重组内切蛋白酶Glu-C(V8蛋白酶)

CAS: 137010-42-5 货号: E1505824 EC号: 805-156-0
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级别和纯度: 生物活性 ? 生物活性级(Bioactive)—— 经验证在功能检测中保持生物活性。当分子须具有功能活性而不仅是纯度时使用。 重组 ? 重组(Recombinant)—— 通过重组表达生产,序列确定、批次稳定。适用于来源明确、无动物源的可重现蛋白。 质谱级 (MS) ? 适用于质谱(MS)—— 非挥发性和离子残留低,与质谱兼容。用于在质谱流程中尽量降低背景和离子抑制。 ActiBioPure™ ? ActiBioPure™ —— 阿拉丁面向生物活性和重组产品的优质系列。当同时需要高纯度和保持生物活性时使用。 高性能 ? 高性能级 —— 纯度和性能特性经过优化。适用于普通等级无法满足的灵敏分析。 EnzymoPure™ ? EnzymoPure™ —— 阿拉丁的高质量酶解决方案系列。当酶纯度和明确活性决定检测或工艺性能时使用。 His标签 ? 组氨酸(His) 标签级 —— 带有 His 标签的重组蛋白,供亲和纯化/检测。用于纯化、固定或检测带标签蛋白。 ≥5 U/mg protein
Accession #
P0C1U8
蛋白标签
C-His
表达系统
E. coli
生物活性
5 U/mg protein
★
规格
库存
价格
数量
50μg
E1505824-50μg
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¥2,199.90
100μg
E1505824-100μg
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1mg
E1505824-1mg
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为什么选择此级别

ActiBioPure™,EnzymoPure™,His标签,生物活性,质谱级 (MS),重组,高性能 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。

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储存与运输

2-8°C储存。低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。

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质量文档

SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。

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文献证明

在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。

概述

V8蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶家族,能特异水解谷氨酸(Glutamic acid、E)或天冬氨酸(Aspartic acid、D)残基羧基侧肽键。在pH 7.8的NH₄HCO₃和pH 4.0的 CH₃COONH₄缓冲液中识别并切割Glu羧基端肽键,在pH 7.8的磷酸盐缓冲液中识别并切割Glu或Asp羧基端肽键,且对Glu的水解速率高于Asp。


产品应用

在进行蛋白质酶切测序、肽图谱分析和肽质量指纹图谱分析中使用时,可以单独使用或与其他蛋白酶混合使用。


基本特性

V8蛋白酶在pH4.0-10.0之间均有活性,最适pH为8.0-8.5。V8蛋白酶的抑制剂有二异丙基氟磷酸(DFP)、α2-巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺酰基-L-赖氨酸氯甲基酮(TLCK)。


使用方法

使用前注意:可按使用量分装以最大限度避免污染或自切。

目的蛋白溶解:用酶切buffer溶解目的蛋白,例如25-50 mM NH4HCO3 pH 7.8,若溶解度不好对目的蛋白变性,添加尿素、SDS、DTT或加热。尿素和SDS对V8蛋白酶的影响见表一。

酶切:V8蛋白酶和目的蛋白推荐比例为1/20-1/100(W/W),25℃或37℃酶切2-18h。


表一:V8蛋白酶在含有不同浓度变性剂,尿素25℃2h,SDS25℃12h的稳定性

(注:V8蛋白酶0.5mg/ml,50mM Tris-HCl pH8.0)


应用举例:重组V8酶切胰岛素

100 μl胰岛素溶液+198 μl 0.4 M Tris-HCl pH 8.0+60 μl 0.1%V8蛋白酶液+超纯水补至400 μl。37 ℃水浴反应2 h,加6 μl磷酸溶液终止反应,C18柱分析:


储存

储存稳定性:重组V8蛋白酶冻干粉存于2-8℃,24个月稳定;

