计算溶液所需的质量、体积或浓度。
BioReagent 级 ,适用于对基线干扰要求严格的色谱和分析工作流程。
2-8°C储存,避光,室温,-20°C储存。常规运输,低温运输,超低温运输 。请查阅批次 COA 获取详细规格。
SDS、COA、产品数据表及规格说明书均可下载。可通过批号查询获取批次 COA。
在色谱分析、有机合成和交叉偶联反应领域已被 0 篇同行评审文献引用。
大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)属于革兰氏阴性短杆菌,大小 0.5×1-3微米,周生鞭毛,能运动,无芽孢,能发酵多种糖类产酸、产气,是人和动物肠道中的正常栖居菌,婴儿出生后即随哺乳进入肠道,与人终身相伴,几乎占粪便干重的 1/3,获得 DNA 的量很高,纯度一般但足够用于大多数分子生物学实验,CTAB 是一种阳离子去污剂,在高离子强度的溶液里 CTAB 与蛋白质和大多数酸性多聚糖以外的多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸,因此 CTAB 可从产生粘多糖的有机体如植物及某些革兰氏阴性菌中制备纯化 DNA。
本品是简便的利用 CTAB 提取大肠杆菌基因组 DNA 的试剂盒,其提取原理是利用蛋白酶 K 消化蛋白,CTAB 沉淀多糖,再经加热使蛋白变性与 DNA 分离,乙醇沉淀核酸获得基因组 DNA,可进行酶切、PCR 等下游实验。
该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
组分表
注:发货时各组分依据储存温度(室温/2‑8℃/-20℃)独立包装,差异化温控运输以保障产品性能。同一订单含多温区物料可能分批次送达,请以实际收货为准。收货后按组分表标注温度分类存放,有效期自生产之日起 12 个月。 |
自备材料
1、 离心管、离心机、摇床、恒温箱或水浴锅
2、 70%乙醇
操作步骤(仅供参考)
1、 取 1.5ml 菌液置于 EP 管,10000 rpm 离心 2min,弃上清液,再次加入 1.5ml 菌液,重复该步骤 1 次。
2、 加入 30μl Eco 裂解液和 3μl 蛋白酶 K 溶液,充分混匀,37℃孵育 1h。
3、 加入 180μl CTAB 沉淀液,充分混匀,65℃孵育 10min。
4、 加入 780μl 蛋白清除液,充分混匀,12000 rpm 离心 5~10min。
5、 转移上清至新 EP 管,加入 2 倍体积的 Eco 漂洗液,混匀,-20℃放置 30min 或过夜。
6、 13000 rpm 离心 10min,弃上清液,加入 70%乙醇洗涤沉淀。
7、 13000 rpm 离心 10min,弃上清液,室温干燥 DNA 沉淀。
8、 向沉淀中加入 100μl 或适量 TE Buffer 溶解沉淀,-20℃保存;TE Buffer 体积越大,DNA 浓度越低。
注意事项
1、 用于裂解的噬菌体、宿主菌越新鲜,裂解越好、收获量越大。
2、 Eco 裂解液在低温条件下会凝固,可用 40~50℃温水助溶。
3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Escherichia coli (E. coli) is a Gram-negative, short rod-shaped bacterium, approximately 0.5 µm × (1–3 µm) in size. It is peritrichously flagellated, motile, non-spore-forming, and capable of fermenting various sugars to produce acid and gas. It is a normal commensal inhabitant of the intestinal tract of humans and animals. After birth, E. coli colonizes the infant gut through feeding and remains throughout life, accounting for approximately one-third of the fecal dry weight. DNA obtained from E. coli is of relatively high yield but moderate purity, which is generally sufficient for most molecular biology experiments. CTAB (cetyltrimethylammonium bromide) is a cationic detergent. In solutions of high ionic strength, CTAB forms complexes with proteins and polysaccharides (with the exception of most acidic polysaccharides), but does not bind to nucleic acids. By adjusting the salt concentration, nucleic acids can be released from CTAB complexes and precipitated, enabling DNA purification from polysaccharide-rich organisms (such as plants and certain Gram-negative bacteria). This product is a convenient CTAB-based genomic DNA extraction kit for E. coli. The principle is as follows: proteins are digested by proteinase K; polysaccharides are precipitated by CTAB; proteins are denatured and separated from DNA by heating; and finally, genomic DNA is obtained by ethanol precipitation. The resulting DNA can be used in downstream applications such as restriction enzyme digestion and PCR. This kit is intended for research use only and is not suitable for clinical diagnosis or other applications.
| 储运单元货号 | 储运单元名称 | 组分货号 | 组分名称 | 物理外观 | 50T | 储存 |
| E1527100NT | 大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒 (CTAB沉淀法) (常温组分) | E1527100A | Eco 裂解液 | 液体 | 1.5ml | 室温 |
| E1527100B | CTAB 沉淀液 | 液体 | 10ml | 室温 | ||
| E1527100C | Eco 漂洗液 | 液体 | 100ml | 室温 | ||
| E1527100D | TE 缓冲液 | 液体 | 50ml | 室温 | ||
| E1527100WT | 大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒 (CTAB沉淀法) (2-8℃组分) | E1527100E | 蛋白清除液 | 液体 | 50ml | 2-8℃. 避光 |
| E1527100DT | 大肠杆菌基因组DNA提取试剂盒 (CTAB沉淀法) (-20℃组分) | E1527100F | 蛋白酶 K 溶液 | 液体 | 0.5ml | -20℃ |
注:发货时各组分依据储存温度(室温/2‑8℃/-20℃)独立包装,差异化温控运输以保障产品性能。同一订单含多温区物料可能分批次送达,请以实际收货为准。收货后按组分表标注温度分类存放,有效期自生产之日起 12 个月。