计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent,for DNA and RNA applications 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
室温。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
DNA纯化试剂盒适合于从粗制基因组DNA产物、PCR产物、酶反应液中纯化DNA,可高效去除 色素、蛋白质和多糖、引物二聚体等杂质,回收率可达80%以上(每个吸附柱每次可吸附的DNA 量为20µg)。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库 筛选、连接和转化等实验。
产品组分表:
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注意事项
1. 回收小于100 bp及大于10 kb的DNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
2. 回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。
3. 步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
DNA纯化步骤 (粗制DNA、PCR产物、酶反应液)
1. 将粗制DNA、PCR产物或酶反应液转移至1.5 mL离心管中,加入3倍样品体积的结合液DP,涡旋混匀5秒,室温放置5分钟以灭活酶类物质。
2. 将新的纯化柱B10置于新的2mL收集管中 (柱管配套使用)。
3. 将步骤1所得混合液全部转移至纯化柱B10中,12,000 rpm(约13,400×g)离心30–60秒,倒掉收集管中的废液,将纯化柱B10放回收集管中。
4. 向纯化柱B10中加入500 μL漂洗液SW2,12,000 rpm (约13,400×g) 离心30–60秒,倒掉收集管中的废液,将纯化柱B10放回收集管中。
5. 重复步骤4一次 (共漂洗两次)。
6. 将纯化柱B10放回收集管中,12,000 rpm (约13,400×g) 离心2分钟,尽量除去残留漂洗液。
7. 将纯化柱B10转移至一个干净的1.5 mL离心管中,向吸附膜中央位置悬空滴加适量洗脱液EB (洗脱体积不应小于30 μL,体积过少会降低回收效率),室温放置2–5分钟,12,000 rpm (约13,400×g) 离心2分钟,收集含有纯化DNA的洗脱液。
注:
● 洗脱液的pH值对洗脱效率影响较大。若后续进行测序,建议使用ddH₂O作为洗脱液,并确保其pH值在7.0–8.5范围内 (pH值低于7.0会降低洗脱效率);也可使用10 mM Tris-Cl (pH 8.0) 进行洗脱。纯化后的DNA产物建议保存于-20°C,以防降解。
● 为提高DNA回收量,可将离心得到的洗脱液重新加回纯化柱吸附膜上,再次离心洗脱一次。进行粗制基因组DNA纯化时,建议将洗脱液EB预热至70°C,加至吸附膜后放置5分钟再离心,可显著提高回收率。
| 组分货号 | 组分名称 | 物理外观 | 50 T | 储存 |
| D1373545A | 结合液DP | 液体 | 30 ml | 室温 |
| D1373545B | 漂洗液SW2 | 液体 | 60 ml | 室温 |
| D1373545C | 洗脱液EB | 液体 | 6 ml | 室温 |
| D1373545D | 纯化柱B10 | — | 50 EA | 室温 |
| D1373545E | 2mL 收集管 | — | 50 EA | 室温 |
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
| 分析证书 | D1373545 |
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