胆固醇转运、溶酶体脂质储积研究，仅表征游离胆固醇，不等同总胆固醇。

       BODIPY系列探针，可用于脂质代谢相关研究与动态追踪，兼容荧光成像、流式分析。

3. 髓鞘脂质染色

       苏丹黑 B：可标记中性脂质、磷脂、髓鞘脂质，多用于神经髓鞘、血细胞染色；苏丹 Ⅲ/Ⅳ 用于常规髓鞘脂质组织观察，需关注非特异性背景。

       锇酸：和不饱和脂质发生反应，多用于电镜样本后固定与髓鞘超微结构观察。试剂毒性较高，需通风环境规范操作，不适用于大批量常规染色。

✔ 脂滴：组织样本可选油红 O；细胞定量、高通量筛选选用 BODIPY；快速筛查可用尼罗红

✔ 游离胆固醇：菲律平；BODIPY 探针可辅助脂质代谢追踪

✔ 髓鞘脂质：苏丹黑 B；电镜超微观察选用锇酸

四、温馨提示

• 常规石蜡制片可能导致部分脂质流失，脂滴及游离胆固醇原位检测通常优先采用冰冻切片；部分髓鞘染色方法也适用于石蜡切片，具体需根据染色方法确定。

• 染色信号不足常与样本前处理、染色条件相关，实验建议设置阳性对照；油红 O 染液使用前需过滤，荧光染色配套空白对照。

• 图像定量分析时，需统一切片厚度、染色时长与成像参数。

• 多数脂质染色仅反映脂质富集区域，无法区分具体脂质亚型，如需精准鉴定脂质组分，可结合脂质组学等手段。