溶解后稳定性:用水或50 mM Tris-HCl pH 8.0溶解以后存于-20℃ 以下(1mg/ml),6个月稳定;用水或50 mM Tris-HCl pH 8.0溶解以后存于4℃(1mg/ml,无菌),2个月稳定;用50 mM Tris-HCl pH 8.0溶解以后存于25℃或37℃(0.5mg/ml)12h,活性可维持85%以上;溶解后溶液可反复冻融10次无活性损失。


产品优势

序列分析纯胰蛋白酶:特异性高,稳定性好。

无动物源性:重组生产,无外源性的病毒污染,生产过程不使用任何动物源原料。

质量稳定:批量生产,可保证稳定连续的批次生产;产品批次间无差异,质量稳定。

纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。

冻干粉:易于储存和运输。

符合法规要求:生产设备和生产环境符合相关法规要求,生产过程完全遵循ISO 9001:2015质量体系并符合GMP指导原则。

质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。

V8 protease belongs to the serine protease family and specifically hydrolyzes the peptide bonds on the carboxyl side of glutamic acid (Glu, E) or aspartic acid (Asp, D) residues. It recognizes and cleaves the carboxyl-terminal peptide bonds of Glu in NH₄HCO₃ buffer (pH 7.8) and CH₃COONH₄ buffer (pH 4.0). In phosphate buffer (pH 7.8), it recognizes and cleaves the carboxyl-terminal peptide bonds of both Glu and Asp, with a higher hydrolysis rate for Glu than for Asp.


Product Applications

When used in protein digestion for sequencing, peptide mapping analysis, and peptide mass fingerprinting analysis, it can be used alone or mixed with other proteases.


Basic Properties

V8 protease is active in the pH range of 4.0–10.0, with an optimal pH of 8.0–8.5.

Inhibitors of V8 protease include diisopropyl fluorophosphate (DFP), α₂-macroglobulin, and Nα-p-tosyl-L-lysine chloromethyl ketone (TLCK).


Usage Method

Precautions before use: Aliquot according to the required amount to minimize contamination or autolysis.

Dissolution of target protein: Dissolve the target protein in digestion buffer (e.g., 25–50 mM NH₄HCO₃, pH 7.8). If solubility is poor, denature the target protein by adding urea, SDS, DTT, or heating. The effects of urea and SDS on V8 protease are shown in Table 1.

Digestion: The recommended mass ratio of V8 protease to target protein is 1:20–1:100 (W/W). Perform digestion at 25°C or 37°C for 2–18 hours.

Table 1: Stability of V8 protease in the presence of denaturants at different concentrations (urea: 25°C for 2 hours; SDS: 25°C for 12 hours)
(Note: V8 protease concentration: 0.5 mg/ml; buffer: 50 mM Tris-HCl, pH 8.0)

Application Example: Digestion of Insulin with Recombinant V8 Protease

Mix 100 μl insulin solution, 198 μl 0.4 M Tris-HCl (pH 8.0), 60 μl 0.1% V8 protease solution, and make up to 400 μl with ultrapure water. Incubate in a water bath at 37°C for 2 hours, then add 6 μl phosphoric acid solution to terminate the reaction. Analyze using a C18 column.

Storage

Storage stability: Lyophilized recombinant V8 protease is stable for 24 months when stored at 2–8°C.

  • After reconstitution in water or 50 mM Tris-HCl (pH 8.0), it is stable for 6 months when stored below -20°C at a concentration of 1 mg/ml.
  • After reconstitution in water or 50 mM Tris-HCl (pH 8.0), it is stable for 2 months when stored at 4°C at a concentration of 1 mg/ml (aseptic condition).
  • After reconstitution in 50 mM Tris-HCl (pH 8.0), it retains over 85% of its activity for 12 hours when stored at 25°C or 37°C at a concentration of 0.5 mg/ml.
  • The reconstituted solution can withstand 10 freeze-thaw cycles without any loss of activity.

Product Advantages

Sequence-grade trypsin (analytical pure): High specificity and good stability.

