质谱级 (MS)
质谱级 (MS)
质谱级(MS Grade):概述
质谱级(MS Grade)试剂是指专为质谱(MS)应用设计的高纯度化学品和生物制品,它们具有以下特点:
· 污染物含量低(尤其是盐类、去污剂、金属离子和聚合物)
· 不含干扰离子,有助于降低背景噪音
· 高度可重现性,确保质谱信号的变异性最小
这些试剂对于以下方面至关重要:
· 提高信噪比 (S/N)
· 改善检测灵敏度和定量准确性
· 保护仪器性能(减少离子源或液相色谱柱的污染)
质谱级生物试剂的类别
1. 质谱级溶剂
用于样品制备、流动相和肽段纯化。
溶剂 | 用途 | 质谱级品牌/类型 |
LC-MS 流动相 | Thermo Fisher Optima, Sigma LC-MS | |
样品萃取,流动相 | ||
蛋白质沉淀 | ||
复溶,稀释 | ||
增强离子化效率 | Optima (Fisher), MS 级 TFA | |
肽段洗脱,抑制效应调节 | 测序级 (Sequencing grade) |
2. 质谱级酶制剂
用于蛋白质组学中的蛋白质酶解。
酶 | 功能 | 质谱级示例 |
在赖氨酸(K)/精氨酸(R)位点切割 | Promega Trypsin Gold, Thermo MS-Grade Trypsin | |
增强特定切割位点 | Sigma 测序级 Lys-C | |
去除 N-连接糖链 | NEB MS 兼容型 PNGase F |
3. 特点:
- 高度纯化并经过修饰以抵抗自降解
- 不含角蛋白或微生物污染
4. 质谱兼容型去污剂 & 表面活性剂
有助于蛋白质溶解,同时对质谱友好。
表面活性剂 | 特性 | 示例 |
RapiGest | 酸可裂解型 | Waters |
ProteaseMAX | 增溶 + 可降解 | Promega |
SDC (脱氧胆酸钠) | 酸化后可沉淀 | Sigma MS 级 SDC |
5. 避免使用 SDS 或 Triton X-100,除非在质谱分析前已完全去除。
6. 还原剂和烷基化试剂
用于样品变性和二硫键断裂。
试剂 | 用途 | 质谱级注意事项 |
还原剂 | 不含硫醇类污染物 | |
稳定的还原剂 | 不易挥发,无味 | |
IAA / CAA | 烷基化试剂 | 防止二硫键重新形成 |
7. 肽段/蛋白质标准品和校准品
用于归一化、定量或保留时间校准。
标准品 | 用途 | 示例 |
iRT 肽段 | 保留时间校准 | Biognosys |
重标肽段 | 绝对定量 | Thermo, JPT |
酶解蛋白质标准品 | 仪器校准 | BSA, 肌红蛋白酶解物 (MS 认证级) |
8. 脱盐与纯化试剂
在上机(进样)前去除抑制质谱的污染物至关重要。
工具/试剂 | 用途 | 品牌 |
C18 ZipTips | 肽段脱盐 | Millipore, Thermo |
StageTips, SPE 柱 | 样品浓缩 | Waters Sep-Pak, Oasis |
磁珠 (如 SP3) | 蛋白质组学样品制备 | Thermo, GE Healthcare |
使用质谱级试剂的最佳实践
· 检查质谱级认证: 不要仅凭常规分析纯标签就假定其纯度符合质谱要求。
· 佩戴手套并使用带滤芯的移液器吸头: 避免角蛋白和其他污染物。
· 避免增塑剂和可浸出物: 选择低吸附塑料或玻璃容器。
· 预洗容器: 特别是在用于长期储存或流动相混合时。
· 使用标准肽混合物测试新批次试剂: 以确保低背景干扰。
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