Animal-origin-free: Produced by recombination, no exogenous virus contamination, and no animal-derived raw materials used in the production process.

Stable quality: Manufactured in batches to ensure stable and continuous production; no variation between batches, with consistent quality.

High purity: High specific activity; residual host protein is below the limit required for biological products.

Lyophilized powder: Easy to store and transport.

Compliance with regulatory requirements: Production equipment and environment meet relevant regulatory requirements; the production process fully complies with the NSF ISO 9001:2015 quality system and GMP guidelines.

Complete quality documents: Relevant regulatory support documents can be provided upon customer request.

规格

产品名称
重组内切蛋白酶Glu-C(V8蛋白酶)
规格或纯度
生物活性,重组,质谱级 (MS),ActiBioPure™,高性能,EnzymoPure™,His标签,≥5 U/mg protein
生化机理
Preferentially cleaves peptide bonds on the carboxyl-terminal side of aspartate and glutamate. Along with other extracellular proteases it is involved in colonization and infection of human tissues. Required for proteolytic maturation of thiol protease SspB and inactivation of SspC, an inhibitor of SspB. It is the most important protease for degradation of fibronectin-binding protein (FnBP) and surface protein A, which are involved in adherence to host cells. May also protect bacteria against host defense mechanism by cleaving the immunoglobulin classes IgG, IgA and IgM. May be involved in the stability of secreted lipases. The cascade of activation of extracellular proteases proceeds from the metalloprotease aureolysin (aur), through SspA to SspB. Post-translational: Proteolytically cleaved by aureolysin (aur). This cleavage leads to the activation of SspA.
生物活性
5 U/mg protein
表达系统
E. coli
种属
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)
蛋白标签
C-His
无载体
Yes
无动物源
Yes
来源
重组表达
预测分子量
24.0±2.4 kDa
CAS编号和信息
137010-42-5
酶学委员会编号
EC 3.4.21.19
分子类型
酶
产品线
生物产品
储存与运输
物理形态
冻干(Lyophilized)
浓度
≥5 U/mg protein
复溶
Reconstitute in water or 50 mM Tris-HCl (pH 8.0) to a concentration of 1.0 mg/ml.
储存条件
2-8°C储存
运输条件
低温运输
稳定性与储存
长期储存2-8℃(24个月);复溶后建议分装,避免反复冻融。
单位定义
中文:在25℃,pH7.8的条件下,每分钟催化底物(Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide)生成1μmol对硝基苯胺(4-nitroaniline)所需要的酶量为一个酶活性单位。

技术文档

📋 安全数据表 (SDS)

全面的危险、操作、储存及法规合规文件。

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✅ 分析证书 (COA)

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📊 产品数据表

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高级数据

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)
C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F1230173 分析证书 E1505824
ZJ25F1230172 分析证书 E1505824
技术文档和文章
溶液计算器

常见问题

什么是「生物活性」?
「生物活性」表示该产品经过加工和检测,适用于生物和生化应用。规格可能包括内毒素限值、微生物控制、无菌性、低 DNase/RNase/蛋白酶活性,以及在相关情况下的生物活性验证。
什么是「重组」?
「重组」是一个明确定义的分析纯度级别,适用于需要特定验证属性的工作流程。它规定了最低含量百分比、对常见杂质(水分、重金属、灼烧残渣)的受控限值,以及批间一致性。「重组」是几个纯度级别之一——请根据方法的灵敏度和监管要求进行选择。
本产品应如何储存?
请于2–8 °C条件下保存。需冷藏保存以维持规定的有效期。
本产品如何运输?
本产品采用湿冰冷藏运输。收货后请立即拆包,并按上述储存条件保存。
本产品的 CAS 号、分子式和分子量是多少?
本产品的 CAS 号为 137010-42-5。
如何获取批次专用COA?
每个订单都会随附分析证书(COA),您也可以从账户订单历史中下载。如需订购前的COA,请联系您的客户代表,或使用PDP上的"申请COA"按钮——我们将提供代表性批次的COA。